幾個(gè)姬菇菌株的菌絲培養(yǎng)性狀及出菇品比研究

張 清，張雅寧，羅金州

(1.四川菌之味農(nóng)業(yè)開(kāi)發(fā)有限公司，成都 大邑 611344；2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，成都 溫江 611130)

姬菇，名稱來(lái)自日本，泛指菌蓋小，菌柄細(xì)長(zhǎng)而較硬實(shí)的側(cè)耳屬食用菌。姬菇肉質(zhì)肥嫩，營(yíng)養(yǎng)豐富，富含蛋白質(zhì)、糖分、脂肪、維生素以及鐵、鈣等多種有效成分，深受市場(chǎng)喜愛(ài)，在四川是主要的大宗食用菌之一。國(guó)內(nèi)栽培的姬菇名稱比較混亂，或稱糙皮側(cè)耳(Pleurotusostreatus)或稱黃白側(cè)耳(Pleurotuscornucopiae)。黃年來(lái)[1，3]在《中國(guó)食用菌百科》中記載為黃白側(cè)耳又名小平菇、美味側(cè)耳。卯曉嵐[2]在《中國(guó)經(jīng)濟(jì)真菌》中稱白黃側(cè)耳為美味側(cè)耳、紫孢側(cè)耳。王波[4]《幾種食用菌品種名稱訂正》文章中認(rèn)為姬菇屬于糙皮側(cè)耳(Pleurotusostreatus)。目前，國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)[5-7]中大多都以黃白側(cè)耳(Pleurotuscornucopiae)來(lái)命名。

姬菇抗逆性強(qiáng)，栽培方法簡(jiǎn)單，可廣泛采用各種農(nóng)副產(chǎn)品作為栽培原料，便于管理，既適合農(nóng)戶家庭種植，又容易進(jìn)行規(guī)?；a(chǎn)。四川金堂縣是全省最大的姬菇產(chǎn)區(qū)，曾經(jīng)的主栽品種為西德33和閩31，年栽培4億袋左右，“金堂姬菇”已經(jīng)成為四川菇類名品。近年來(lái)，四川姬菇栽培出現(xiàn)姬菇品種退化，亟需選育新的品種。本研究考察了收集到的十多個(gè)姬菇菌株的培養(yǎng)性狀及出菇特性，以期為姬菇新菌株選育提供育種材料。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌種 本試驗(yàn)所用姬菇菌株共16個(gè)，供試姬菇菌株名稱及來(lái)源見(jiàn)表1。

1.1.2 供試培養(yǎng)基 平板及斜面母種培養(yǎng)基：PDA培養(yǎng)基；原種及栽培種培養(yǎng)基為：玉米粒99%，石膏粉1%。栽培料配方：玉米芯70%，木屑25%，麥麩4%，石膏1%，含水量60%～65%，pH自然。

表1 供試姬菇菌株名稱及來(lái)源

1.2 方法

1.2.1 平板培養(yǎng)性狀菌落觀察和測(cè)定 取保存菌種轉(zhuǎn)接于PDA斜面，25℃培養(yǎng)。待菌絲長(zhǎng)滿斜面，取0.5cm帶菌絲瓊脂塊接種于無(wú)冷凝水的PDA平板。每個(gè)菌株接種3個(gè)平板作為3次重復(fù)，25℃培養(yǎng)。菌絲生長(zhǎng)后，第3天開(kāi)始每日定時(shí)測(cè)量菌落半徑，直至菌絲長(zhǎng)滿整個(gè)平板，并觀察菌落及菌絲生長(zhǎng)情況。計(jì)算不同菌株的菌絲生長(zhǎng)速度。

菌絲生長(zhǎng)速度(cm/d)=菌落半徑(cm)/菌絲生長(zhǎng)天數(shù)(d)。

1.2.2 玉米粒培養(yǎng)基菌絲生長(zhǎng)速度測(cè)定 玉米粒去雜，煮沸至米粒無(wú)破皮、熟透而無(wú)硬心，瀝干水分，攤干到手抓無(wú)水印，稍粘手，加入干料重1%的石膏粉，混勻裝750mL菌種瓶，121～126℃高壓滅菌2h，冷卻，接入斜面菌種，25℃培養(yǎng)，每菌株接3瓶作3次重復(fù)。待不同姬菇菌株菌絲長(zhǎng)至瓶肩時(shí)開(kāi)始畫(huà)線，每天定時(shí)觀察菌絲生長(zhǎng)勢(shì)，測(cè)菌絲長(zhǎng)度等。

菌絲生長(zhǎng)速度(cm/d)=菌絲長(zhǎng)度(cm)/培養(yǎng)天數(shù)(d)

