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      IgA腎病患者間質(zhì)病變與T淋巴細胞亞群表達的動態(tài)分析

      2019-04-24 02:05:56顏兵雪劉永梅
      系統(tǒng)醫(yī)學(xué) 2019年4期
      關(guān)鍵詞:小管亞群病程

      顏兵雪,劉永梅

      安徽醫(yī)科大學(xué)附屬巢湖醫(yī)院腎臟內(nèi)科,安徽巢湖 238000

      IgA腎病是全世界范圍內(nèi)最常見的慢性腎小球腎炎。約占原發(fā)性腎小球腎炎的40%~50%[1]。診斷依賴于腎穿刺活檢,病理特征也呈現(xiàn)多種形式。以往IgA腎病的缺乏統(tǒng)一的分級,牛津分型[2]解決了病理指標(biāo)可重復(fù)性的問題,包括:系膜增殖積分(M)、毛細血管內(nèi)細胞增生性病變(E)、節(jié)段性腎小球硬化或球囊粘連(S)、間質(zhì)纖維化或小管萎縮(T),從2009年至今,有眾多研究表明新月體(C)是一種有效的預(yù)后因素,與腎功能衰竭的進展有關(guān),因此可以納入新的牛津分類法[3]。

      該研究2014年1月—2018年5月在該院確診的110例的IgA腎病患者伴有不同程度間質(zhì)纖維化或小管萎縮,分析其外周血T淋巴細胞亞群的變化情況,以提高我們對疾病的診斷、治療及預(yù)后認識。

      1 資料與方法

      1.1 一般資料

      入組病例來源于在該院接受腎活檢確診為IgA腎病的110例患者。均在B超引導(dǎo)下穿刺,要求穿出的腎組織>10 mm。用于光鏡和免疫組化檢查的標(biāo)本固定于4%的中性甲醛固定液中,供電鏡檢查的標(biāo)本用3%的戊二醛溶液固定后置于4%的冰壺中保存,并盡快送檢,24 h內(nèi)檢查為宜。需排除繼發(fā)性腎損害,如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、過敏性紫癜、乙型肝炎、肝硬化、實體腫瘤性腎病、血液系統(tǒng)疾病等引起的繼發(fā)性腎損害。所有入組的病例排除急性感染且在3個月內(nèi)未用過激素及免疫抑制劑。根據(jù)牛津分型間質(zhì)纖維化或小管萎縮面積分為T0、T1、T2 3組,其中T0組56例,其中男性26例,女性30例,年齡在24~48歲,平均年齡在(29.4±5.3)歲,病程 2d~3.5 年,平均病程(1.4±0.5)年。T1組36例,其中男性16例,女性20例,年齡在27~75 歲,平均年齡在(42.9±7.3)歲,病程 0.5~4 年,平均病程(2.1±0.3)年。T2組18例,其中男性10例,女性 8 例,年齡在 27~67 歲,平均年齡(39.8±8.2)歲,病程 1.2~3.8 年,平均病程(2.7±0.5)年。3 組人員的性別、年齡、病程等差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。受試者均獲得知情同意,并經(jīng)過倫理委員會批準。

      1.2 觀察指標(biāo)

      統(tǒng)計該研究中患者的年齡、性別等一般資料。采用美國BD FACSCanto II流式細胞儀,該實驗均使用BD公司的配套試劑。抽取患者清晨靜脈全血2~3 mL,并用肝素抗凝,取病人全血 50 μL,加抗體 10 μL,混勻,避光 15 min,加入 1∶10稀釋的溶血劑 1 mL,混勻,避光 10 min,然后 5 min后1 500 r/min離心,棄去上清液,加入1 mL PBS后,1 500 r/min離心,棄去上清液,再加入300 μL 1%多聚甲醛固定,在24 h內(nèi)上機,利用FACS MMCTISET軟件檢測并自動分析淋巴細胞亞群的百分比。對比觀察不同間質(zhì)病變的IgA腎病患者的CD4+、CD8+T淋巴細胞百分比,以及CD4+/CD8+的變化情況。

      1.3 統(tǒng)計方法

      使用SPSS 16.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料用(±s)表示,兩組間比較采t檢驗。多組間的比較采用One-Way ANOVA方差分析,若差異有顯著性,兩組間再用SNK-q進行分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

      2 結(jié)果

      根據(jù)牛津分型不同間質(zhì)纖維化或小管萎縮面積分為 T0、T1、T2 組 (T0:0%~25%,T1:26%~50%,T2>50%)。CD4+、CD8+以及 CD4+/CD8+的 Lewene檢驗均顯示 (P>0.05)。 CD4+/CD8+在 T0、T1 組,T1、T2 組,T0、T2組之間均差異有統(tǒng)計學(xué)意義。并隨著間質(zhì)病變的加重而動態(tài)變化。見表1。

      表1 不同間質(zhì)纖維化或小管萎縮(T)面積的T淋巴細胞亞群的比較(±s)

