核酸檢測的注意事項

蔡華英

【中圖分類號】 R197 【文獻標識碼】A 【文章編號】1004-7484（2019）02-0059-01

自2015年以來，核酸檢測已在全國各范圍血站內(nèi)大量開展，以提高經(jīng)血傳播傳染病的檢出率，保證臨床安全用血。但核酸檢測技術(shù)影響因素多，也有可能導(dǎo)致漏檢情況，輸血中的安全性不能被保障，我站自2016年開始運用核酸檢測技術(shù)進行血液篩查，經(jīng)過幾年的實踐，積累了一些經(jīng)驗，本文就核酸檢測應(yīng)注意的問題分享以下幾點：

1 樣本問題

樣本因素是影響核酸檢測的重要因素，它對使用的真空管、抗凝劑、保存運輸條件、離心條件、檢測時限等都有明確規(guī)定。用于血液采集的真空管一定是無抑制物、密封性好的試管，里面的抗凝劑通常選用EDTA，避免使用肝素，使用前應(yīng)進行質(zhì)檢，合格后方可投入使用；采集血液的時候還應(yīng)注意防止污染，需對采集部位進行清潔消毒，采集適合的血液量，充分混勻血液；采集的血液應(yīng)在4h內(nèi)離心，盡快地送到實驗室，當(dāng)核酸樣本從采血點運送到實驗室的過程中，必須借助冷藏運輸箱來進行運輸，嚴格控制運輸溫度，特別是夏季的時候，高溫天氣可能會導(dǎo)致試管里的分離膠變性、靶核酸失活等影響核酸檢測結(jié)果；送到實驗室的標本應(yīng)盡快進行檢測，要考慮到拆分或鑒別實驗的時限，不能檢測的標本應(yīng)在-20℃以下凍存。

2 試劑問題

實驗室使用的試劑質(zhì)量對測定結(jié)果的影響是直接而又極為關(guān)鍵的，不僅每一批試劑盒都要進行質(zhì)檢，就算是同一批、不同的進貨批次也要進行質(zhì)檢，因為不同的運輸條件對試劑盒質(zhì)量也要產(chǎn)生影響，質(zhì)檢的時候還應(yīng)注意不能只做一批次檢測就認為合格，應(yīng)多做幾批次比較，因為核酸檢測的影響因素多，一次檢測往往不能發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)誤差問題，多做幾次對判斷試劑的質(zhì)量及其穩(wěn)定性具有重要的參考價值；試劑盒要在適當(dāng)?shù)臏囟认聝Υ?，嚴格按照試劑說明書使用，不同批號的試劑嚴禁混用，。

3 設(shè)備問題

核酸實驗室所使用的設(shè)備最主要的就是核酸提取設(shè)備和擴增設(shè)備：核酸提取設(shè)備的提取效果是能否檢測到靶核酸的先決條件，核酸擴增設(shè)備對核酸檢測結(jié)果有直接的影響，因此，應(yīng)高度重視對設(shè)備的使用、維護。操作人員需要定期維護、廠家定期校準，使其能處于一個良好的狀態(tài)，不使用時對儀器進行外罩，在開展試驗的過程中，實驗室的溫濕度需被合理的調(diào)整，當(dāng)夏季來臨時，空調(diào)應(yīng)該提前打開，室內(nèi)的溫度與濕度被合理的調(diào)節(jié)，溫度不能超過25攝氏度，濕度不應(yīng)該大于70%，否則儀器運行中可能會出現(xiàn)問題。實驗使用的加樣器、離心機等設(shè)備也應(yīng)定期維護和校準，保證有足夠的準確度和精密度。維護中應(yīng)遵循系統(tǒng)的原則，每經(jīng)過一段時期，對軟件進行系統(tǒng)性的檢查，運用無紡布來擦拭設(shè)備，防止一些纖維絲落入到器械內(nèi)部中。

4 防污染問題

實驗室環(huán)境中的污染物主要來源于標本中存在的大量待測微生物或以前擴增產(chǎn)物的殘留污染，容易造成假陽性的污染。在工作中應(yīng)嚴格分區(qū)及嚴格遵守工作程序，勤換手套、工作服，防止交叉污染，及時清理垃圾，做好實驗室的清潔消毒。樣本提取完后擴增前，注意要蓋緊擴增反應(yīng)管，防止擴增的時候溫度過高，反應(yīng)管中液體泄漏，擴增產(chǎn)物分子污染實驗室，同時，要注意實驗室通風(fēng)，非工作人員嚴禁無序和隨意進入實驗室。

5 人員問題

工作人員在整個實驗過程中起著至關(guān)重要的作用，再好的設(shè)備、試劑、環(huán)境只有工作人員正確地操作、維護，才能得到保證檢測結(jié)果的準確性，因此，應(yīng)注意對工作人員的培訓(xùn)，使每個工作人員嚴格遵循管理制度及按照標準規(guī)程做事。

綜上所述，影響核酸檢測的影響因素多，應(yīng)從多方面加強防范，注意樣本、設(shè)備、試劑、環(huán)境等因素對結(jié)果的影響，避免差錯發(fā)生。