1.2.3 栽培料菌絲生長(zhǎng)速度測(cè)定 按栽培配方，玉米芯，加入陳化木屑和水(含水量70%)，建堆短期發(fā)酵3天，中途視堆溫翻堆2～3次，加入麥麩、石膏粉，攪拌均勻，裝入直徑18cm聚丙烯袋，每袋裝干料300g左右，高壓滅菌2h，接入原種，每個(gè)姬菇菌株改為10袋。接種后，室內(nèi)自然溫度避光發(fā)菌，發(fā)菌溫度20～25℃，相對(duì)濕度70%～75%，適量通風(fēng)，保持室內(nèi)空氣新鮮。待不同姬菇菌株的菌絲在栽培料上長(zhǎng)至袋肩時(shí)，開(kāi)始畫(huà)線，觀察菌絲生長(zhǎng)勢(shì)，測(cè)菌絲長(zhǎng)度等。當(dāng)菌包袋口出現(xiàn)針尖狀原基時(shí)，去掉封口報(bào)紙，進(jìn)入出菇管理。原基長(zhǎng)大達(dá)到采摘標(biāo)準(zhǔn)，整叢采下，減柄，測(cè)定和記載子實(shí)體性狀如菌蓋顏色、菌蓋直徑、菌蓋厚度、菌柄長(zhǎng)度、菌柄直徑、叢生與否、整齊度。

菌絲生長(zhǎng)速度(cm/d)=菌絲長(zhǎng)度(cm)/培養(yǎng)天數(shù)(d)

1.2.4 產(chǎn)量測(cè)定 產(chǎn)量包括袋產(chǎn)鮮菇總產(chǎn)量和商品菇產(chǎn)量，總產(chǎn)量指采菇后直接稱取鮮菇的重量；商品菇產(chǎn)量則指采菇稱記總產(chǎn)量后，在距離菌蓋4cm處剪去菌柄基部，去掉小菇，最后稱取的鮮菇重量。試驗(yàn)只收取截止前3潮菇產(chǎn)量，并計(jì)算不同菌株的SS級(jí)、S級(jí)和M級(jí)的比例。

1.2.5 數(shù)據(jù)分析方法 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS24.0軟件包分別進(jìn)行不同姬菇菌株在PDA平板、玉米粒原種和玉米芯栽培料中的菌絲生長(zhǎng)速度以及各個(gè)菌株栽培產(chǎn)量平均數(shù)的差異性顯著檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同姬菇菌株平板培養(yǎng)

不同姬菇菌株平板培養(yǎng)特征見(jiàn)表2。就菌落生長(zhǎng)觀察，高溫新育姬菇平板培養(yǎng)菌落厚度較厚，高溫姬菇、姬菇Rj25、姬菇11號(hào)、姬菇5號(hào)、姬菇008、廣溫姬菇1702、姬菇10號(hào)、白姬菇、姬菇Rj17、姬菇Rj19、廣溫姬菇的菌落厚度次之，黑杏菇、姬菇1號(hào)、日本小平菇、姬菇3號(hào)的菌絲厚度薄。姬菇3號(hào)和廣溫姬菇1701的菌絲長(zhǎng)勢(shì)弱，其余菌株平板培養(yǎng)菌絲長(zhǎng)勢(shì)差異不大。就菌絲生長(zhǎng)前端整齊度看，高溫新育姬菇、日本小平菇、姬菇11號(hào)、姬菇5號(hào)、姬菇Rj17、姬菇3號(hào)6個(gè)菌株的菌絲整齊度明顯高于高溫姬菇、黑杏菇、姬菇Rj25等10個(gè)姬菇菌株。菌絲生長(zhǎng)速度測(cè)定，高溫姬菇菌絲生長(zhǎng)速度相對(duì)較快，廣溫姬菇1701和姬菇3號(hào)的菌絲生長(zhǎng)速度相對(duì)較慢。姬菇10號(hào)、廣溫姬菇1701和姬菇3號(hào)的菌絲長(zhǎng)滿平板的時(shí)間較長(zhǎng)，其余姬菇菌株平板培養(yǎng)從接種至菌絲長(zhǎng)滿平板的時(shí)間差異不大。

表2 不同姬菇菌株平板培養(yǎng)特征

注：“+”表示菌絲生長(zhǎng)勢(shì)一般，“++”表示生長(zhǎng)勢(shì)較強(qiáng)，“+++”表示生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)。

