飼糧中添加辣木梗粉對蛋雛鴨生長、免疫及抗氧化功能的影響

楊汝才 ， 楊勝林 *， 譚 斌 ， 王旭平 ， 周 璇 ， 楊世皓 ， 羅林麗 ， 祝永才

（1.貴州大學動物科學學院，貴州貴陽 550025；2.高原山地動物遺傳育種與繁殖教育部重點實驗室，貴州貴陽 550025）

辣木梗（Moringa oleifera power）與辣木葉及果實等相比雖營養(yǎng)成分含量較低，但其具有生產成本低，蛋白質、粗脂肪、粗纖維含量高等優(yōu)點，閆文龍等（2008）將辣木梗作為添加劑添加到肉雞飼糧中發(fā)現，1%辣木梗粉在一定程度上可以提高肉雞免疫力，促進幼齡雞的生長發(fā)育。張幸怡等 （2017）以辣木梗葉替代基礎飼糧中50%苜蓿，探究其葉對泌乳奶牛生產性能及血漿生化、抗氧化和免疫指標的影響，結果發(fā)現，辣木梗粉可提高奶牛機體抗氧化能力和免疫功能。目前，我國家禽的生產面臨著蛋白質以及飼料資源的高昂價格導致飼料成本增加，以及過度使用抗生素而產生抗原活性降低等問題。因此，尋找廉價、可用且安全的蛋白質和能量的替代來源迫在眉睫。盡管辣木飼料在其他動物上的應用已有較多的報道，但在蛋鴨的應用報道不多。三穗鴨是我國優(yōu)質地方名鴨，開發(fā)新型功能性飼料添加劑并應用于三穗鴨產業(yè)十分必要。本試驗旨在通過在飼糧中添加不同水平的辣木梗粉，研究其對1～28日齡蛋雛鴨生長、免疫及抗氧化功能的影響，以探求蛋雛鴨飼糧中辣木梗粉的適宜添加量，為蛋雛鴨飼養(yǎng)以及辣木的應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 試驗選用健康、平均體重為（41.01±4.51）g的 1日齡三穗蛋雛鴨 135只（公母鴨隨機分配），隨機分成3組（Ⅰ ～Ⅲ組），每組3個重復，每個重復15只鴨。

1.2 試驗飼糧與飼養(yǎng)管理 本試驗所采用基礎飼糧參照 NRC（1998）和臺灣畜牧學會（1993）建議的蛋鴨營養(yǎng)需要配制。Ⅰ組（對照組）飼喂基礎飼糧，Ⅱ、Ⅲ組在基礎飼糧中分別添加20、40 g/kg辣木梗粉。

辣木梗粉（過40目篩）購自昆明樵山記食品有限責任公司，其中有效成分含量為：粗蛋白質12.1%、粗脂肪2.4%、粗纖維29.3%。試驗以粉劑的形式添加。試驗期4周（1～28日齡）。全期自由采食和飲水，保證足夠的光照，且各試驗組其他條件均保持一致，其余管理同蛋鴨常規(guī)飼養(yǎng)管理?；A飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎）

1.3 樣品采集與處理 試驗至第28天，從每個重復中選取健康、接近平均體重的試驗鴨5只，后頸靜脈采血5 mL左右，所采血液靜置后3000～3500 r/min離心15～20 min，收集血清分裝于離心管中，-20℃貯存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 測定指標與方法

1.4.1 生長性能指標的測定 試驗開始前，對每個重復的試鴨進行稱重，記錄初生重。以周為單位，每周稱重1次，次日清晨空腹稱重。詳細記錄每周耗料量和體重，計算平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）、料重比（F/G）。以上測定指標均以重復為單位。

1.4.2 血清蛋白含量及免疫指標的測定 血清總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）含量均采用微量酶標法測定，血清免疫蛋白IgG、IgA、IgM則按照南京建成生物工程研究所的酶聯(lián)分析法（ELISA）進行測定。試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。試驗儀器為PowerWave XS型全波長酶標儀 （Biotek Instruments.Inc.USA）。

1.4.3 血清抗氧化指標的測定 血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPx）活性和丙二醛（MDA）含量均采用PowerWave XS型全波長酶標儀（Bio-tek Instruments.Inc.USA）進行測定，所用試劑盒均購自南京建成生物工程研究所，測定方法參照試劑盒的說明書進行。

