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    釀酒葡萄新品系‘黑珍珠’果實品質(zhì)分析

    2019-07-01 07:50:22彭文婷王雯染楊航宇陳為凱
    食品科學 2019年11期
    關鍵詞:游離態(tài)黑珍珠花色

    彭文婷,王雯染,楊航宇,陳為凱,楊 哲,何 非,王 軍,*

    (1.中國農(nóng)業(yè)大學食品科學與營養(yǎng)工程學院,葡萄與葡萄酒研究中心,北京 100083;2.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部葡萄酒加工重點實驗室,北京 100083)

    ‘黑珍珠’(Pearl Noir,暫定名)是杜喜山在2008年于‘貝達’砧木園中發(fā)現(xiàn)的植物學性狀明顯區(qū)別于‘貝達’的葡萄新品系(代號為DXS-08),其親本信息未知。該品系早熟、抗病性強,其單品種葡萄酒顏色深。

    釀酒葡萄果實的品質(zhì)(包括漿果質(zhì)量、體積、糖和酸的質(zhì)量分數(shù)等)在很大程度上決定了葡萄酒的質(zhì)量。而酚類物質(zhì)與葡萄酒的色澤、澄清度、風味直接相關,花色苷作為葡萄果實中普遍存在的類黃酮化合物之一,能夠為葡萄及葡萄酒提供輕微的澀味,而且還能與一些香氣化合物相互作用。花色苷由具有C6-C3-C6骨架的類黃酮花色素和糖配體組成[1],其中B環(huán)上R1和R2的取代基不同,則所形成的花色素不同,各類花色苷會呈現(xiàn)不同色調(diào),這對葡萄和葡萄酒的顏色起到至關重要的作用[2]。比較常見的花色素有花葵素、花青素、花翠素、甲基花青素、甲基花翠素和二甲基花翠素。研究發(fā)現(xiàn),歐亞種葡萄(Vitis vinifera)一般都只含有單糖苷化的花青素、花翠素、甲基花青素、甲基花翠素和二甲基花翠素的3-葡萄糖苷、3-乙酰化葡萄糖苷、3-p-香豆酰葡萄糖苷和3-p-咖啡?;咸烟擒昭苌?,其中二甲基花翠素類花色苷含量較高,一般不含有花葵素類花色苷[3]。葡萄果實作為葡萄酒香氣的重要來源之一,對葡萄酒的品種典型性和產(chǎn)地風格起決定性作用。在葡萄果實中,香氣物質(zhì)以游離態(tài)和糖苷結(jié)合態(tài)兩種形式存在。游離態(tài)的香氣物質(zhì)能揮發(fā)從而被人感知,對構(gòu)成葡萄果實和葡萄酒香氣有重要的作用;而糖苷結(jié)合態(tài)香氣物質(zhì)是沒有氣味、不揮發(fā)的香氣前體物,但在葡萄酒的釀造過程中能經(jīng)過酶促或非酶促反應將其變成相應的游離態(tài)物質(zhì)進而影響葡萄酒的香氣[4]。簡單序列重復(simple sequence repeats,SSR)由于具有含量豐富、多態(tài)性高、共顯性遺傳、技術(shù)操作簡單等特點,被廣泛應用于葡萄品種的鑒定、親緣關系及起源分析和遺傳圖譜的構(gòu)建中。SSR廣泛分布于整個植物基因組內(nèi),表現(xiàn)出豐富的多態(tài)性,且親緣關系越近,SSR片段長度差異越小,因此SSR標記可應用于親緣關系分析。

    為了研究‘黑珍珠’葡萄果實的釀酒特性,探究其親本信息,本實驗利用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(high performance liquid chromatography-mass spectrometry,HPLC-MS)和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(gas chromatographymass spectrometer,GC-MS)技術(shù)分析‘黑珍珠’葡萄果實的果皮花色苷和香氣化合物的組成及含量,并利用SSR標記分析其遺傳信息,以期為‘黑珍珠’作為調(diào)色品種的進一步開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    ‘黑珍珠’葡萄果實于2015年采自北京市大興區(qū)采育鎮(zhèn)‘喜山葡萄合作社’(39°39′ N、116°42′ E),葡萄園栽植密度為2.5 m×1.0 m,葉幕形為改良的垂直葉幕形[5],南北行向,留梢量為12~15 支/延長米(行)。在葡萄采收期,隨機采集葡萄果穗的頂端、中間和底部的各2~3 粒漿果,每次重復采集300 粒漿果,重復3 次,裝入冰盒運回實驗室。運回實驗室的葡萄漿果液氮速凍后保存于-40 ℃冰箱中,用于理化指標、花色苷和香氣化合物分析。采集5~10 片生長良好的幼葉裝入冰盒中運回實驗室,液氮速凍后置于-80 ℃冰箱中保存,用于基因組DNA提取。同時,在中國農(nóng)業(yè)大學上莊實驗站葡萄資源圃(40°08′ N、116°10′ E)采集‘貝達’、‘Kolor’和‘煙73’的幼葉5~10 片,作為參考品種,用于SSR指紋分析。

