高效液相色譜法檢測幾種蔬菜中啶蟲脒農(nóng)藥殘留

張靜

摘 要：隨著人們生活水平的提高，對日常的衣食住行的質(zhì)量要求也越來越高，尤其是對于食物方面。在食物的食用方面，蔬菜瓜果是最普遍的，但是，目前我國的蔬菜瓜果的種植還是主要依賴于農(nóng)藥使用，而人們一般比價排斥用農(nóng)藥種植的蔬菜，原因有二：一是農(nóng)藥種植口味差;二是農(nóng)藥種植的果實殘留多。基于此種現(xiàn)狀，本文就用高效液相色譜法檢測蔬菜中啶蟲脒的農(nóng)藥殘留問題進行簡單闡述。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法;檢測;殺蟲劑;農(nóng)藥殘留

一、高效液相色譜法基本原理及啶蟲脒的性質(zhì)

1.高效液相色譜法。高效液相色譜法是農(nóng)藥檢測常用的檢測方法之一，相比其他檢測方法，它具有色譜較為靈敏、反應(yīng)快速、分辨率高、重復(fù)性好的特點。首先，顧名思義，該方法檢測的就是液體相，兩相之間是互不相容的，會出現(xiàn)一個明顯的界面，當(dāng)開始試驗的時候，由于分離檢測極性強，所以當(dāng)溶質(zhì)開始測試的時候會相互分配，當(dāng)即將達到平衡的時候，就可以很明顯的發(fā)現(xiàn)所測成分的各種表觀性質(zhì)。下文主要是講述該方法在農(nóng)藥中檢測啶蟲脒中的應(yīng)用。另外，高效液相色譜主要分類有：高效凝膠色譜、高效離子交換液相色譜、反相高效液相色譜、疏水性高效液相色譜、高效親和液相色譜以及高效聚焦液相色譜等類型。用不同類型的高效液相色譜分離或分析各種農(nóng)作物農(nóng)藥的原理基本上與相對應(yīng)的普通液相層析的原理是相似的。

2.啶蟲脒。啶蟲脒屬中等的毒性農(nóng)藥，原來是對害蟲以胃毒和觸殺，對植物內(nèi)部組織滲透性強，所以耐雨水沖刷，殘效期長，對于害蟲的防止有良好效果。目前，大部分的作用是用來果黃蚜的防止，屢試不爽。主要使用方法是：根據(jù)蟲害發(fā)生的密集期，當(dāng)溫度提高之后，然后進行噴灑，有良好的治療和防止效果。但是在使用的時候，要注意不要在桑園附近噴灑，氣霧會對于桑園產(chǎn)生不利影響，在使用過程中，不要與堿性農(nóng)藥混用，這樣會減小藥效。

二、實驗部分

1.儀器、試劑和材料。美國Waters液相色譜儀;德國eppendrf5810離心機;德國IKA勻漿機;渦旋混合器;美國N-EVAP112氮吹儀;電子天平;食品搗碎機。色譜純乙腈;分析純中性氧化鋁：（100～200目，500℃灼燒4h，貯于密封容器中備用）;分析純弗羅里硅土（60～100目，500℃灼燒4h，貯于密封容器中備用）;色譜純硅藻土;啶蟲脒等九種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，分別用乙腈溶劑配制成濃度為1000μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液;使用前用乙腈稀釋成適用濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液（混標(biāo)）。表2列出了1種農(nóng)藥的基本信息。

2.液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜條件。色譜柱：BEHC18色譜柱，21cm×50mm（i.d.）×1.7μm，或性能相當(dāng)者;進樣量：10μL;電離方式：+EI;離子源溫度：120℃;錐孔反吹氣流量：50L/h;去溶劑氣：氮氣，純度≥99.999%，流速700L/h，溫度380℃;流動相：乙腈和0.1%甲酸;梯度洗脫見表2，測定方式：多反應(yīng)監(jiān)測。

3.樣品前處理。稱量0.5g樣品于研缽中，加入1g硅藻土混勻后，再加入1.5g中性氧化鋁或硅膠，充分研磨，裝入帶有篩板和濾紙的6mL固相萃取柱中，用2mL乙腈洗滌研缽，轉(zhuǎn)入柱中，再用10mL乙腈洗脫，收集洗脫液于10mL試管中，經(jīng)氮吹儀吹至近干后，用乙腈定容到1.0mL，用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測。

三、結(jié)果與討論

1.洗脫劑體積的確定。為了確定所用乙腈的洗脫體積，本研究分別試驗了9種農(nóng)藥的洗脫曲線及其相應(yīng)回收率，洗脫曲線基本相似，以噻螨酮的洗脫曲線為例。結(jié)果顯示，當(dāng)淋洗體積為10mL時，可洗脫完全，故洗脫體積選擇10mL。

