超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用測定咸魚中16種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留

陳庚超 顏素娟

[摘要】本文建立了咸魚中16種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的超高效液相色譜串聯(lián)三重四級桿質(zhì)譜分析方法，線性范圍在O.5～50ng/mL，線性相關(guān)系數(shù)均分布在0.991～0.999。本文前處理方法采用的是QuEC.hERS方法，該方法回收率在75.45～100.37%，結(jié)果表明，在處理咸魚含有較多脂肪、蛋白質(zhì)等復(fù)雜基質(zhì)時，QuEChERS方法具有操作簡便快速、準(zhǔn)確率高、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，超高效液相色譜串聯(lián)三重四級桿質(zhì)譜的儀器方法與氣相色譜法相比，具有靈敏度和準(zhǔn)確度高的優(yōu)點(diǎn)。[關(guān)鍵詞]咸魚;有機(jī)磷農(nóng)藥殘留;QuEChERS;超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用

近年來，食品質(zhì)量安全在我國引起了高度重視。咸魚作為一種腌制食品，在加工過程中不法商販為了防治蚊蠅、蛆蟲等滋生會向咸魚噴灑、浸泡有機(jī)磷農(nóng)藥，嚴(yán)重威脅廣大人民的健康[1—2]。因此，建立準(zhǔn)確、快速測定腌制類食品中有機(jī)磷殘留的檢測方法具有重要意義。國家標(biāo)準(zhǔn)關(guān)于肉制品中有機(jī)磷農(nóng)藥的前處理方法復(fù)雜，且除脂和凈化效果不理想l 3】。近年來國際上最新發(fā)展起來的OuEChERS（Quick、Easv，Cheap、Effective、Rugged、Safe）方法是一種可應(yīng)用食品中農(nóng)藥殘留檢測的快速樣品前處理技術(shù)，此方法快捷簡便，能將咸魚樣品中大量油脂去除，減少分析過程中的基質(zhì)干擾[4]。超高效液相色譜串聯(lián)三重四級桿質(zhì)譜的儀器方法與氣相色譜法相比，具有靈敏度和準(zhǔn)確度高的優(yōu)點(diǎn)。因此本文采用的QuEChERS前處理方法結(jié)合超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法快速檢測咸魚中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留，具有重要的指導(dǎo)意義。

1 材料與方法

1.1 儀器

1290Ⅱ-6460型超高效液相色譜儀串聯(lián)三重四級桿質(zhì)譜儀：Agilent科技公司;ALY120型電子分析天平：日本島津公司;Elmasonic P型超聲波清洗器：德國Elma公司;Sigma 3k30型高速冷凍離心機(jī)：博勵行儀器有限公司;Seven Easy pH汁：梅特勒一托利多儀器公司;ATR AutoVap S60型樣品全自動氮吹儀：力德生物科技上海有限公司;Milli-Q型純水儀：密理博公司。

1.2 試劑

甲酸、乙腈均為色譜純：德國Merck公司;乙腈、丙酮、二氯甲烷、硫酸鈉等均為分析純：廣州分析化學(xué)試劑廠;實(shí)驗(yàn)用水除特殊說明均為一級水;甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂果、久效磷、敵百蟲、樂果、敵敵畏、殺撲磷、亞胺硫磷、甲基對硫磷、馬拉硫磷、三唑磷、喹硫磷、倍硫磷、治螟磷、毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)品的濃度均為lOOmg/L：農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護(hù)監(jiān)測所。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

準(zhǔn)確移取上述16種標(biāo)準(zhǔn)品適量，用乙腈作溶劑，配置成l.OOmg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)一步配置成濃度依次為0.50μg/mL、1.00 μg/mL、-5.00μg/mL、10.00μg/mL、20.00μg/mL、50.00μg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液。

1.4 樣品前處理

準(zhǔn)確稱取制備好的咸魚樣品5.OOg，加入lOmL冰凍好的乙腈，混合搖勻或均質(zhì)器勻漿，加入OuEChERS凈化包的陶瓷均質(zhì)子，加入Agilenl BondElut QuEChERS提取包（也可采用其他廠商的類似產(chǎn)品）。劇烈震蕩3min后，在1000r/min、4℃條件下冷凍離心3～5min，之后移取上清液過0.22μm有機(jī)相濾膜，待上機(jī)測試[5—6]。

1.5 儀器條件

色譜條件：色譜柱AgilenlCl8（ 2.1×lOOmm），進(jìn)樣量lOμL，柱溫45℃，流動相為0.2%甲酸水+乙腈，梯度洗脫程序見表1，流速為0. 3mL/min。