    氫氧化鈉(分析純)、鄰苯二甲酸氫鉀(分析純)北京化工廠;酚酞 天津市科密歐化學試劑有限公司;花色苷標準品、二甲花翠素-3-O-葡萄糖苷 美國Sigma公司;乙腈、甲酸和甲醇(均為色譜純) 美國Thermo Fisher公司。

    1.2 儀器與設備

    PAL-1手持糖度計 日本Atago公司;PB-10 pH計德國Sartorius公司;FD-1C-50冷凍干燥機 北京博醫(yī)康實驗儀器有限公司;RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 上海亞榮生化儀器廠;SHK-99-II臺式空氣恒溫搖床 北京北方同正生物技術(shù)發(fā)展有限公司;GL-20G-Ⅱ離心機 上海安亭科學儀器廠;1100系列配有二極管陣列檢測器的LC/MSD Trap-VL HPLC-離子阱MS儀、1200系列LC/MSD Trap-VL HPLC-三重四極桿MS儀、6890 GC儀、5975 MS儀 美國Agilent公司;Prime G02聚合酶鏈式反應(polymeras chain reaction,PCR)儀 英國Bibby Scientific公司。

    1.3 方法

    1.3.1 ‘黑珍珠’植物學性狀和果實性狀觀測

    根據(jù)國際葡萄與葡萄酒組織(International Organisation of Vine and Wine,OIV)標準,對新梢、幼葉、成齡葉和果實的部分性狀進行描述[6-7]。取10 片成齡葉分別測量主脈長(即葉長)、葉寬、葉緣鋸齒長、葉緣鋸齒寬和葉柄長,并計算成齡葉的長寬比和鋸齒的長寬比。隨機取10 個果穗,分別稱量其質(zhì)量并計算果穗平均質(zhì)量。取100 粒漿果稱質(zhì)量,解凍24 h后破碎取汁,取上清液用于pH值、可溶性固形物含量以及可滴定酸質(zhì)量濃度的測定。pH值用pH計測定,果汁可溶性固形物含量用手持糖度儀測定[8],果汁可滴定酸質(zhì)量濃度用NaOH滴定法測定[9],并以每升葡萄酒中酒石酸質(zhì)量計。

    1.3.2 ‘黑珍珠’葡萄果皮花色苷提取和測定

    花色苷提取參照He Jianjun等[10]的方法,準確稱取0.499 5~0.500 5 g冷凍干燥后的葡萄果皮粉,加入含體積分數(shù)2%甲酸的甲醇溶液10 mL,溶液在室溫下避光超聲10 min,在搖床萃取30 min(25 ℃下140 r/min避光)后,4 ℃下8 000 r/min離心10 min,將上清液轉(zhuǎn)移至100 mL圓底燒瓶中,以上步驟重復提取5 次后,合并上清液至燒瓶中。上清液于25 ℃下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干,用花色苷定容劑(體積分數(shù)2%(后同)甲酸、10.8%乙腈水溶液)定容至10 mL后,0.22 μm水系膜過濾,用于HPLC-MS檢測,每個樣品重復提取2 次?;ㄉ蘸扛鶕?jù)二甲花翠素標準曲線進行半定量,表示為mg/kg mf。

    HPLC-MS條件:使用帶有二極管陣列檢測器的1100 LC/MSD Trap-VL HPLC-離子阱MS,色譜柱為Kromasil 100-5-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),柱溫為50 ℃,進樣量為30 μL,檢測波長為525 nm,流速為1 mL/min。流動相A:V(水)∶V(甲酸)∶V(乙腈)=92∶2∶6;流動相B:V(水)∶V(甲酸)∶V(乙腈)=44∶2∶54。洗脫程序:0~1 min,0~10% B;1~18 min,10%~25% B;18~20 min,25% B;20~30 min,25%~40% B;30~35 min,40%~70% B;35~40 min,70%~100% B。離子阱MS檢測器的采集參數(shù)為電噴霧離子源,正離子模式,離子掃描范圍為m/z 100~1 500,霧化器壓力為207 kPa,干燥氣流速為10 L/min,干燥氣溫度為325 ℃。