2.儀器分析方法的優(yōu)化。9種農(nóng)藥多屬于難以氣化物質(zhì)，根據(jù)9種農(nóng)藥的這一性質(zhì)，我們選擇了液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用作為檢測和確證的方法，如圖4所示。

3.檢測下限和線性關(guān)系。研究過程中，廣泛查找了美國、歐盟、日本等發(fā)達國家和地區(qū)對于9種農(nóng)藥在蔬菜、水果、肉和魚類食品中的殘留限量，并依據(jù)限量優(yōu)化方法條件，使所得到的方法能夠滿足國內(nèi)外殘留限量的要求。方法檢測下限是依據(jù)10種樣品基質(zhì)中9種農(nóng)藥在LC-MS/MS性噪比（S/N≥10）而定的。在本方法所確定的檢測條件下，分別對9種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物在一定濃度范圍內(nèi)制備5個不同濃度水平的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，以相對濃度與相對峰面積作曲線，濃度范圍為0.01～1.00μg/mL時，呈良好線性關(guān)系。方法檢出限、標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)以及添加的濃度為0.01mg/kg，0.02mg/kg和0.051mg/kg的回收率范圍列于表1。

4.樣品測定。根據(jù)食品中水分、脂肪、糖等成分的含量不同進行了科學(xué)、細(xì)致、合理的分類，分別在植物源性食品和動物源性食品中，選取了10種代表性樣品（白菜、土豆、玉米、紫甘藍、梨、鯉魚、雞胸、香菇、菠菜、大蔥）作為研究對象，采用本文方法對樣品進行9種農(nóng)藥的添加回收實驗，平行測定7次。

四、含啶蟲脒農(nóng)藥殘留的檢測實例

兩種檢測方法中，各有局限性，酶抑制法目前之能實在蔬菜中檢測一些酯類的農(nóng)藥，高效液相色譜法在當(dāng)今的農(nóng)藥檢測方面占有很大的比重，尤其是在啶蟲脒的檢測中，下文就使用該方法去檢測幾類蔬菜的實例去進一步探討未來的色譜法檢測農(nóng)藥殘留的一些注意事項和經(jīng)驗。

1.茶葉中的啶蟲脒測定。因為茶葉由于種類比較多，而且產(chǎn)地不同，所以農(nóng)藥殘留在茶葉上對于茶葉的品質(zhì)有很大的影響，因此，就需要用高效液相色譜法來檢測。第一步：先將茶葉中的試樣提取出來，主要方式有震蕩提取法，索式提取法等。然后進行凈化，排除實驗中的干擾物質(zhì)，如果還是不能滿足實驗要求，就需要再進行濃縮，啶蟲脒作為一種堿性殺蟲劑，作用速度較快，因此在實驗過程中要設(shè)定好合適的色譜條件，嚴(yán)格按照高效液相色譜法的相關(guān)操作流程，在最后的萃取過程中，要進行數(shù)據(jù)積分處理，利用PCA投影法進行初步探測。要想獲得更為理想的實驗結(jié)論，需要在實驗的數(shù)據(jù)處理分析，色譜處理條件上創(chuàng)新。

2.啶蟲脒在普通蔬菜中的殘留測定。蔬菜是生活中不可或缺的東西，所以對蔬菜中的含量進行研究是十分必要的，主要實驗步驟是：嚴(yán)格設(shè)置色譜分析條件、純樣本的制備、凈化?；厥铡Ｈ缓蠓治銎浞椒ň€性關(guān)系來確定回收率，再用最低檢出量計算最低檢出質(zhì)量分?jǐn)?shù)，利用高效液相色譜法測定蔬菜中的啶蟲脒既簡單有快捷，而且計量比較準(zhǔn)確，還可以進行定量分析。

3.啶蟲脒在西紅柿中的殘留測定。由于啶蟲脒的組織滲透性較強，所以在種植西紅柿瓜的時候一般不采用含有該成分的農(nóng)藥，但是從理論上檢測西紅柿中的啶蟲脒含量也是可以的，在實驗的過程中，如果要考慮西紅柿汁對于實驗的影響，可能要多一道工序就是二次取樣。五、結(jié)語。啶蟲脒在農(nóng)藥中的使用已經(jīng)非常普遍，為了保證人們食用的安全，再一步提高生活質(zhì)量和健康水平。針對這種情況以及目前我國使用農(nóng)藥的泛濫，當(dāng)下迫在眉睫的就是完善農(nóng)藥檢測的相關(guān)法規(guī)和條例，然后國家要有相關(guān)的政策支持地方或者企業(yè)去研究檢測的手段和技術(shù)問題。

參考文獻：

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