葉下珠總灰分、酸不溶性灰分和浸出物的含量測定

莫我躍 張前飛 趙應(yīng)梅 劉 娟 楊再清 許 斌

貴陽市食品藥品檢驗(yàn)檢測中心，貴州 貴陽 550081

葉下珠為大戟科植物葉下珠PhyllanthusurinariaL.的干燥全草。多生于山坡、路旁、田間，花沿莖葉下而生，結(jié)果時(shí)狀如小珠，故有葉下珠之稱。分布于廣東、廣西、云南、湖南、貴州、福建、浙江、江西等地，具有清熱解毒、利水消腫、明目、消積的功效，用于痢疾、泄瀉、黃疸、水腫、熱淋、石淋、目赤、夜盲、疳積、癰腫、毒蛇咬傷等治療[1]。藥材中常含有一定量的灰分，包括植物本身的生理灰分和外來泥沙等，影響灰分含量因素較多。生長環(huán)境、土質(zhì)、水肥條件、種植習(xí)慣等的不同也會影響生理灰分變化，藥材中灰分的最高限量可以保證中藥的純度[2-3]。浸出物測定可充分反應(yīng)藥材的內(nèi)在質(zhì)量，是確保其療效確切、質(zhì)量可靠的有效手段。中藥材的浸出物含量測定作為控制其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)得到廣泛應(yīng)用[4-6]。賈芳等曾對四川和廣西兩地產(chǎn)葉下珠進(jìn)行灰分、浸出物、沒食子酸研究發(fā)現(xiàn)，廣西產(chǎn)的和四川產(chǎn)的葉下珠在質(zhì)量方面存在一定的差異[7]。有必要對更多不同產(chǎn)地葉下珠的質(zhì)量進(jìn)行分析比較，研究以《中國藥典》[8]2015年版灰分測定和浸出物測定法，測定四川、廣西、貴州、云南、福建、廣東等地不同產(chǎn)地葉下珠總灰分和酸不溶性灰分和浸出物含量，為進(jìn)一步制定葉下珠的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 材料 10批葉下珠來源見表1，其中4批來源于貴州，其余6批來源于四川、廣西、廣東、云南、福建等地，由貴州中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院魏升華教授鑒定為大戟科葉下珠屬植物葉下珠PhyllanthusurinariaL.的帶根干燥全草。

表1 葉下珠來源表

1.2 儀器 DFD-700恒溫水浴鍋(北京國華醫(yī)療器械廠)；DFT-200藥材粉碎機(jī)(長沙市岳麓區(qū)中南制劑機(jī)械廠)；SX-5-12箱式電阻爐(天津泰斯特儀器有限公司)；Srtorius BSA224S電子天平(德國Srtorius公司)；202-3AB型電熱恒溫干燥箱(天津泰斯特儀器有限公司)；干燥器、坩堝(50 mL)。

2 方法和結(jié)果

2.1 總灰分和酸不溶性灰分測定 按照《中國藥典》2015年版2302總灰分測定 取10批葉下珠供試品用粉碎機(jī)粉碎，使能通過二號篩，混合均勻，取供試品3 g，置熾灼至恒重的坩堝中，稱定重量(準(zhǔn)確至0.01 g)緩慢熾熱，避免燃燒，至完全炭化時(shí)，逐漸升溫至550 ℃，使完全灰化至恒重。根據(jù)殘?jiān)亓?，?jì)算供試品中總灰分的含量(%)。取總灰分項(xiàng)下所得的灰分，在坩堝中小心加人稀鹽酸約10 mL，用表面皿覆蓋坩堝，置水浴上加熱10 min，表面皿用熱水5 mL沖洗，洗液并人坩堝中，用無灰濾紙濾過，坩堝內(nèi)的殘?jiān)盟从跒V紙上，并洗滌至洗液不顯氯化物反應(yīng)為止。濾渣連同濾紙移置同一坩堝中，干燥，熾灼至恒重。根據(jù)殘?jiān)亓?，?jì)算供試品中酸不溶性灰分的含量(%)。所得總灰分和酸不溶性灰分結(jié)果見表2。

樣品總灰分/%酸不溶性灰分/%Y17.64±0.131.64±0.06Y27.95±0.030.97±0.04Y36.71±0.060.95±0.08Y46.76±0.031.04±0.15Y57.45±0.071.08±0.08Y68.02±0.141.52±0.03Y77.18±0.020.94±0.01Y87.19±0.141.47±0.08Y97.57±0.070.74±0.05Y105.69±0.070.83±0.01

總灰分：

2.2 不同處理方法水溶性浸出物含量測定 按照《中國藥典》2015年版2201浸出物測定法項(xiàng)下的冷浸法和熱浸法測定，取1批(廣西欽州)葉下珠供試品粉末過二號篩，取供試品約4 g置250 mL的錐形瓶中，精密加水100 mL。由表3可知，葉下珠采用熱浸法所得水溶性浸出物含量較高為23.56%。

表3 不同處理方法水溶性浸出物含量測定結(jié)果

2.3 不同濃度乙醇量對浸出物含量測定 取葉下珠(廣西欽州)按照《中國藥典》2015年版2201浸出物測定法項(xiàng)下以30%、50%、70%、90%乙醇量方法對醇溶性浸出物項(xiàng)下的冷浸法和熱浸法對影響探究。由表4可知，水溶性浸出物和醇溶性浸出物含量最高的是采用乙醇量為30%的熱浸法的浸出物最高為24.12%，乙醇量為90%的冷浸法的浸出物最低9.58%。根據(jù)經(jīng)濟(jì)，實(shí)惠，方便，因此本文樣品的浸出物的測定采用醇溶性浸出物進(jìn)行測定。

表4 不同濃度乙醇量對浸出物含量測定結(jié)果

2.4 樣品醇浸出物測定 按照《中國藥典》2015年版2201浸出物測定法項(xiàng)下采用乙醇量為30%的熱浸法取供試品約4 g，精密稱定，置250 mL的錐形瓶中，精密加乙醇量為30% 100 mL，密塞，稱定重量，靜置1 h后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1 h。放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，用水補(bǔ)足減失的重量,搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液25mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105°C干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，迅速精密稱定重量，以干燥品計(jì)算供試品中醇溶性浸出物的含量(%)。結(jié)果見表5。

表5 10批葉下珠藥材醇浸出物含量測定結(jié)果

3 討論

研究對10批葉下珠總灰分、酸不溶性灰分、浸出物含量測定發(fā)現(xiàn)，不同來源樣品具有一定的差異，總灰分最高值是為8.16%(廣西欽州)，最低值是5.62%(福建泉州)，酸不溶性灰分最高值是1.70%(貴州威寧)，最低值是0.69%(四川瀘州)，醇溶性浸出物最高值是29.55%(貴州凱里麻江)，最低值是16.35%(云南昭通)，發(fā)現(xiàn)含量最高值和最低值均相差近1倍，導(dǎo)致差異可能的原因是產(chǎn)地海拔高度、土壤類型、水肥條件、采集時(shí)間等因素有關(guān)[2-3]，有待進(jìn)一步研究。

按照2015年版《中國藥典》的方法對10批葉下珠進(jìn)行測定，通過測定總灰分、酸不溶性灰分、浸出物含量，得到較為準(zhǔn)確的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，為建立藥材標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)依據(jù)，根據(jù)所測結(jié)果建議葉下珠藥材總灰分不得過8.24%，酸不溶性灰分不得過1.52%，并建議將醇溶性浸出物按熱提法處理所得結(jié)果納入標(biāo)準(zhǔn)，并規(guī)定不低于15.05%。