    1.3.3 ‘黑珍珠’葡萄香氣化合物的提取和測定

    取保存于低溫(-40 ℃)冰箱的葡萄果實50 g,去除果柄和種子,依次加入抑制內(nèi)源糖苷酶活性的0.5 g D-葡萄糖酸內(nèi)酯和1 g交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮(防止氧化),并且破碎至粉末狀;在4 ℃條件下靜置浸漬 4 h;在4 ℃、12 000 r/min條件下離心10 min,并且收集上層澄清葡萄汁,參照Lan Yibin等[11]的頂空固相微萃?。╤ead space-solid phase microextraction,HS-SPME)條件萃取游離態(tài)香氣物質(zhì)。

    結(jié)合態(tài)香氣物質(zhì)的提取參照Lan Yibin等[11]的方法:在活化后的SPME柱中加入2 mL葡萄汁,然后依次加入2 mL能夠去除低分子質(zhì)量糖、酸等極性化合物的水和5 mL去除游離態(tài)非極性香味化合物的二氯甲烷,最后糖苷態(tài)香氣物質(zhì)用20 mL甲醇溶液洗脫。收集洗脫后的甲醇溶液,在30 ℃真空條件下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干,使用含0.1 g糖苷酶AR2000 的檸檬酸/磷酸氫二鉀緩沖液(0.2 mol/L、pH 5)10 mL重新溶解,隨后轉(zhuǎn)移至密閉離心管,37 ℃恒溫酶解16 h,每個樣品重復提取2 次。釋放的結(jié)合態(tài)香氣物質(zhì)經(jīng)HS-SPME后進樣至GC-MS檢測。

    HS-SPME條件:CTC CombiPAL自動進樣器自動萃取樣品中香氣化合物,自動進樣器配備2 cm聚二甲基硅氧烷/碳篩/二乙烯苯萃取頭,萃取頭使用前先在250 ℃條件下活化60 min。稱取1.0 g NaCl放入15 mL進樣小瓶,加入5 mL葡萄汁或糖苷水解液和10 μL作為內(nèi)標的4-甲基-2-戊醇(1.038 8 g/L),迅速將進樣小瓶用帶有聚四氟乙烯隔墊的蓋子密封。樣品瓶在加熱攪拌設備中在40 ℃條件下加熱攪拌30 min,然后將萃取頭插入樣品瓶頂空部分,40 ℃繼續(xù)加熱攪拌30 min,加熱攪拌設備的轉(zhuǎn)速為500 r/min。萃取頭在GC進樣口(250 ℃)解吸8 min完成進樣。

    GC-MS條件參考Wu Yuwen等[12]的方法。香氣化合物定性采用自動解卷積技術(shù)對GC-MS全掃描數(shù)據(jù)文件進行解卷積分析,根據(jù)各物質(zhì)的保留時間以及C7~C24正構(gòu)烷烴在相同GC條件下的保留時間計算其相應的保留指數(shù),與標準品保留指數(shù)、MS譜圖以及NIST Chemical WebBook中收錄的極性柱條件下所測保留指數(shù)比較,差值絕對值小于50的組分可定性為該化合物。定量方法參考Wu Yuwen等[12]的方法,利用標準品香氣物質(zhì)在模擬葡萄汁溶液中的標準曲線對已有標準品的物質(zhì)定量;利用化學結(jié)構(gòu)和官能團相似、碳原子數(shù)相近的標準品的標準曲線對沒有標準品的物質(zhì)進行半定量。樣品及標準曲線均通過相同濃度的4-甲基-2-戊醇作為內(nèi)標對儀器的響應狀態(tài)進行校正。香氣物質(zhì)的含量表示為μg/kg mf。

