陳淑君
摘 要:吲哚丁酸(IBA)是植物體內(nèi)天然存在的一種生長素,為提高草莓組培苗的生根率和生根質(zhì)量,本試驗探討了IBA不同濃度對草莓組培苗生根過程的影響,從而篩選出有利于草莓生根的濃度。本試驗以草莓佐賀清香的組培苗為材料,采用MS基本培養(yǎng)基分別與不同濃度的IBA(0.0 mg/L、0.02 mg/L、0.04 mg/L)配組為生根培養(yǎng)基。結(jié)果表明,在草莓組培苗的生根過程中,IBA對苗的生根量有促進(jìn)作用,同時它又抑制根長的生長,使組培苗的根短而整齊,試驗中0.04 mg/L IBA對草莓苗的生根效率最高。
關(guān)鍵詞: 草莓;組織培養(yǎng);IBA;生根
草莓(Fragaia ananassa Duchesne),薔薇科(Rosaceae),草莓屬(Fragaria)。廣東省地處亞熱帶地區(qū),冬春氣候非常有利于淺休眠草莓品種生長,可露地栽培,與北方的大棚保溫栽培相比,既節(jié)約了成本又降低了病蟲害的發(fā)生,而且可以和水稻、玉米、秋菜等輪作、間作、套種,產(chǎn)量高,經(jīng)濟(jì)效益顯著,栽培草莓有獨特優(yōu)勢。目前,在很多地區(qū),主要靠匍匐莖進(jìn)行無性繁殖,導(dǎo)致體內(nèi)病毒積累逐年增加,病毒病發(fā)生嚴(yán)重,感染了病毒的草莓生長緩慢、葉皺縮、果子變小、畸形、品質(zhì)差,一般減產(chǎn)30%~80%,并逐年加重,目前最好的防治措施是使用脫毒苗。利用草莓微莖尖( 0.2~0.5 mm) 脫毒結(jié)合組織培養(yǎng)快繁技術(shù)培育出的草莓組培苗,可部分或全部脫除病毒,使品種的優(yōu)良性狀得以保持,產(chǎn)量提高。組織培養(yǎng)繁殖的優(yōu)勢在于繁殖速度快,占地少,更主要的是可進(jìn)行脫去病毒處理。本試驗用MS基本培養(yǎng)基,添加不同濃度的IBA(0.0 mg/L、0.02 mg/L、0.04 mg/L)配組為生根培養(yǎng)基,研究IBA濃度對草莓組培苗生根的影響,篩選合適的生根培養(yǎng)基,為草莓苗大規(guī)模生產(chǎn)奠定技術(shù)基礎(chǔ)。
一、材料和方法
1.試驗設(shè)計
選取佐賀清香的組培苗為試材,采用MS基本培養(yǎng)基,添加不同濃度的IBA。組培苗隨機(jī)從草莓叢芽擴(kuò)繁培養(yǎng)瓶內(nèi)選取,株高2.5 ~3.5 cm。
取生長相似且生長健壯的佐賀清香組培苗接種于誘導(dǎo)根生長的培養(yǎng)基(MS + 蔗糖30 g/L + 卡拉粉8 g/L,PH=5.8)上,共設(shè)3個處理(A:IBA 0.02 mg/L,B:IBA 0.04 mg/L,CK:不加IBA),其中不加IBA的作為對照處理,每個處理做三個重復(fù),每個重復(fù)有30個單株。
2.培養(yǎng)過程
取出叢芽培養(yǎng)基中組培苗,取苗過程中要除去培養(yǎng)苗上殘留的培養(yǎng)基基質(zhì)。將組培苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基,一瓶生根培養(yǎng)瓶內(nèi)轉(zhuǎn)入5株單苗(苗的大小基本相同),把培養(yǎng)瓶置于光照培養(yǎng)箱中,并放入培養(yǎng)室培養(yǎng),光照度2000~2500 Lux,每天光照15小時,溫度均控制在20~22 ℃。20天后,隨機(jī)在每類培養(yǎng)基中抽取組培苗18瓶,觀察它們的根數(shù)、根長。觀察完后,繼續(xù)進(jìn)行生根培養(yǎng)。在生根培養(yǎng)過程中,每三天觀察一次,當(dāng)每株組培苗生根數(shù)為4~6條、根長1.0~2.0 cm,即達(dá)到煉苗標(biāo)準(zhǔn),記錄每株組培苗長的天數(shù)。
試驗數(shù)據(jù)用Excel 2003軟件進(jìn)行分析。部分?jǐn)?shù)據(jù)用DPS數(shù)據(jù)分析軟件進(jìn)行方差分析處理。 按以下公式進(jìn)行計算:
生根率=
達(dá)標(biāo)率=
二、 結(jié)果與分析
1.IBA濃度對組培苗生根的影響
將試驗材料置于室內(nèi)培養(yǎng)20天后觀察,統(tǒng)計得到結(jié)果如表1。在附加不同濃度IBA的生根培養(yǎng)基上,組培苗的生根率均達(dá)100 % ,各處理組之間無明顯差異,但在根生長量和根長度有一定程度的差異。根據(jù)表1,可以看出隨著IBA濃度的升高,平均根數(shù)有一定量的增加,而根長卻明顯減少,如果要了解不同處理組之間的顯著性差異,需要對各個處理的數(shù)據(jù)進(jìn)行更進(jìn)一步的處理。