質(zhì)譜參數(shù)：電噴霧離子源（ ESI），多反應(yīng)檢測MRM模式，離子對參數(shù)見表2[7]。

2結(jié)果與分析

2.1 線性范圍及檢出限

樣晶經(jīng)上機(jī)測試，在充分優(yōu)化條件后得到濃度為10μg/mL的16種有機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)溶液的理想色譜圖，具體見圖1。

按1.3配制濃度為0.50ng/mL、l.OOng/mL、5.OOng/mL、lO.OOng/mL、20.OOng/mL、50.OOng/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，按本方法分析，以16種有機(jī)磷農(nóng)藥濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)做線性回歸方程[8]。本文所述方法在線性范圍0.50～50.OOng/mL，16種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的線性相關(guān)系數(shù)都很理想，均為0.991～0.999。在通過對各日標(biāo)化合物的特征離子色譜峰信噪比（S/N）>10，可計算得到該方法各個目標(biāo)化合物的定量檢出限（ LOQ），具體見表3[9]

。2.2 精密度及回收率

稱取不含待測組分的咸魚樣品50.Og共20份，其巾2份按照實(shí)驗(yàn)方法正常操作，另外18份分成3組，分別添加含有16種有機(jī)磷農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，制成1.00μg/kg、5.00μg/kg和20.00μg/kg的不同濃度的樣品進(jìn)行三水平六平行的添加回收試驗(yàn)。結(jié)果表明，16種有機(jī)磷農(nóng)藥的平均回收率為75.5%～100.5%，精密度為0.3%～2.O%（n=6），具體見表4[10-12]。

3 結(jié)論

本文采用QuEChERS前處理技術(shù)結(jié)合超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用的方法對咸魚中16種有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行檢測，結(jié)果表明，該方法不僅具有前處理簡單、操作方便、凈化除脂效果好等優(yōu)點(diǎn)外，還具有分離效果好、分析快速、檢出限低、靈敏度和精密度高等特點(diǎn)，適用于對咸魚中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的檢測。

參考文獻(xiàn)

[1]龔麗，李浩權(quán)，劉清化，等.半干咸魚的加工工藝[J].食品與 發(fā)酵工業(yè).2004 （9）：130-132.

[2]唐黎標(biāo).蔬菜農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)現(xiàn)狀分析[J】山東農(nóng)藥信息，2019（1）：17-18.

[3]劉麗麗，劉巍.食品中農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)的研究[J].科學(xué)技術(shù) 創(chuàng)新，2019 （2）：33-34.

[4]曹俊杰，于霞，胡畔.探討QuEChERS方法在食品農(nóng)獸藥殘留檢 測中的應(yīng)用[J]現(xiàn)代食品，2018 （23）：83-85+89.

[5]易江華，段振娟，方國臻，等.QuEChERS方法在食品農(nóng)獸藥殘 留檢測中的應(yīng)用[J]中國食品學(xué)報，2013 （2）：153-158.

[6]劉婷.QuEChERS結(jié)合GC-MS/MS和LC-MS/MS高通量檢測果蔬農(nóng) 藥多殘留研究[D]，長沙：中南林業(yè)科技大學(xué)，2018.

[7]王耀，劉少彬，謝翠美，等.加速溶劑萃取凝膠滲透色譜/固 相萃取凈化氣相色譜質(zhì)譜法測定咸魚中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留[J]分 析化學(xué).2011 （1）：67-71.

[8]彭喜春，賴毅東.咸魚制品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的毛細(xì)管GC-NPD 法測定[J]食品科學(xué)，2006 （9）：226-228.

[9]吳南村，劉舂華，樂淵，等.QuEChERS-超高壓液相色譜一串聯(lián) 質(zhì)譜法檢測黑胡椒中6種農(nóng)藥殘留[J】分析試驗(yàn)室，2018（12）： 1431-1435.

[10]劉美辰，路宏博，趙小旭，等.膠體金免疫層析法快速定量檢測糙米中重金屬離子鉛[J]糧食科技與經(jīng)濟(jì)，2018 （2）：61-64.

[11]林濤，邵金良，劉興勇，等.QuEChERS-超高效液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法測定蔬菜中41種農(nóng)藥殘留[J].色譜，2015 （3）：235-241

[12]劉國棟，微波消解一原子吸收一原子熒光法快速測定糧食中鉛、鎘、汞、砷[J]糧食科技與經(jīng)濟(jì)，2017 （6）：46-48.