2.2 不同姬菇菌株在谷粒培養(yǎng)基上的菌絲生長(zhǎng)情況的分析

試驗(yàn)結(jié)果表明，不同姬菇菌株在谷粒培養(yǎng)基上的菌絲生長(zhǎng)情況見(jiàn)表3。日本小平菇在谷粒培養(yǎng)基上的菌絲長(zhǎng)勢(shì)相對(duì)較好，黑杏菇、姬菇Rj17、廣溫姬菇1701、高溫姬菇、姬菇Rj19、姬菇008的菌絲長(zhǎng)勢(shì)相對(duì)較差。姬菇3號(hào)、姬菇5號(hào)、姬菇11號(hào)、高溫新育姬菇、姬菇Rj17、姬菇Rj19、日本小平菇的菌絲整齊度明顯高于姬菇10號(hào)、黑杏菇、白姬菇、姬菇1號(hào)、廣溫姬菇1701、高溫姬菇、姬菇Rj25、廣溫姬菇1702、姬菇008。姬菇008生長(zhǎng)速度相對(duì)較慢，姬菇5號(hào)和姬菇3號(hào)在谷粒培養(yǎng)基上的菌絲生長(zhǎng)速度相對(duì)較快。不同姬菇菌株在谷粒培養(yǎng)基上從接種至菌絲長(zhǎng)滿瓶的時(shí)間差異不大，廣溫姬菇1701和姬菇Rj19的長(zhǎng)滿瓶的時(shí)間相對(duì)較慢。

表3 不同姬菇菌株在玉米粒培養(yǎng)基上的菌絲生長(zhǎng)情況

2.3 不同姬菇菌株在栽培料上的菌絲生長(zhǎng)情況的分析

試驗(yàn)結(jié)果表明，日本小平菇、黑杏菇、姬菇5號(hào)、廣溫姬菇1702在栽培料上的菌絲長(zhǎng)勢(shì)相對(duì)較弱，廣溫姬菇1701、姬菇Rj25、姬菇008、姬菇1號(hào)、姬菇Rj19、高溫新育姬菇、姬菇11號(hào)、高溫姬菇、白姬菇的菌絲長(zhǎng)勢(shì)相對(duì)較強(qiáng)。廣溫姬菇1701、姬菇008、姬菇1號(hào)、姬菇10號(hào)、姬菇3號(hào)、高溫新育姬菇、姬菇11號(hào)、高溫姬菇、白姬菇在栽培料上的菌絲整齊度相對(duì)較好，姬菇5號(hào)和廣溫姬菇1702的整齊度相對(duì)較差。白姬菇的菌絲生長(zhǎng)速度相對(duì)較差，日本小平菇在栽培料上的菌絲生長(zhǎng)速度相對(duì)較好。不同姬菇菌株在栽培料上從接種至菌絲長(zhǎng)滿袋的時(shí)間差異不大，廣溫姬菇1701、姬菇008、姬菇Rj19、姬菇3號(hào)、姬菇11號(hào)、廣溫姬菇1702的菌絲長(zhǎng)滿袋的時(shí)間相對(duì)較慢。

表4 不同姬菇菌株在栽培料上的菌絲生長(zhǎng)情況

2.4 不同姬菇菌株子實(shí)體生長(zhǎng)情況及出菇轉(zhuǎn)潮期測(cè)定

試驗(yàn)結(jié)果表明，不同姬菇菌株子實(shí)體生長(zhǎng)情況見(jiàn)表5。日本小平菇的菌蓋顏色較深為深褐色，姬菇5號(hào)、廣溫姬菇1702、黑杏菇的菌蓋顏色次之為灰褐色，其余姬菇菌株菌蓋顏色較淺都為灰色。日本小平菇的菌蓋直徑相對(duì)最大，姬菇5號(hào)和黑杏菇的菌蓋直徑相對(duì)次之，其余姬菇菌株菌蓋直徑相對(duì)差異不大。各菌株間菌蓋厚度差異不大，無(wú)明顯差別。姬菇1號(hào)、姬菇10號(hào)、高溫新育姬菇、白姬菇、姬菇Rj17的菌柄長(zhǎng)度相對(duì)較長(zhǎng)，姬菇5號(hào)、廣溫姬菇1702、日本小平菇、黑杏菇的菌柄長(zhǎng)度相對(duì)短。姬菇5號(hào)的菌柄直徑相對(duì)較粗，日本小平菇和黑杏菇的菌柄直徑相對(duì)次之，其余姬菇菌株菌柄直徑無(wú)太大差異。不同姬菇菌株出菇轉(zhuǎn)潮期差異不大。