      表1 不同間質(zhì)纖維化或小管萎縮(T)面積的T淋巴細胞亞群的比較(±s)

      組別 CD4+(%) CD8+(%) CD4+/CD8+T0(n=56)T1(n=36)T2(n=18)F值P值36.52±5.46 39.31±5.05 42.08±5.97 8.005 0.001 23.96±2.24 23.38±2.12 22.71±1.70 2.591 0.080 1.53±0.25 1.70±0.30 1.86±0.32 10.646 0.000

      3 討論

      研究證實IgA腎病是自身免疫性疾病,血清多聚IgAl(pIgAl)的增多及糖基化的結(jié)構(gòu)缺陷是導(dǎo)致IgA腎病發(fā)生發(fā)展的重要因素[4]。輔助性T細胞主要表面標(biāo)志是CD4,具有協(xié)助細胞免疫和體液免疫的功效,細胞毒性T細胞主要表面標(biāo)志是CD8,可特異性殺傷靶細胞,機體免疫系統(tǒng)平衡的維持靠兩大細胞亞群相互作用,產(chǎn)生相對平衡的免疫應(yīng)答[5]。T淋巴細胞亞群是臨床上最常用的反應(yīng)免疫狀態(tài)的臨床指標(biāo),CD4+、CD8+,以及CD4+/CD8+的異常,提示免疫功能的異常。CD4+T細胞可調(diào)節(jié)抗體的產(chǎn)生,包括IgA,推測系統(tǒng)性歸巢CD4+T可能直接導(dǎo)致IgA腎病中pIgA的產(chǎn)生[6]。CD8+T細胞的細胞毒作用,再加上活化巨噬細胞的細胞毒反應(yīng),可能導(dǎo)致加速腎小球和間質(zhì)的損傷。

      研究表明淋巴細胞數(shù)量和類型影響IgA腎病的間質(zhì)纖維化和小管萎縮的進展。國內(nèi)葉寒青等人[7]研究82例IgA腎病有間質(zhì)纖維化和小管萎縮改變者的CD4+/CD8+(1.84±0.82) 明顯高于 健 康對照組的(1.36±0.40)。該實驗的研究表明IgA腎病小管萎縮或間質(zhì)纖維化越嚴重的患者CD4+/CD8+值越高,與其基本相符。楊森等[8]報道IgA腎病患者有較高的CD4+絕對值和較低或無明顯變化的CD8+絕對值。弓玉祥等人[9]研究腎間質(zhì)中淋巴細胞的浸潤情況,結(jié)果表明在高倍鏡下T1、T2、T3組的CD4+細胞數(shù)分別為(10.28±8.01)%、(25.33±2.82)%、(38.01±8.65)%,CD8+細胞數(shù)分別為 (11.62±6.07)%、(25.78±7.82)%、(72.60±16.08)%,T1和 T2組的 CD4+、CD8+細胞數(shù)高于 T0組,T2組的CD4+、CD8+細胞數(shù)又高于T0組,該研究是外周血中的淋巴細胞表達情況,該研究3組之間CD4+%的均值不全相等,T1和T2組的CD4+高于T0組,但T1、T2組的CD4+差異無統(tǒng)計學(xué)意義。3組之間的CD8+無統(tǒng)計學(xué)意義。與二人研究結(jié)果有區(qū)別。眾多研究表明IgA腎病牛津分型中小管萎縮或間質(zhì)纖維化對腎臟不良預(yù)后具有獨立的檢測價值[10]。IgA腎病患者T淋巴細胞計數(shù)在不同程度的間質(zhì)纖維化或小管萎縮呈現(xiàn)動態(tài)變化,且這種變化跟疾病嚴重程度有關(guān)。隨著間質(zhì)纖維化或小管萎縮面積的增大,發(fā)生終點事件的概率逐漸增高。國外已有研究證實IgA腎病的發(fā)病與主要組織相容性復(fù)合體有關(guān)(MHC),Kurtulus等[11]報道,CD4+細胞可能通過識別腎小管上皮細胞上的MHCⅡ類抗原釋放細胞因子IFN-γ、TNF-β、IL-3、TGF-β導(dǎo)致間質(zhì)纖維化,從而影響IgA腎病的進展。Meng XM等[12]指出抑制TGF-β1/Smad信號通路,可以防止或減慢慢性腎臟病的纖維化。幾乎所有的免疫細胞類型:調(diào)節(jié)性T細胞、B淋巴細胞和Th細胞參與了這一過程,和受損的內(nèi)源性腎細胞一起,釋放各種細胞因子,如TGF-β1,是導(dǎo)致腎纖維化的核心驅(qū)動力[13]。

      未來若能找到調(diào)節(jié)和干預(yù)IgA抗體產(chǎn)生的方法,以及阻斷或延緩間質(zhì)纖維化或小管萎縮的途徑,將降低IgA腎病患者或延緩終末期腎病發(fā)生的概率。

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