種植體周圍炎中NF-κB的表達(dá)及其與RANKL的相關(guān)性初探

李洪波　黃鶴　李巧梅　石磊

【摘要】 目的：探究種植體周圍炎中NF-κB的表達(dá)及其與RANKL的相關(guān)性。方法：選取本院2017年1月-2018年6月間行種植修復(fù)后發(fā)生種植體周圍炎的患者45例（種植體61顆），納入觀察組;同時(shí)選擇同時(shí)期行種植治療且無種植體周圍炎發(fā)生的患者45例（種植體52顆），納入對(duì)照組。記錄并對(duì)比種植體周圍探診深度（PPD）、牙槽骨喪失深度（DSB）、改良齦溝探診出血指數(shù)（mSBI）和改良菌斑指數(shù)（mPLI），同時(shí)測(cè)定齦溝液中核轉(zhuǎn)錄因子（Nuclear factor-κB，NF-κB）和核因子受體活化因子配體（Receptor activator of NF-κB ligand ，RANKL），并分析兩者的相關(guān)性。結(jié)果：輕、中、重度種植體周圍炎及健康種植體的PPD、DSB、mSBI及mPLI比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=0.214，0.233，0.257，0.313;P=0.012，0.011，0.008，0.024），且各指標(biāo)組內(nèi)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;各組齦溝液中NF-κB、RANKL比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=0.872，1.017;P=0.001，0.000）。Pearson相關(guān)分析顯示種植體周圍炎齦溝液中NF-κB及RANKL存在正相關(guān)（r=0.631，P=0.000）。結(jié)論：種植體周圍炎齦溝液中NF-κB表達(dá)顯著增高，且與RANKL存在明顯相關(guān)，其隨炎癥嚴(yán)重程度的增加而升高。

【關(guān)鍵詞】 NF-κB; RANKL; 種植體周圍炎; 相關(guān)性

【Abstract】 Objective：To explore the expression of NF-κB and its correlation with RANKL in peri-implantitis.Method：From January 2017 to June 2018，45 patients（61 implants）with peri-implantitis after implant restoration were selected into the observation group，45 patients（52implants）with no peri-implantitis after implant restoration were selected into the control group.The periimplant detection depth（PPD），alveolar bone loss depth（DSB），modified sulcus bleeding index（mSBI）and modified plaque index（mPLI）were recorded and compared，the Nuclear Factor-KappaB（NF-κB）and the Receptor activator of NF-κB ligand（RANKL）in gingival crevicular fluid were measured and the correlation was analyzed.Result：There were significant differences in PPD，DSB，mSBI and mPLI in light，medium and severe periimplant inflammation and healthy implants（F=0.214，0.233，0.257，0.313;P=0.012，0.011，0.008，0.024），and there were significant differences within each indicator group（P<0.05）.There were significant differences in NF-κB and RANKL in gingival crevicular fluid of each group（F=0.872，1.017;P=0.001，0.000）.Correlation analysis showed that there was a positive correlation between NF-κB and RANKL in gingival crevicular fluid of peri-implantitis（r=0.631，P=0.000）.Conclusion：The expression of NF-κB in gingival crevicular fluid is significantly increased，has a significant correlation with RANKL，and it related to the severity of inflammatory.

【Key words】 NF-κB; RANKL; Peri-implantitis; Correlation

First-authors address：Shenzhen Dental Hospital to Southern Medical University（Guangdong Shenzhen Dental Medical Center），Shenzhen 518001，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.10.004

