硫酸粘桿菌素E發(fā)酵工藝優(yōu)化

孫慶柱 關(guān)景春 時(shí)均偉

（1.山東魯抗舍里樂藥業(yè)有限公司，山東濟(jì)寧 272100；2.山東魯抗生物制造有限公司，山東濟(jì)寧 272000）

1 產(chǎn)品介紹

1.1 產(chǎn)品名稱、分子式、分子量

產(chǎn)品名稱：硫酸粘桿菌素，即多粘菌素E，為多粘菌素E1、E2和E1-2硫酸鹽的復(fù)合物。

1.2 作用與用途

硫酸粘桿菌素對綠膿桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌、痢疾桿菌、百日咳桿菌等大部分革蘭氏陰性菌有顯著抗菌作用，為畜禽頑固性痢疾等腸道常見病的首選藥物。該藥物具有較低的濃度（0.004%）下對革蘭氏陰性菌引起的疾病有治療和預(yù)防作用。

2 工藝方案

菌種·培養(yǎng)工藝：

（1）搖瓶：融解凍結(jié)種子，接種0.2～1.0ml。26.5～29.5℃，旋轉(zhuǎn)式搖床220～240min-1培養(yǎng)18～24h后移種，最佳時(shí)間是pH在5.0～7.0之間，稀釋10倍的OD530在0.04以上。

（2）種子罐工藝：把最佳移種時(shí)間菌種通過火焰接種至種子罐。29～31℃，80rpm培養(yǎng)18～30h，向發(fā)酵罐移種的最佳時(shí)間是pH在6.2以下。

（3）發(fā)酵罐工藝：根據(jù)代謝情況分階段控制培養(yǎng)溫度、攪拌轉(zhuǎn)速、通氣比，并優(yōu)化補(bǔ)料工藝，降低動力和原材料成本。發(fā)酵周期一般90-120h。

3 工藝優(yōu)化

3.1 培養(yǎng)工藝

3.2 培養(yǎng)基配比

3.3 補(bǔ)料工藝

（1）使用氨水進(jìn)行pH值的調(diào)控，做好氨氮值控制，氨氮值高可用液堿調(diào)控。

（2）在發(fā)酵過程中后期開始起泡沫，用消沫劑控制液面，使用復(fù)合消泡劑效果更好。

（3）采用60～70%含量的液糖，依據(jù)發(fā)酵液殘?zhí)强刂茪執(zhí)呛吭?.2～0.3%。

4 結(jié)論與討論

本文通過對多粘桿菌進(jìn)行發(fā)酵工藝及培養(yǎng)基的優(yōu)化，大生產(chǎn)發(fā)酵生物效價(jià)可達(dá) 6.78 ×105U/ml，在發(fā)酵過程中優(yōu)化了遲效氮源豆粕和速效氮源硫酸銨配比，穩(wěn)定了生物效價(jià)穩(wěn)定長勢，并通過氨水穩(wěn)定pH和氨氮值，降低原材料投入成本，取得較好的經(jīng)濟(jì)效益。