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    不同蒸煮條件對糙米多酚含量及抗氧化活性的影響

    2019-07-01 03:50:27劉璐路飛傅靖晗賈存瑩王曉陶
    農(nóng)業(yè)科技與裝備 2019年3期
    關(guān)鍵詞:多酚抗氧化活性糙米

    劉璐 路飛 傅靖晗 賈存瑩 王曉陶

    摘要:以糙米為試驗對象,研究不同蒸煮條件下糙米自由態(tài)多酚和結(jié)合態(tài)多酚的含量及其抗氧化活性。結(jié)果表明:蒸煮時間對自由態(tài)多酚的影響大于結(jié)合態(tài)多酚,自由態(tài)多酚對總酚及DPPH自由基清除率的貢獻程度均大于結(jié)合態(tài)多酚,進而得出自由態(tài)多酚對抗氧化活性的貢獻大于結(jié)合態(tài)多酚。

    關(guān)鍵詞:糙米;多酚;抗氧化活性;蒸煮條件

    中圖分類號:TS210.1 ? ?文獻標識碼:A ? ?文章編號:1674-1161(2019)03-0047-03

    近年來,糙米食品的營養(yǎng)保健功能越來越被人們所了解和重視,其含有的多酚、黃酮等抗氧化活性成分能夠清除人體內(nèi)過剩的自由基,對一些慢性疾病起到延緩與預(yù)防作用。因此,研究糙米食品中多酚的含量及其抗氧化活性,對于維持人們身體健康、改善食品質(zhì)量具有重要的現(xiàn)實意義。加工方式會對糙米食品中的多酚含量及其抗氧化活性產(chǎn)生一定的影響。目前國內(nèi)糙米食品的多酚及其抗氧化性的相關(guān)研究主要集中在蒸煮加工、擠壓工藝和發(fā)芽工藝等方面。本課題以糙米為試驗對象,測定不同蒸煮條件下糙米自由態(tài)多酚和結(jié)合態(tài)多酚的含量,觀察其抗氧化活性的變化,并對蒸煮條件與酚類物質(zhì)含量及其抗氧化活性的相關(guān)性加以分析,研究何種多酚對抗氧化活性的貢獻較大、何種多酚受蒸煮條件的影響較大,以期為糙米食品的加工推薦較為合理的蒸煮條件。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    糙米(遼寧盤錦東北香糙米):盤錦運通生態(tài)農(nóng)場。

    福林—酚(Folin-Ciocalten)試劑:北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司;沒食子酸:上海麥克林生化科技有限公司;鹽酸(分析純):天津市大茂化學(xué)試劑廠;無水碳酸鈉(分析純):天津市恒興化學(xué)試劑有限公司;氫氧化鈉(分析純):天津市大茂化學(xué)試劑廠;甲醇(分析純):成都市科龍化工試劑廠;乙酸乙酯(分析純):天津市大茂化學(xué)試劑廠;無水乙醇(分析純):成都市科隆化工試劑廠;鄰苯二甲酸氫鉀:天津市大茂化學(xué)試劑廠;DPPH:天津市大茂化學(xué)試劑廠。

    1.2 儀器與設(shè)備

    OMG-3型干燥箱:河北歐美佳食品機械有限公司;DK-S2b型數(shù)顯攪拌水浴鍋:常州賽普實驗儀器廠;ESJ120-4B型電子天平:沈陽龍騰電子有限公司;UV-2000型紫外分光光度計:上海龍尼科儀器有限公司;PHS-3E型pH計:上海霄盛電子商務(wù)公司;XDW-21A1電磁爐:美的集團。

    1.3 試驗方法

    1.3.1 煮制方法 稱取50 g糙米于500 mL燒杯中,倒入蒸餾水浸泡一定時間。將浸泡好的糙米放入水浴鍋中,設(shè)置溫度、時間進行煮制。將煮制好的糙米放入30 ℃恒溫干燥箱中24 h,用萬能粉碎機粉碎,過60目篩,備用。

    1.3.2 蒸制方法 蒸鍋中加入3 L水置于電磁爐上,鍋內(nèi)鋪適當(dāng)大小的紗布,將洗干凈的50 g糙米置于紗布上,設(shè)置時間進行蒸制。將蒸制好的糙米放入30 ℃恒溫干燥箱中24 h,用萬能粉碎機粉碎,過60目篩,備用。

    1.4 指標測定

    1.4.1 自由態(tài)多酚的提取方法 參考王耀紅的方法,略作修改。稱取0.5 g樣品,加入5 mL 70%的甲醇,振蕩均質(zhì),于4 ℃恒溫振蕩過夜,10 000 r/min離心5 min,取上清液,重復(fù)提取1次,合并濾液,再以甲醇定容至10 mL,-20 ℃保存,備用。

    1.4.2 結(jié)合態(tài)多酚的提取方法 參考王耀紅和楊紅葉的方法,略作修改。向提取自由態(tài)多酚后剩余的殘渣中加入5 mL 4 mol/L的NaOH溶液堿化,于95 ℃水浴30 min,再于室溫下反應(yīng)1 h,用6 mol/L的HCL酸化至pH值2~3。加入2 mL正己烷脫脂5 min,