隨著種植牙體技術(shù)的不斷探索及發(fā)展[1]，使用種植牙體技術(shù)修復(fù)牙缺失的患者也越來越多，同時(shí)種植體周圍炎作為種植修復(fù)后常見的并發(fā)癥之一[2]，在臨床工作中也越來越常見，其嚴(yán)重影響了種植修復(fù)效果及治療后咬合功能，極大降低了患者治療滿意度及生活質(zhì)量[3]，為此尋求種植體周圍炎的發(fā)生機(jī)制及治療途徑已成為當(dāng)前研究熱點(diǎn)。文獻(xiàn)[4-5]指出NF-κB和RANKL在骨性相關(guān)疾病患者中的表達(dá)顯著增加，并與種植體周圍炎的發(fā)生存在一定相關(guān)性，可能成為治療種植體周圍炎的方向，但其兩者在種植體周圍炎中的表達(dá)及關(guān)系尚不明確，本研究主要探究種植體周圍炎中NF-κB與RANKL的表達(dá)及其相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 采用前瞻性對(duì)照研究，選取本院2017年1月-2018年6月間行種植修復(fù)后發(fā)生種植體周圍炎的患者45例（種植體61顆）納入觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合種植體周圍炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]，種植體周圍軟組織存在炎癥并累及骨組織，可表現(xiàn)為探查出血及骨組織吸收，PPD≥4 mm，放射骨損失量≥2 mm;（2）種植修復(fù)過程順利，術(shù)中未出現(xiàn)明顯并發(fā)癥;（3）治療依從性好。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）既往存在口腔疾病及治療史;（2）伴有全身代謝或免疫系統(tǒng)相關(guān)疾病;（3）未服用抗生素、免疫抑制劑或非甾體消炎藥;（4）女性患者在非妊娠期或月經(jīng)期。本研究已充分告知患者并經(jīng)過本院倫理委員會(huì)審批。同時(shí)根據(jù)種植體周圍炎嚴(yán)重程度進(jìn)行分組[7]，觀察組1共21例，輕度種植體周圍炎，4 mm≤PPD<6 mm，DSB<種植體長(zhǎng)度25%;觀察組2共14例，中度種植體周圍炎，6 mm≤PPD<8 mm，DSB<種植體長(zhǎng)度50%;觀察組3共10例，重度種植體周圍炎，PPD>8 mm，DSB>種植體長(zhǎng)度50%。同時(shí)選擇同時(shí)期行種植治療且無種植體周圍炎發(fā)生的患者45例（種植體52顆）納入對(duì)照組。

1.2 方法 由同一人員測(cè)量患者PPD、DSB，并記錄患者mSBI和mPLI[8]，mSBI分為0～3級(jí)：0級(jí)，種植體表面無菌斑;1級(jí)，種植體表面用探針輕柔劃過可發(fā)現(xiàn)菌斑;2級(jí)，種植體表面肉眼可見菌斑;3級(jí)，種植體表面有大量的軟垢堆積。mPLI分為0～3級(jí)：0級(jí)，探診種植體齦緣沒有出血;1級(jí)，探診種植體齦緣有分散的點(diǎn)狀出血;2級(jí)，探診種植體齦緣在齦溝內(nèi)呈線狀出血;3級(jí)，種植體齦緣有重度或者自發(fā)出血。齦溝液的收集：去除牙齦周邊菌斑及軟垢，使用干燥無菌棉球擦拭種植體齦溝周邊，放置棉卷隔濕，并用氣槍空氣吹干，以防止唾液污染，將合適大小的消毒濾紙條插入種植體的牙冠近中、遠(yuǎn)中頰側(cè)和舌（鄂）1 mm并維持30 s，隨后放入樣品稀釋管中，于-70℃保存，使用NF-κB及RANKL的ELISA試劑盒（R&D Systems公司）檢測(cè)其中含量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 23.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料用（x±s）表示，多組比較使用F檢驗(yàn)，組間比較使用LSD-t檢驗(yàn)，并使用Pearson相關(guān)性分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 觀察組與對(duì)照組基線資料比較 各組一般資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。見表1。

2.2 各組患者種植情況對(duì)比 四組的PPD、DSB、mSBI及mPLI比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=0.214，0.233，0.257，0.313;P=0.012，0.011，0.008，0.024），且各指標(biāo)組內(nèi)比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.3 齦溝液中NF-κB及RANKL比較 各組齦溝液中NF-κB、RANKL比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=0.872，1.017;P=0.001，0.000）。見表3。

2.4 觀察組齦溝液中NF-κB及RANKL相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)分析顯示觀察組齦溝液中NF-κB與RANKL存在正相關(guān)（r=0.631，P=0.000）。見圖1。