表5 不同姬菇菌株子實(shí)體生長(zhǎng)情況比較

2.5 不同姬菇菌株出菇產(chǎn)量的測(cè)定

姬菇分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，M級(jí)姬菇通常用于鮮菇銷售，S級(jí)、SS級(jí)姬菇用于鹽漬菇加工，大于M級(jí)的姬菇則當(dāng)常規(guī)平菇銷售，其他剩余的姬菇為等外級(jí)姬菇，無(wú)商品價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)中不同姬菇菌株的單袋產(chǎn)量和分級(jí)見(jiàn)表6。姬菇1號(hào)的單袋產(chǎn)量與其他菌株相比達(dá)到極顯著水平。

表6 不同姬菇菌株子實(shí)體鮮菇產(chǎn)量比較

按商品菇分級(jí)的來(lái)看，姬菇1號(hào)、高溫新育姬菇的商品菇SS級(jí)菇比例相對(duì)較高，其次是姬菇10號(hào)、姬菇008、高溫姬菇和Rj19以及白姬菇。其他菌株SS級(jí)菇比例較低。就S級(jí)比例來(lái)看，不同姬菇菌株都差異不大，黑杏菇、姬菇5號(hào)、廣溫姬菇1702的商品菇M級(jí)菇比例較高，其余姬菇菌株差異不大。就不同菌株的潛在價(jià)值看，姬菇1號(hào)的鮮菇產(chǎn)量以及SS級(jí)的比例都最好，可直接作為生產(chǎn)用菌株或者可作為育種材料，而新育高溫姬菇，單產(chǎn)和SS比例都較好，可以在較高溫度下出菇，可作為高溫季節(jié)生產(chǎn)鮮菇的新菌株，也可以作為育種材料。

2.6 出菇菇型觀察

就出菇的菇型看，不同姬菇菌株的子實(shí)體形態(tài)差異較大。姬菇1號(hào)、姬菇10號(hào)、姬菇3號(hào)的菌柄較長(zhǎng)且較均勻，菌蓋較圓，適合做鹽姬菇銷售，可為未來(lái)姬菇新菌株選育提供育種材料。而黑杏菇、姬菇5號(hào)、廣溫姬菇1702、日本小平菇分支較少，菌柄粗短，菌蓋較大而圓，菌肉較厚實(shí)，適合做鮮菇銷售。下面為部分菌株的出菇照片。

表7 不同姬菇菌株出菇形態(tài)

3 小結(jié)

16個(gè)姬菇菌株平板培養(yǎng)的菌落外觀差異不大，但不同菌株的菌絲生長(zhǎng)速度差異較大，高溫姬菇的生長(zhǎng)速度最快。用玉米粒做原種時(shí)，日本小平菇、姬菇3號(hào)、姬菇5號(hào)發(fā)菌長(zhǎng)勢(shì)較好，菌絲純白，發(fā)菌速度快，其余菌株發(fā)菌速度稍慢，但菌絲濃密，粗短健壯。栽培料中，廣溫姬菇1701、姬菇Rj25、姬菇008、姬菇1號(hào)、姬菇Rj19、高溫新育姬菇、姬菇11號(hào)、高溫姬菇、白姬菇等9個(gè)菌株的菌絲長(zhǎng)勢(shì)較好，菌絲濃白，發(fā)菌吃料速度快。

16個(gè)姬菇菌株的出菇性狀表現(xiàn)差異很大。鮮菇色澤，除日本小平菇和黑杏菇的菌蓋顏色深褐色和灰褐色外，其他菌株均為灰色。其中，日本小平菇、黑杏菇、姬菇5號(hào)的菌蓋直徑較大且厚實(shí)，但分支少，菌柄較粗短，SS級(jí)和S級(jí)的比例較小，適合做鮮菇栽培菌株生產(chǎn)鮮菇。其他菌株分支較多，菌蓋小，姬菇1號(hào)、姬菇10號(hào)以及高溫新育姬菇和姬菇Rj17的菌柄較長(zhǎng)，SS級(jí)和S級(jí)的比例也較高，可作為選育專用出口型品種的親本，特別是姬菇1號(hào)，不僅單產(chǎn)高，而且SS級(jí)和S級(jí)的比例也高，是一個(gè)很好的育種材料。其他菌株，姬菇5號(hào)、姬菇3號(hào)、姬菇008的鮮菇產(chǎn)量較高且M級(jí)的比例較大，宜作為鮮菇栽培菌株進(jìn)行推廣，也可作為育種材料進(jìn)一步考察。廣溫姬菇1702菌柄粗短，菌蓋顏色較深，分支少，菇質(zhì)差，小姑蕾容易枯死，不作為育種或生產(chǎn)用菌株。