1.5 數據處理 試驗數據均采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析 （one-way ANOVA，LSD），用 Duncan’s法進行多重比較，以 P ＜0.05作為差異顯著性判斷標準，統(tǒng)計結果以“平均值±標準誤”表示。

2 結果與分析

2.1 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨生長性能指標的影響 由表2可知，Ⅱ組的ADFI為最高，分別比Ⅰ、Ⅲ組顯著提高8.6%和9.8%（P＜0.05），Ⅰ、Ⅲ組差異不顯著（P ＞ 0.05）；Ⅱ、Ⅲ組的ADG分別比Ⅰ組顯著提高11.8%和18.3%（P＜0.05），Ⅱ、Ⅲ組差異不顯著（P ＞ 0.05）；Ⅲ組的 F/G分別比Ⅰ、Ⅱ組顯著降低16.2%和14.1%（P＜0.05），Ⅰ、Ⅱ組組間差異不顯著（P＞0.05）。

表2 飼糧辣木梗粉水平對蛋雛鴨生長性能的影響

2.2 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨血清蛋白含量及免疫指標的影響 由表3可知，血清TP含量各組間無顯著差異（P＞0.05），但Ⅱ組比Ⅰ組提高15.07%，Ⅲ組比Ⅰ組提高28.21%；Ⅱ、Ⅲ組血清ALB含量比Ⅰ組分別顯著提高39.1%和49.5%（P＜0.05），試驗Ⅱ、Ⅲ組組間差異不顯著（P＞0.05）。

表3 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨血清蛋白含量的影響g/L

由表4可知，血清免疫蛋白IgG、IgA含量各組間差異不顯著（P＞0.05）；Ⅱ組的IgM 含量比Ⅰ組顯著提高了1.6%（P＜0.05），Ⅰ組與Ⅲ組以及Ⅱ組與Ⅲ組組間無顯著差異（P＞0.05）。

表4 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨血清免疫指標的影響 g/L

2.3 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨抗氧化指標的影響 由表5可知，各組間血清SOD、GSH-Px活性差異不顯著（P＞0.05）；Ⅱ組MDA含量比Ⅰ組顯著減少33.16%（P＜0.05），Ⅱ組與Ⅰ組及Ⅱ組與Ⅲ組組間差異不顯著（P＞0.05）。

表5 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨血清抗氧化指標的影響

3 討論

3.1 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨生長性能指標的影響 育雛期的體重在一定程度上可影響動物生長期的體重，因此，如何養(yǎng)好雛鴨是許多自繁殖場普遍關注的問題。作為非常規(guī)飼料的苜蓿草粉在鴨的飼糧中應用效果良好，添加適量的苜蓿草粉在一定程度上可促進育成鴨的生長 （陶曉東，2009）。為保持雛鴨有較高的生長速度和成活率，除使用常規(guī)飼料，添加維生素、礦物質和微量元素外，要根據雛鴨的生理特點，合理使用一些非常規(guī)飼料，可提高雛鴨日增重，改善雛鴨生長性能（宋增廷等，2015）。 閆文龍等（2008）將辣木梗粉添加到肉雞飼糧中，飼料利用率略微提高。為研究辣木莖粉對鵝的飼用價值，李苗苗（2016）將辣木莖粉添加到清遠鵝飼糧中，當添加水平高于8%時，22～70日齡清遠鵝F/G顯著低于對照組。這與本試驗結果基本一致。本試驗結果表明，辣木梗粉添加水平為20 g/kg時可顯著提高蛋雛鴨的ADFI、ADG；辣木梗粉添加水平為40 g/kg時，F/G顯著低于試驗Ⅰ、Ⅱ組（P＜0.05）。這說明飼糧中添加適量的辣木梗粉有助于促進蛋雛鴨的生長。

3.2 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨血清免疫指標的影響 血清TP、ALB含量可反映機體蛋白質的吸收和代謝狀況 （葉林超等，2014；耿光瑞等，2013）。血清TP由肝臟合成，其含量的高低直接反映出動物生長發(fā)育及生理狀態(tài)（車傳燕等，2013；劉慶華等，2012）。TP含量高是蛋白質代謝旺盛的表現，有利于動物生長。血清中ALB的主要功能是維持滲透壓平衡，與機體免疫功能相關 （姜麗麗，2014；李萬佳，2014；解俊美等，2012）。 血清 TP 含量升高可降低飼料消耗，加快體蛋白質的沉積，促進生長，同時還可維持機體的免疫水平（解俊美等，2012）。血清ALB含量升高，說明辣木梗粉能加強肝、腎功能，增強機體對蛋白質的吸收和代謝，提高機體免疫功能（解俊美等，2012；張養(yǎng)東等，2009）。