    1.3.4 ‘黑珍珠’SSR指紋分析

    葡萄葉片樣品基因組DNA提取采用王軍等[13]改良的十六烷基三甲基溴化銨法。選用6 對(VVS2、VVMD5、VVMD7、VVMD27、Vrzag62、Vrzag79)葡萄種植資源數(shù)據(jù)庫(http://www.vitis-vea.de/)提供的引物用于SSR擴增,引物序列見表1。PCR體系為20 μL,包括2 μL 10×PCR buffer、1 U Taq酶、0.2 mmol/L dNTP、1.5 mmol/L Mg2+、0.4 μmol/L引物、DNA模板50 ng,其余為dd H2O。PCR擴增程序為:94 ℃預變性5 min;94 ℃變性30 s,50~60 ℃退火30 s,72 ℃延伸40 s,35 個循環(huán);72 ℃延伸10 min。相同模板重復擴增兩次,以保證結(jié)果的準確性。擴增后產(chǎn)物送至蘇州金唯智生物科技有限公司進行毛細管電泳,利用Genemapper V3.2軟件進行條帶分析,確定每個位點的片段長度。

    表1 6 對SSR引物序列、退火溫度和目標片段長度Table 1 Six pairs of SSR primer sequence, annealing temperature and target size

    1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

    實驗結(jié)果測定3 次,使用Excel 2010、SPSS 19.0和Origin 8.0軟件進行數(shù)據(jù)處理和作圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 ‘黑珍珠’的植物形態(tài)學與果實性狀

    ‘黑珍珠’嫩梢為淺綠色,稍尖絨毛著色極淺,幼葉為綠色,上表皮顏色為淺紅棕色(圖1)。成齡葉為綠色,近五角形,全緣。葉表面有光澤,微具泡狀突起,葉背光滑無絨毛。主脈無花青素著色。葉緣鋸齒雙側(cè)直,葉柄洼半開張,呈V形。葉長11.23 cm、寬13.58 cm、長寬比0.83。鋸齒長1.25 cm、寬1.73 cm、長寬比為0.72、葉柄長5.67 cm。‘黑珍珠’果穗上所有漿果成熟度相對一致,果穗緊、呈圓錐形、有歧肩,每新稍果穗數(shù)為1.73。漿果呈圓形,果皮為紫黑色(圖1)。植株形態(tài)學和果實性狀描述如表2所示。

    圖1 ‘黑珍珠’葡萄嫩稍、典型果穗和成熟葉片F(xiàn)ig. 1 Shoot, typical cluster and ripening leaves of ‘Pearl Noir’ grapes

    表2 ‘黑珍珠’植株形態(tài)學和果實性狀描述Table 2 Descriptive morphological and biological traits of‘Pearl Noir’ grapes

    2.2 ‘黑珍珠’的果實品質(zhì)分析

    釀酒葡萄理化指標是決定葡萄酒品質(zhì)的關鍵因素[14],其最適的可溶性固形物含量因酒類型的要求而異,一般為20~25 °Brix[15]。pH值是與酸密切相關的一個指標,成熟期適宜的葡萄其果汁pH值應在3.00~3.60之間[15]。可滴定酸質(zhì)量濃度能夠反映溶液中H+的總量,其在6.5~8.5 g/L被認為是生產(chǎn)協(xié)調(diào)性好的葡萄酒的最佳質(zhì)量濃度[16]?!谡渲椤咸阎奶撬岜葹?0.10±0.11,葡萄品質(zhì)較好?!谡渲椤咸阎目扇苄怨绦挝锖?、pH值均在適宜的釀酒葡萄理化指標要求范圍內(nèi),而可滴定酸質(zhì)量濃度偏高(表3)。其單品種酒顏色深,同時期顏色明顯優(yōu)于‘美樂’與‘赤霞珠’等釀造的葡萄酒,適合用于顏色較淺葡萄酒的調(diào)色[17-18]。