    7 000 r/min離心5 min,用乙酸乙酯(體積比1∶1)萃取3次,合并濾液,-20 ℃保存,備用。

    1.4.3 多酚含量的測定方法 參考王萬秋的福林—酚法,略作修改。精確稱取0.010 0 g沒食子酸標準品,得到濃度為1 mg/mL的沒食子酸儲備液。分別精確吸取不同體積的儲備液于10 mL棕色容量瓶中,定容,得到不同濃度的沒食子酸標準液。分別取50 μL不同濃度的標準液,加去離子水和福林—酚試劑,混勻后靜置8 min,加入375 μL 7%的Na2CO3,補蒸餾水至2.5 mL,室溫靜置,避光反應(yīng)1 h,顯色后于760 nm下測定吸光值,以沒食子酸(GAE)濃度為橫坐標,吸光度A為縱坐標繪制標準曲線,結(jié)果如圖1所示。

    1.4.4 抗氧化活性的測定方法 參考李潤國的方法,略作修改??寡趸钚缘臏y定采用DPPH法,以比色法測定DPPH自由基清除能力。準確稱取0.007 9 g DPPH,用無水乙醇溶解并定容至100 mL。吸取樣品待測液2 mL,加入2×10-4 mol/L DPPH—乙醇溶液2 mL,搖勻,避光靜置1 h,以蒸餾水為空白對照,測定517 nm處吸光值,并將此值記為A樣品;吸取樣品待測液2 mL,加入無水乙醇2 mL,搖勻,避光靜置1 h,以蒸餾水為空白對照,測定517 nm處吸光值,并將此值記為A對照;吸取蒸餾水2 mL,加入2×10-4 mol/L DPPH—乙醇溶液2 mL,搖勻,避光靜置1 h,以蒸餾水為空白對照,測定517 nm處吸光值,并將此值記為A空白。

    1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

    利用Excel 2010軟件統(tǒng)計數(shù)據(jù),所有數(shù)據(jù)均為3次重復(fù)試驗的平均值和標準誤差。利用origin 8.0軟件對數(shù)據(jù)進行差異顯著性分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 蒸煮時間對糙米自由態(tài)多酚含量的影響

    不同蒸煮時間下糙米自由態(tài)多酚含量測定結(jié)果見表1。

    由表1可知:隨著蒸煮時間的增加,自由態(tài)多酚的含量逐漸升高,在90 min時達到最大值,之后逐漸降低;試驗組蒸制條件下含量最大值為39.42±0.64 μg GAE/g,試驗組煮制條件下含量最大值為35.90±1.25 μg GAE/g,對照組含量最大值為35.12±1.45

    μg GAE/g。說明短時間的蒸煮和較長時間的蒸煮對自由態(tài)多酚的破壞程度不同。在蒸煮的初始階段,短時間的高溫會大量破壞自由態(tài)多酚;而隨著蒸煮時間的增加,由于發(fā)生美拉德反應(yīng),自由態(tài)多酚的含量會有所升高;但當(dāng)超過最大值后,自由態(tài)多酚的含量則會由于持續(xù)高溫而迅速降低。

    2.2 蒸煮時間對糙米結(jié)合態(tài)多酚含量的影響

    不同蒸煮時間下糙米結(jié)合態(tài)多酚含量測定結(jié)果見表2。

    由表2可知:隨著蒸煮時間的增加,結(jié)合態(tài)多酚的含量逐漸升高,在90 min時達到最大值,之后逐漸降低;試驗組蒸制條件下含量最大值為18.52±0.91 μg GAE/g,試驗組煮制條件下含量最大值為17.91±0.56 μg GAE/g,對照組含量最大值為19.31±0.67

    μg GAE/g。

    2.3 不同蒸煮時間下糙米自由態(tài)多酚和結(jié)合態(tài)多酚對DPPH自由基清除率的比較

    不同蒸煮時間下糙米自由態(tài)多酚和結(jié)合態(tài)多酚對DPPH清除率測定結(jié)果見表3。

    由表3可知:隨著蒸煮時間的增加,自由態(tài)和結(jié)合態(tài)多酚對DPPH自由基清除率逐漸升高,在90 min時達到最大值。兩者的DPPH自由基清除率在30~90 min內(nèi)顯著升高(p<0.05),并在90 min時具有顯著差異(p<0.05);當(dāng)蒸煮時間超過90 min后,均不再升高,轉(zhuǎn)而降低。另外,自由態(tài)多酚對DPPH清除率隨時間變化趨勢顯著大于結(jié)合態(tài)多酚(p<0.05)。這說明,蒸煮時間對自由態(tài)多酚的影響大于結(jié)合態(tài)多酚,兩者總的DPPH自由基清除率的變化趨勢與其含量的變化趨勢相似,在90 min時總酚對DPPH清除率最大,此時蒸制、煮制對多酚的破壞程度均為最小,糙米的抗氧化活性最高。

    3 結(jié)論

    1) 不同蒸煮時間條件下糙米樣品及對照組的多酚含量及其DPPH自由基清除率結(jié)果表明:蒸煮90 min后,樣品及對照組的自由態(tài)多酚、結(jié)合態(tài)多酚及總酚含量均為最高,相對應(yīng)的DPPH自由基清除率也最高,進而得出蒸煮時間為90 min時糙米多酚含量最高、抗氧化活性最好。

    2) 不同蒸煮條件下糙米自由態(tài)多酚和結(jié)合態(tài)多酚對DPPH自由基清除率的比較結(jié)果表明:蒸煮時間對自由態(tài)多酚的影響大于結(jié)合態(tài)多酚,自由態(tài)多酚對總酚及DPPH自由基清除率的貢獻程度大于結(jié)合態(tài)多酚,進而得出自由態(tài)多酚對抗氧化活性的貢獻大于結(jié)合態(tài)多酚。

    參考文獻

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