免疫球蛋白通常也稱為抗體，是機體產生體液免疫的標志（袁藝森，2014；張養(yǎng)東等，2009），廣泛存在動物的血液、組織液、淋巴液等分泌液中，是動物機體抵抗病原微生物重要的物質，是機體體液免疫的主力；作為機體體液免疫功能的重要指標，由于其結構不同分為IgA、IgG、IgM、IgD和IgE五種，但是常規(guī)檢查時只檢查含量高的IgA、IgG、IgM 這三種（袁藝森，2014；張淑云，2011）。 本試驗結果表明，辣木梗粉添加水平可顯著影響血清ALB含量，辣木梗粉添加水平為40 g/kg時血清ALB含量達到最高；辣木梗粉添加水平為20 g/kg時免疫蛋白IgA、IgG、IgM在血清中的含量最高。這說明辣木梗粉對蛋雛鴨免疫系統(tǒng)有一定的調節(jié)作用。

3.3 飼糧辣木梗粉添加水平對蛋雛鴨抗氧化功能的影響 細胞的活力及功能的發(fā)揮部分依賴于其平衡的氧化還原狀態(tài)，當機體內活性氧自由基（ROS）和自由基過量時，便會破壞平衡，導致細胞內的一些大分子物質（DNA、蛋白質、脂質）過度氧化，造成細胞功能退化甚至凋亡（Mbikay，2012）。

抗氧化酶能夠清除自由基，抵御氧化損傷,細胞可通過激活SOD、GSH-Px等酶發(fā)揮自身的內源性保護作用以對抗氧化應激（張幸怡等，2017）。SOD作用于超氧陰離子（O2-），使其轉化為過氧化氫（H2O2）和其他氫過氧化物，從而阻止O2-啟動的自由基連鎖反應（解俊美等，2012；楊芳等，2004）。GSH-Px可以幫助清除H2O2和許多有機氫過氧化物的酶和催化H2O2和還原脂質過氧化物，防止脂質過氧化物對機體生物膜和組織的損傷，并防止脂質過氧化物進一步水解為有害物質丙二醛，從而保護細胞膜結構和功能的完整性（解俊美等，2012；楊芳等，2004）。MDA則是脂質過氧化物代謝的終產物，其高低反映了機體因氧自由基所導致的脂質過氧化、細胞受損程度以及氧自由基代謝狀況（張彩虹等，2009；朱宏娟，2006）。

張幸怡等（2017）研究發(fā)現，飼喂用辣木梗葉替代基礎飼糧中50%苜蓿的試驗飼糧顯著提高了奶牛血漿中總抗氧化能力（T-AOC）以及抑制羥自由基能力 （P＜0.05），顯著降低了血漿中MDA含量（P＜0.05），顯著提高血漿中IgG的含量（P＜0.05）。由此可知，辣木梗粉可提高奶牛機體抗氧化能力和免疫功能（解俊美等，2012）。與本試驗結果基本一致，辣木梗粉對SOD和GSH-Px活性有較強的誘導能力，從而維持了動物體自身自由基的產生和清除的動態(tài)平衡 （解俊美等，2012）。本試驗發(fā)現，血清SOD、GSH-Px活性隨飼糧辣木梗粉添加水平的升高呈先上升后下降的趨勢，MDA含量則呈先下降后上升趨勢。MDA含量下降可能是因為辣木梗葉中含有抗氧化劑，可減少因脂質過氧化作用所造成的損傷，抑制ROS和自由基的形成 （張幸怡等，2017；Allam等，2016；Ogbe等，2011）。

綜上結果表明，飼糧中適量添加辣木梗粉可提高蛋雛鴨機體SOD和GSH-Px活性，增強其抗氧化功能。

4 結論

飼糧中添加適量的辣木梗粉能夠提高1～28日齡蛋雛鴨機體的生長、免疫及抗氧化功能。綜合考慮各指標，辣木梗粉在蛋雛鴨飼糧中的適宜添加量為20 g/kg。