晏意良 明溪縣動物疫病預(yù)防控制中心 福建明溪 365200
在日常檢測工作中,接收采自豬場的血樣時,經(jīng)常會遇到一些豬場由于路途比較遠(yuǎn)、道路崎嶇顛簸而造成豬全血溶血的情況。我們一貫做法都是棄之不用,要求豬場重新送樣。但是豬全血溶血對抗體檢測到底有否影響,我們也是模棱兩可。因此,有必要通過試驗來摸清豬全血溶血對樣本檢查的具體影響。本試驗通過觀察豬全血是否溶血對豬瘟抗體檢測的影響,對溶血情況是否會影響抗體檢測作初步探索,為日常檢測工作提供參考。
1.1 材料 在明溪縣某規(guī)模養(yǎng)殖場選擇75日齡肉豬20頭(21日齡一免廣東永順傳代細(xì)胞苗,55日齡二免中牧豬丹毒-巴氏桿菌-豬瘟三聯(lián)苗),每頭豬抽取全血各2份,共40份。相同條件保存,每頭2份血樣其中1份在運輸過程中反復(fù)顛簸,注射到5 mL離心管中離心,獲得20份溶血的血清并編號;另外1份正常保存,正常離心,獲得20份的血清編號與溶血的血清相對應(yīng),確保相對應(yīng)的血清來源于同一頭豬。
1.2 方法 離心后立即對血清進行豬瘟抗體檢測,試劑盒為北京愛德士元亨生物科技有限公司生產(chǎn);兩組血清在同一包被板上進行操作,分別設(shè)置陰陽性對照,在深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司生產(chǎn)的RT-6100型酶標(biāo)儀上讀取,波長450 nm,100×(陰性對照A平均值-樣品A值)/陰性對照A平均值≥40判斷為陽性。
2.1 溶血對血清外觀的影響 隨著全血的溶血,離心得到的血清變得鮮紅。
2.2 溶血對血清豬瘟抗體檢測的影響 共檢測40份血清,其中溶血血清20份,未溶血血清20份,分別對應(yīng)同一頭豬的2份全血,樣品A值分別見表1-表2。觀察溶血與未溶血血清樣品A值,發(fā)現(xiàn)溶血血清的A值較未溶血血清略低。
表1 未溶血血清樣品A值
表2 溶血血清樣品A值
再通過公式計算阻斷率,樣品阻斷率分別見表3-表4。觀察溶血與未溶血血清樣品阻斷率,發(fā)現(xiàn)溶血的血清較未溶血的血清阻斷率略低,但不影響樣品的陰陽性判定。兩組樣品都是相對應(yīng)的3個樣品陰性,相對應(yīng)的17個樣品陽性。
表3 未溶血血清樣品阻斷率
表4 溶血血清樣品阻斷率
試驗結(jié)果表明,豬全血溶血,除了使血清變得鮮紅,對血清豬瘟抗體檢測結(jié)果沒有明顯影響,分別對應(yīng)的兩組20份樣品陰陽性均一致。筆者認(rèn)為在豬瘟抗體檢測采樣時,樣品保存運輸過程中,除了正常的保存外,不必在意樣品是否溶血會對豬瘟抗體檢測造成影響。