基質(zhì)金屬蛋白酶11在子宮內(nèi)膜樣癌中的表達(dá)及意義

(大同市第三人民醫(yī)院，山西 大同 037000)

子宮內(nèi)膜癌是女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一，分為兩種類型，即雌激素依賴型(子宮內(nèi)膜樣癌，I型)和非雌激素依賴型(非子宮內(nèi)膜樣癌，II型)[1]。子宮內(nèi)膜樣癌占子宮內(nèi)膜癌的大多數(shù)，好發(fā)于年輕女性，多為高分化的腺癌，發(fā)病早，5年生存率一般都在80%及以上，但是仍有25．0%的患者在隨診過程中復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移[2]?；|(zhì)金屬蛋白酶11(matrix metalloproteinase 11，MMP11)是基質(zhì)金屬蛋白酶家族中的一員，能降解細(xì)胞外基質(zhì)成分，在增強(qiáng)腫瘤血管生成、細(xì)胞遷移、增殖、凋亡和結(jié)締組織退化等方面起著重要作用[3]。本研究采用免疫組化法檢測MMP11在子宮內(nèi)膜樣癌組織中的表達(dá)，并分析其與臨床病理特征及預(yù)后指標(biāo)間(ER、PR、ki-67、2年內(nèi)復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移/死亡)間的關(guān)系，揭示MMP11過表達(dá)對子宮內(nèi)膜樣癌預(yù)后判斷的指導(dǎo)意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年1月～2016年月6在大同市第三人民醫(yī)院手術(shù)后存檔且臨床病理資料完整的石蠟包埋組織標(biāo)本子宮內(nèi)膜樣癌128例，年齡44～76歲，平均59歲；取子宮內(nèi)膜簡單型增生40例、復(fù)雜型增生45例、非典型增生64例，年齡36～62歲，平均54歲；取因?qū)m頸病變或子宮平滑肌瘤切除子宮而無其他婦科腫瘤性疾病的正常增殖期內(nèi)膜石蠟包埋組織標(biāo)本35例為對照組，年齡38～56歲，平均46歲。所有患者術(shù)前均未行激素及放、化療等治療。子宮內(nèi)膜癌手術(shù)病理分型見表1。

1.2 方法

免疫組織化學(xué)En Vision法 將蠟塊標(biāo)本切成4μm厚，經(jīng)二甲苯脫蠟，梯度乙醇脫水，3%H2O2去除內(nèi)源性酶，高壓處理熱修復(fù)抗原，加一抗(兔單克隆抗體MMP11，ER，PR，ki-67，北京中杉金橋)后4℃過夜，PBS沖洗后滴加二抗，室溫條件下DAB顯色，中性樹膠封片。PBS液做陰性對照。

1.3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

MMP11在腫瘤細(xì)胞和腫瘤周圍間質(zhì)中均有表達(dá)，陽性部位均定于細(xì)胞漿，ER、PR、ki-67陽性部位定于細(xì)胞核[4]。MMP11根據(jù)染色程度和染色細(xì)胞百分率進(jìn)行組織學(xué)評分：深棕黃色為3分，棕黃色為2分，淡棕黃色為1分，細(xì)胞基本不著色為0分；陽性細(xì)胞率≥51%為3分、26%～50%為2分、6%～25%為1分、≤5%為0分。陽性細(xì)胞率評分與每張切片著色程度的乘積為最后得分：0～1分為陰性(-)，2～3分為弱陽性(+)，4～6分為陽性(++)，6分以上為強(qiáng)陽性(+++)；ER、PR、ki-67細(xì)胞出現(xiàn)棕黃色顆粒且范圍≥10%計(jì)為陽性，范圍<10%計(jì)為陰性。 在雙盲條件下，每張切片由2名病理醫(yī)師分別計(jì)數(shù)并進(jìn)行結(jié)果判斷。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。 采用χ2檢驗(yàn)、Spearman秩和檢驗(yàn)等方法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 MMP11在各種病變組織中的表達(dá)