2.分析IBA的不同濃度對根數(shù)的影響
根據(jù)圖1可以看出各個處理之間根數(shù)存在差異,各處理不同重復(fù)間也存在差異,對圖1數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析,得到表2。根據(jù)處理組根數(shù)均值與方差表可知,在生根培養(yǎng)基內(nèi)加IBA有助于草莓組培苗根數(shù)生長,并且在一定濃度范圍內(nèi),IBA濃度越高,對促進(jìn)苗根數(shù)增長的效果就越明顯。在本試驗中,IBA濃度為0.04 mg/L對根數(shù)的效果最佳。
3.分析IBA的不同濃度對根長的影響
生長調(diào)節(jié)劑配比會影響草莓植株再生的根芽比。IBA在植物的組織培養(yǎng)中普遍用來促進(jìn)組培苗根長的生長。根據(jù)圖2可知,加入IBA處理組的根長比對照組短,不同處理組存在差異,并對圖2的數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析,得到表3。根據(jù)各處理根長均值與方差分析可得,在生根培養(yǎng)基內(nèi)加IBA明顯抑制草莓組培苗根系根長的生長,但I(xiàn)BA濃度為0.02 mg/L與0.04 mg/L對草莓組培苗根長的抑制效果差異不大。
4.IBA濃度對組培苗在培養(yǎng)基中所需時間的影響
根據(jù)圖3、圖4可知,生根培養(yǎng)基未加入IBA時,草莓組培苗在培養(yǎng)瓶內(nèi)也可正常生長,在30天內(nèi),隨著天數(shù)的增加,達(dá)標(biāo)速率也呈上升的趨勢,30天后,還有27株組培苗未達(dá)到煉苗標(biāo)準(zhǔn);生根培養(yǎng)基加入0.02 mg/L的IBA時,草莓組培苗多集中于16天至20天中滿足標(biāo)準(zhǔn),在20天后草莓苗也逐漸到達(dá)標(biāo)準(zhǔn)。30天后,有25株組培苗未達(dá)到煉苗標(biāo)準(zhǔn);生根培養(yǎng)基加入0.04 mg/L的IBA時,草莓組培苗的達(dá)標(biāo)率是最高的,并且多集中于16天至25天到達(dá)煉苗的標(biāo)準(zhǔn),組培苗根系滿足要求的時間較集中。30天后,只剩10株組培苗未達(dá)到煉苗標(biāo)準(zhǔn)。
三、 結(jié)論與討論
1.結(jié)論
本研究表明,IBA激素對草莓組培苗根系生長有一定影響。在草莓組培苗的生根過程中,IBA的添加提高了苗的生根量,抑制根長的生長,使根的數(shù)量與長度生長更同步,同時組培苗根系整齊、細(xì)短,對草莓脫毒苗的生根和達(dá)到移栽的標(biāo)準(zhǔn)有促進(jìn)作用。試驗時,在加入0.04 mg/L IBA處理組中,組培苗生長狀況較統(tǒng)一,根長基本處于1.2 ~1.8 cm間,達(dá)到煉苗標(biāo)準(zhǔn)需要時間多集中于16天至25天,達(dá)標(biāo)率最高,采用此濃度最佳。
2.討論
在試驗過程中,草莓的組培快繁中不同生長調(diào)節(jié)劑的配比對草莓生根的重要影響。通過觀察,IBA培養(yǎng)的組培苗根形態(tài)較細(xì),愈傷組織的發(fā)生也較少。與王穎相同,得出IBA促進(jìn)根生長,根莖之間無大量的愈傷組織過渡,在移栽時,不定根不易脫落的結(jié)論;張年忠、艾勇等等也用不同的生長調(diào)節(jié)劑組合、配比,結(jié)論有所不同,但都取得了較好的結(jié)果,表明在草莓的組培快繁工作中,要根據(jù)品種及外植體的部位,采用不同的激素種類和配比,不能盲目套用。本試驗只能大致了解IBA對草莓組培苗生根有顯著影響,以及該品種最適合的IBA濃度,還可以嘗試與其他生長激素配組,觀察效果是否會更好,以便培育出成活率高、生長質(zhì)量好的無毒草莓苗。
參考文獻(xiàn):
[1]關(guān)榮智.脫毒草莓組培苗的培育方法與生產(chǎn)技術(shù)研究.農(nóng)業(yè)與技術(shù),2015(24).
[2]王穎.草莓脫毒試管苗生根培養(yǎng)試驗.黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué),2008(5):12~13.
[3]張連忠,李文金等.四季草莓的組織培養(yǎng)與快速繁殖.植物生理通訊,2002(1):55.
[4]艾勇,趙佐敏,唐紅.草莓組織培養(yǎng)及產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用初步研究.種子,2002(5):56~58.