貴州不同產(chǎn)地南沙參多糖含量的測(cè)定

馬洪娜　檀龍顏　羅興勇

【摘 要】 目的：評(píng)價(jià)不同產(chǎn)地南沙參藥材的質(zhì)量，測(cè)定貴州10個(gè)不同產(chǎn)地南沙參藥材總多糖含量。方法：采用水提醇沉法提取總多糖，以葡萄糖為對(duì)照品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，利用硫酸-苯酚法和紫外分光光度計(jì)測(cè)定多糖含量。結(jié)果：不同產(chǎn)地的南沙參總多糖含量差異較大，其中以納雍和安順產(chǎn)南沙參總多糖含量較高，分別為21.978%和19.901%，而六枝和水城產(chǎn)南沙參總多糖含量較低，分別為6.378%和6.738%。結(jié)論：納雍和安順產(chǎn)南沙參藥材的質(zhì)量較好，納雍和安順為南沙參種植的較適宜地區(qū)。

【關(guān)鍵詞】 產(chǎn)地; 南沙參; 多糖; 質(zhì)量評(píng)價(jià)

【中圖分類號(hào)】R282.4 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2019）13-0025-03

南沙參為桔梗科植物輪葉沙參 Adenophora tetraphylla或沙參A.stricta的干燥根，具有養(yǎng)陰清肺、祛痰止咳等功效[1]。同時(shí)，南沙參多糖具有防輻射、抗衰老和保肝等作用[2-4]。貴州產(chǎn)南沙參以多糖含量進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)至今尚未見報(bào)道。本試驗(yàn)以多糖含量為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)貴州不同產(chǎn)地南沙參藥材質(zhì)量進(jìn)行評(píng)價(jià)，以期為貴州南沙參的開發(fā)利用提供一定的基礎(chǔ)資料。

1 儀器與試劑

1.1 儀器 紫外分光光度計(jì)（UV-5900，上海元析儀器有限公司）;電子天平（XS205，瑞士梅特公司）;回流裝置，水浴鍋（HH-6，常州澳華儀器有限公司）;數(shù)顯電熱鼓風(fēng)干燥箱（GZX-9070MBE，上海博訊公司）。

1.2 試藥 D-無水葡萄糖（中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)110833-201506）;95%乙醇（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，AR，批號(hào)：20151222）;苯酚（重慶川東化工有限公司，AR，批號(hào)：20130501）;濃硫酸（重慶川東化工有限公司，AR，批號(hào)：20160601）。試驗(yàn)用水為超純水。

1.3 南沙參樣品 南沙參生藥分別采自于貴州高坡、施秉、普定、織金、花溪、六枝、水城、安順、黔西和納雍等不同地區(qū)，經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院藥用植物與栽培教研室檀龍顏副教授鑒定為輪葉沙參 Adenophora tetraphylla。

2 方法與結(jié)果

2.1 多糖的提取與精制 將南沙參藥材切片后，按馮澤岸等[1]的方法處理得南沙參多糖，得率約14%。

2.2 多糖的定性檢查 采用Fehling試驗(yàn)法，參考梁莉等[5] 的方法：取2只10mL試管，分別加入供試品溶液1mL、Fehling試劑2mL，1只試管中加入鹽酸（2mol·L-1）0.5mL，2只試管于沸水浴加熱，加酸試管有磚紅色沉淀生成，表明多糖酸解后發(fā)生反應(yīng)。

2.3 試液的制備 參考馮澤岸等[1]的方法：標(biāo)準(zhǔn)品母液按0.5g·L-1濃度制備;系列標(biāo)準(zhǔn)液濃度按0.01、0.02、0，04、0.06、0.08、0.1g·L-1濃度制備;供試品溶液按0.2g·L-1濃度制備;苯酚溶液按250g·L-1濃度制備（現(xiàn)用現(xiàn)配，避光）。

2.4 硫酸-苯酚法測(cè)定

2.4.1 吸收波長(zhǎng)及顯色條件? 參考馮澤岸等[1]的方法，測(cè)定波長(zhǎng)選擇490nm;顯色條件設(shè)定為苯酚用量1mL，硫酸用量5mL，沸水浴，反應(yīng)10min。