MMP11蛋白在子宮內(nèi)膜樣癌組織中陽性率71.09%(91/128)、在子宮內(nèi)膜不典型增生組織中的陽性率65.62%(42/64)均高于正常增殖期子宮內(nèi)膜11.43%(4/35)、子宮內(nèi)膜簡單型增生20.00%(8/40)、子宮內(nèi)膜復(fù)雜型增生31.11%(14/45)及子宮內(nèi)膜不典型增生65.63%(42/62)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；其他各組兩兩之間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見圖1。

2.2 MMP11與子宮內(nèi)膜樣癌患者臨床病理特征的關(guān)系(見表1)

2.3 MMP11與子宮內(nèi)膜樣癌臨床預(yù)后指標(biāo)的相關(guān)性

免疫組化結(jié)果顯示，MMP11高表達(dá)的子宮內(nèi)膜樣癌組織中，ki-67的表達(dá)也相對較高(見圖2)。Spearman相關(guān)性分析結(jié)果表明在子宮內(nèi)膜樣癌中MMP11與ki-67的表達(dá)顯著呈正相關(guān)(r=0.21，P=0.02)，MMP11的表達(dá)與2年內(nèi)復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移/死亡呈正相關(guān)(r=0.19，P=0.03)，而MMP11的表達(dá)與ER、PR的表達(dá)無明顯相關(guān)性，但29例ER陰性的子宮內(nèi)膜樣癌中24例MMP11均呈高表達(dá)82.76%，34例PR陰性的子宮內(nèi)膜樣癌中26例MMP11均呈高表達(dá)76.47%。見圖3，表2。

圖1 A：子宮內(nèi)膜樣癌 HE ×100； B：MMP11在子宮內(nèi)膜樣癌表達(dá)陽性，En vision法 ×100；

圖2 A：ki-67在子宮內(nèi)膜樣癌中的表達(dá)，En vision法 ×100； B：同一病例MMP11在子宮內(nèi)膜樣癌表達(dá)陽性，En vision法 ×100；

圖3 A：ER在子宮內(nèi)膜樣癌中的表達(dá)陰性，En vision法 ×100； B：同一病例MMP11在子宮內(nèi)膜樣癌表達(dá)陽性，En vision法 ×100；

臨床病理特征例數(shù)MMP11陰性陽性P值年齡≤60歲701852>60歲5819390.38腫瘤最大徑≤2.5 cm682444>2.5 cm6013470.09FIGO分期(浸潤肌層<1/2)(浸潤肌層≥1/2)Ⅰa682840Ⅰb34727Ⅱ16214Ⅲa100100.01組織分級G1281216G2742054G3265210.14盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無823052有467390.01血管侵犯無742846有549450.01

表2 MMP11與ER表達(dá)的相關(guān)性

3 討論

一些研究表明MMP-11在某些早期腫瘤發(fā)生中起著重要作用，提示其可能成為一種新的癌癥早期生物標(biāo)志物[5，6]。但MMP11在子宮內(nèi)膜樣癌中的表達(dá)研究較少，本研究顯示，MMP11蛋白在子宮內(nèi)膜樣癌及子宮內(nèi)膜不典型增生組織中的陽性率均高于正常增殖期子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜簡單型增生、子宮內(nèi)膜復(fù)雜型增生組織中的陽性率，提示MMP11可能成為預(yù)測子宮內(nèi)膜癌前病變的一個(gè)重要標(biāo)志物。

本研究顯示，MMP11蛋白陽性率隨著患者FIGO分期的升高而升高，與盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及血管侵犯顯著相關(guān)；這提示MMP11可能參與子宮內(nèi)膜樣癌的發(fā)生、轉(zhuǎn)移。MMP11高表達(dá)的子宮內(nèi)膜樣癌組織中，ki-67的表達(dá)也相對較高，MMP11的表達(dá)與2年內(nèi)復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移/死亡相關(guān)，而MMP11的表達(dá)與ER、PR的表達(dá)雖然無統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性(P>0.05)，但29例ER陰性的子宮內(nèi)膜樣癌中24例MMP11均呈高表達(dá)82.76%，34例PR陰性的子宮內(nèi)膜樣癌中26例MMP11均呈高表達(dá)76.47%，提示MMP11可作為預(yù)測子宮內(nèi)膜癌的預(yù)后的分子標(biāo)志物。