    表3 ‘黑珍珠’葡萄果實理化指標Table 3 Physiochemical parameters of ‘Pearl Noir’ grapes

    2.3 ‘黑珍珠’葡萄果皮中花色苷組成分析

    花色苷組成及其含量是評價葡萄品質(zhì)的一個重要指標[1],而且‘黑珍珠’葡萄果皮顏色較深,花色苷含量較高。在‘黑珍珠’葡萄果皮中共檢測到14 種花色苷(表4),其中花色素雙葡萄糖苷9 種,分別是二甲花翠素-3,5-雙葡萄糖苷、甲基花翠素-3,5-雙葡萄糖苷、花翠素-3,5-雙葡萄糖苷、花翠素-3-乙?;咸烟擒?5-葡萄糖苷、甲基花青素-3,5-雙葡萄糖苷、花翠素-3-香豆?;咸烟擒?5-葡萄糖苷、二甲花翠素-3-乙?;咸烟擒?5-葡萄糖苷、二甲花翠素-3-香豆酰化葡萄糖苷-5-葡萄糖苷、甲基花翠素-3-香豆?;咸烟擒?5-葡萄糖苷。這9 種花色素雙葡萄糖苷的含量依次降低?!谡渲椤咸压ぶ袡z測到5 種花色素單葡萄糖苷,分別是花翠素-3-香豆?;咸烟擒铡⒓谆ù渌?3-葡萄糖苷、二甲花翠素-3-葡萄糖苷、二甲花翠素-3-香豆?;咸烟擒?、甲基花翠素-3-香豆?;咸烟擒??!谡渲椤咸压ぶ械?4 種花色苷按化學結(jié)構(gòu)可以分為二甲花翠素衍生物(5 種)、花翠素衍生物(3 種)、甲基花翠素衍生物(5 種)、甲基花青素衍生物(1 種),其中不含有花青素衍生物?!谡渲椤咸训幕ㄉ找远谆ù渌匮苌锏暮孔罡?,占花色苷總量的52.7%,其中以二甲花翠素-3,5-雙葡萄糖苷的含量最高,其次是甲基花翠素-3-葡萄糖苷?;ù渌?、甲基花翠素和甲基花青素分別占花色苷總量的17.7%、25.9%、3.6%(圖2),而甲基花青素衍生物只以雙葡萄糖苷形式存在。

    表4 ‘黑珍珠’葡萄果皮花色苷組成和含量Table 4 Profile and content of anthocyanins in the skin of‘Pearl Noir’ grapes

    研究表明,單糖苷化的花青素、花翠素、甲基花翠素、甲基花青素和二甲花翠素的3-葡萄糖苷衍生物是歐亞種葡萄(Vitis vinifera)常見的花色苷種類[19-24],花色苷的主要成分是二甲花翠素-3-葡萄糖苷。而含有花色素雙糖苷是非歐亞種葡萄的重要特征,有報道稱非歐亞種葡萄花色苷的主要成分是二甲花翠素-3,5-雙葡萄糖苷[25]。典型的非歐亞種葡萄如中國野生葡萄種均含有花色素雙糖苷[26],圓葉葡萄(Vitis rotundifolia)既含有花色素單葡萄糖苷也含有雙葡萄糖苷,但其種類和含量均較花色素雙葡萄糖苷少,少數(shù)圓葉葡萄可能不含有單葡萄糖苷[27]。在本研究中,‘黑珍珠’葡萄果皮的花色苷組成均是非歐亞種葡萄中常見的花色苷,主要以雙糖苷為主。此外,‘黑珍珠’葡萄果皮花色苷含量明顯高于‘赤霞珠’(526.93 mg/kg mf)和‘美樂’(277.33 mg/kg mf)等歐亞種葡萄[28]。因此,推測‘黑珍珠’葡萄含有非歐亞種葡萄的血緣?!谡渲椤ㄉ蘸扛撸c‘煙73’和‘紫北塞’等染色葡萄不同[10,29-30],‘黑珍珠’主要以雙糖苷為主,而‘煙73’和‘紫北塞’的花色苷主要為單糖苷,僅存在一種雙糖苷,故而‘黑珍珠’可能不是染色葡萄。

    圖2 各類花色苷組成比例Fig. 2 Percentages of different types of anthocyanins

    2.4 ‘黑珍珠’葡萄果實中香氣成分分析

    ‘黑珍珠’葡萄果實中共檢測到123 種香氣化合物,這些香氣化合物根據(jù)化學結(jié)構(gòu)可分為C6/C9類(13 種)、醇類(40 種)、羰基化合物(16 種)、酸類(3 種)、揮發(fā)酚類(5 種)、酯類(5 種)、降異戊二烯類(12 種)、苯類(14 種)、萜烯(13 種)(表5)。

    表5 ‘黑珍珠’葡萄果實中香氣物質(zhì)組成及含量Table 5 Volatile aroma composition of ‘Pearl Noir’ grapes