2.4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備? 精密量取各標(biāo)準(zhǔn)溶液各1.0mL，以純水為對(duì)照，于490nm測(cè)定，以對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為：y=7.0241x+0.1271，（r=0.9996，n=6）（表1，圖1），線性關(guān)系良好。

2.4.3 精密度及穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密量取0.06mg·mL-1供試品溶液1.0mL，于490nm測(cè)定吸光度，由表2可知平均吸光度為0.435 AU，RSD值為1.86%，顯示其精密度良好。將顯色后的溶液溶于0，10，40，80，150min測(cè)定吸光度，由表3可知平均吸光度為0.552 AU，RSD值為0.8773%，結(jié)果顯示其在150min內(nèi)穩(wěn)定。

2.4.4 重復(fù)性試驗(yàn) 精密量取適量南沙參多糖平行制備成6份溶液，測(cè)定吸光度計(jì)算多糖含量及RSD值。由表4可知，所測(cè)得多糖平均含量為13.95%，RSD值為1.2%，由此可見其重復(fù)性較好。

2.4.5 加樣回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取南沙參多糖約20mg，共6份，制備溶液，精密吸取各溶液1.5mL，標(biāo)準(zhǔn)溶液（濃度：0.2mg·mL-1）1.5mL，于10mL容量瓶中定容，搖勻，測(cè)定吸光度，用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品含量，在計(jì)算回收率、RSD值。從表5可知平均加樣回收率為99.1%，RSD值為0.95%。

2.4.6 多糖含量測(cè)定? 精密稱取不同產(chǎn)地樣品粗多糖共10份，各20.0mg，配置成濃度為0.06mg·mL-1的樣品溶液，每份樣品溶液精密量取3份各1.0mL，即每組3份，測(cè)定吸光度，計(jì)算樣品中葡萄糖濃度，以葡萄糖計(jì)樣品中多糖含量=C×D×V/m×100%（C：樣品溶液葡萄糖濃度;D：稀釋倍數(shù)，V：樣品溶液體積，m：樣品質(zhì)量）。

由表6可知，在所檢測(cè)的不同10個(gè)產(chǎn)地之中，以六枝，水城，施秉地區(qū)南沙參多糖含量最低，約為6%～7%。? 以納雍南沙參多糖含量最高，為21.978%。高坡、黔西、普定南沙參多糖含量較為接近，為11%～13.799%。? 織金、花溪、安順南沙參多糖相近為17.839%～19.901%。

3 結(jié)論

通過研究發(fā)現(xiàn)，六枝、水城、施秉地區(qū)所產(chǎn)南沙參藥材多糖含量低，表明在該地區(qū)的南沙參藥材原植物多糖轉(zhuǎn)化率較差;相比之下，納雍、安順?biāo)a(chǎn)南沙參多糖含量較高，表明其原植物多糖轉(zhuǎn)化率較高;而高坡、黔西、普定、花溪、織金所產(chǎn)南沙參多糖含量居中。因此，以多糖含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)考察南沙參種植區(qū)的選擇，此次實(shí)驗(yàn)認(rèn)為納雍和安順為南沙參種植的較適宜地區(qū)。

參考文獻(xiàn)

[1]馮澤岸， 鞏慧敏， 邵婷璣， 等. 南沙參中多糖含量測(cè)定方法的建立與比較. 中國藥師， 2012， 15（3）： 290-293.

[2]唐富天， 梁莉， 李新芳. 南沙參多糖對(duì)大鼠的輻射防護(hù)作用[J]. 中藥藥理與臨床， 2002， 18（2）： 15-17.

[3]孫亞捷， 李新芳. 南沙參多糖對(duì)小鼠的抗衰老及清除氧自由基作用研究[J]. 中國藥師， 2005， 8（9）： 713-716.

[4]梁莉， 王婷， 喬華， 等. 南沙參多糖對(duì)四氯化碳損傷原代培養(yǎng)大鼠肝細(xì)胞的保護(hù)作用[J]. 中國藥房， 2007， 18（24）： 853-1855.

[5]梁莉， 王婷， 喬華， 等. 南沙參中多糖的含量測(cè)定. 中國藥房， 2011， 22（11）： 1001-1003.

（收稿日期：2019-04-07 編輯：程鵬飛）