3 討論

文獻(xiàn)[9]顯示我國(guó)種植體周圍炎于患者間發(fā)生率為28%～56%，于種植體間發(fā)生率為12%～43%，其本質(zhì)為口腔感染類疾病，病理改變?yōu)榉N植體周圍軟、硬組織的炎癥反應(yīng)[10]，局部可見典型充血水腫反應(yīng)，嚴(yán)重影響種植體及口腔功能;此外炎癥會(huì)破壞種植體周圍組織對(duì)種植體的支持作用，導(dǎo)致種植體穩(wěn)定性下降[11]。因此探究其發(fā)生機(jī)制、危險(xiǎn)因素對(duì)于指導(dǎo)臨床治療顯得尤為重要，NF-κB及RANKL在許多骨性相關(guān)疾病中存在著數(shù)量和功能的異常，但與種植體周圍炎的關(guān)系尚不明確，且兩者間相互關(guān)系也未見報(bào)道，為此本研究主要探究種植體周圍炎中NF-κB與RANKL的表達(dá)及其相關(guān)性。

NF-κB最早由Baltimore于1986年報(bào)道[12]，是一類能與多種基因啟動(dòng)子發(fā)生特異性結(jié)合并增強(qiáng)其轉(zhuǎn)錄的蛋白質(zhì)因子，已有研究表明其在免疫應(yīng)答、炎性反應(yīng)、細(xì)胞黏附、細(xì)胞增殖與凋亡等方面扮演著重要角色[13]，其在外界某些刺激下被激活并進(jìn)入細(xì)胞核，并與特定基因的啟動(dòng)子或增強(qiáng)子上相應(yīng)位點(diǎn)結(jié)合，啟動(dòng)或調(diào)控特定基因的轉(zhuǎn)錄，最終促使IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8、IFN-γ等炎癥因子的釋放[14]，從而造成局部或全身的炎癥狀態(tài)，其中RANKL正是激活NF-κB的細(xì)胞因子之一。有研究發(fā)現(xiàn)，RANKL在骨吸收、骨壞死等方面扮演著重要角色，RANKL活性的失控將導(dǎo)致哺乳動(dòng)物某些系統(tǒng)骨組織疾病如骨質(zhì)疏松、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牙周炎等的發(fā)生[15]。同時(shí)有研究，表明RANKL與種植體周圍炎關(guān)系密切，RANKL的過度活化可能在種植體周圍炎中發(fā)揮重要作用[16]。

PPD、DSB、mSBI及mPLI可直觀反應(yīng)種植體周圍炎癥嚴(yán)重程度，是臨床檢查中最直觀、簡(jiǎn)便的方法[17]。本研究結(jié)果表明，發(fā)生種植體周圍炎的上述指標(biāo)明顯高于健康種植體，證明種植體周圍炎確實(shí)存在炎性反應(yīng)，且種植體周圍炎越嚴(yán)重，其上述炎癥指標(biāo)也越來越高，這與鄭德春等[18]研究結(jié)果一致。

通過測(cè)定不同組別齦溝液中NF-κB及RANKL含量，結(jié)果表明輕、中、重度種植體周圍炎齦溝液中NF-κB及RANKL均顯著高于健康種植體，且重度種植體周圍炎中含量顯著高于中、低度炎癥，中度顯著高于低度炎癥，表明NF-κB及RANKL通路在種植體周圍炎的發(fā)生中具有一定作用，且隨著炎癥程度增加，其表達(dá)水平也顯著增加，李巖等[12]對(duì)犬類種植體周圍炎模型中NF-κB的研究也得出了類似結(jié)論。相關(guān)性分析顯示種植體周圍炎齦溝液中NF-κB與RANKL存在正相關(guān)，Li等[19]研究發(fā)現(xiàn)，RANKL與其受體的結(jié)合，可導(dǎo)致NF-κB的活化，進(jìn)而引發(fā)破骨細(xì)胞分化和促進(jìn)炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生，同時(shí)阻止炎性細(xì)胞的凋亡，增加局部破骨性炎癥的發(fā)生。

綜上所述，種植體周圍炎齦溝液中NF-κB表達(dá)顯著增高，且與RANKL存在明顯相關(guān)，其隨炎癥嚴(yán)重程度的增加而升高。

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（收稿日期：2018-09-30）（本文編輯：周亞杰）