    續(xù)表5

    續(xù)表5

    揮發(fā)性香氣成分在葡萄風味物質(zhì)中有舉足輕重的地位,種類繁多。這些成分的種類、含量、感覺閾值及相互作用決定著葡萄的風味,同時也決定著所釀葡萄酒的風味和典型性?!谡渲椤咸压麑嵵泄矙z測到93 種游離態(tài)揮發(fā)性香氣化合物,其中C6/C9類是第一大類游離態(tài)香氣化合物,占游離態(tài)揮發(fā)性香氣物質(zhì)總量的66.85%,其中己醛、(E)-2-己烯醛的含量較高,這兩種化合物決定了‘黑珍珠’葡萄果實游離態(tài)C6/C9類香氣物質(zhì)的含量,也對‘黑珍珠’葡萄果實總游離態(tài)揮發(fā)性香氣化合物起決定的作用。C6/C9類化合物能夠提供青草香,對酒的香氣有重要的作用。醇類是第二大類游離態(tài)香氣化合物,占總游離態(tài)揮發(fā)性香氣化合物的15.95%,其中苯乙醇、苯甲醇的含量較高,而酯類、酸類、揮發(fā)酚類以及其他含量低,所占比例在0.049 7%~4.07%之間。

    ‘黑珍珠’葡萄果實中共檢測到81 種結(jié)合態(tài)揮發(fā)性香氣化合物,醇類是最主要的結(jié)合態(tài)香氣化合物,占總結(jié)合態(tài)揮發(fā)性香氣化合物的38.44%,其中苯乙醇、苯甲醇、1-苯乙醇的含量較高,占結(jié)合態(tài)醇類香氣化合物的68.09%,并且醇類的結(jié)合態(tài)香氣化合物多達34 種。羰基化合物是第二大類結(jié)合態(tài)揮發(fā)性化合物,其中3,4-二甲基-苯甲醛、癸醛的含量占羰基化合物的81.75%,而酯類、萜烯的含量低,所占比例在0.49%~0.70%之間。

    由此可以看出,己醛和(E)-2-己烯醛在游離態(tài)的香氣物質(zhì)中含量較高,決定了‘黑珍珠’葡萄青草味濃重,苯甲醇、苯乙醇含量也為葡萄果實提供了花香的氣味。結(jié)合態(tài)香氣物質(zhì)中,苯乙醇和己烯醛含量較高,也賦予葡萄花香和青草味。

    2.5 ‘黑珍珠’的SSR指紋分析

    表6 6 對SSR引物對‘貝達’、‘煙73’、‘Kolor’和‘黑珍珠’的擴增結(jié)果Table 6 Amplification results of ‘Beta’, ‘Yan 73’, ‘Kolor’ and‘Pearl Noir’ with 6 different pairs of SSR primers

    檢索發(fā)現(xiàn),未知親本信息的葡萄新品系‘黑珍珠’的SSR指紋不存在于葡萄標準數(shù)據(jù)庫中(http://www.vitisvea.de/)。比較SSR指紋發(fā)現(xiàn),‘黑珍珠’和‘貝達’在引物VVS2、VVMD7和Vrzag79各有一個等位基因相同,‘黑珍珠’與‘煙73’在引物VVS2和Vrzag79各有一個等位基因相同,‘黑珍珠’與‘Kolor’在引物VVMD7有一個等位基因相同(表6)。雜交后代在每個SSR位點的兩個等位基因一個來自父本,而另一個來自母本[31-34]。因為本實驗用于SSR標記的葡萄品種較少,根據(jù)6 對SSR引物的擴增的結(jié)果尚不能確定‘黑珍珠’的親本信息,其親本信息有待進一步研究。

    3 結(jié) 論

    有研究表明,葡萄花色苷的組成及比例受到許多因素的影響,而遺傳因素是影響葡萄品種花色苷組成的決定性因素,特定的品種花色苷組成穩(wěn)定,決定其品種的顏色[35],而有無花色素雙糖苷是區(qū)別歐亞種葡萄與其他種葡萄的重要特征[36]?!谡渲椤咸压ぷ虾谏ㄉ蘸控S富,且以雙葡萄糖苷為主,占花色苷總量的71.2%,推測其含有非歐亞種葡萄的血緣?!谡渲椤咸严銡饣衔锝M成復雜,這些香氣化合物以游離態(tài)與糖苷結(jié)合態(tài)形式存在,共檢測到123 種揮發(fā)性香氣化合物,主要以游離態(tài)為主。由于供試品種較少,本研究并未找到其親本。因為‘黑珍珠’葡萄果皮花色苷的種類與含量豐富,且單品種酒顏色深,未來可以作為釀造具有地區(qū)特色的紅葡萄酒的新品種或調(diào)色新品種。

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