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    血清和胎盤組織TSP-1、Endoglin表達與早發(fā)型子癇前期血管生成的相關(guān)性

    2019-03-26 07:14:38,,,
    中國婦幼健康研究 2019年2期
    關(guān)鍵詞:發(fā)型微血管子癇

    ,,,

    (1.金華市中心醫(yī)院產(chǎn)科,浙江 金華 321000;2.金華市中心醫(yī)院金西院區(qū),浙江 金華 321075)

    妊娠期高血壓疾病是妊娠期特發(fā)疾病,常表現(xiàn)為妊娠20周后出現(xiàn)高血壓、蛋白尿等癥狀,對患者器官造成諸多負(fù)面影響,包括胎盤早剝、肺水腫、子癇、心衰的發(fā)病風(fēng)險顯著增加,嚴(yán)重時可能威脅孕產(chǎn)婦生命安全[1-2]。目前子癇前期依據(jù)妊娠時間不同分為早發(fā)型子癇前期和晚發(fā)型子癇前期,其中早發(fā)型子癇前期患者病情相對較為嚴(yán)重,且并發(fā)癥較多、更難控制,孕產(chǎn)婦及胎嬰兒結(jié)局不良率升高[3]。血小板反應(yīng)蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)是內(nèi)皮血管分泌的內(nèi)源性血管生成抑制因子,其可與CD36結(jié)合,誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡,抑制新血管形成[4]。Endoglin是轉(zhuǎn)化生長因子(transforming growth factor,TGF-β1)受體復(fù)合物成分之一,在新生血管內(nèi)皮細(xì)胞、新愈合傷口及腫瘤生長迅速邊緣均呈現(xiàn)明顯高表達,且在巨噬細(xì)胞、合體滋養(yǎng)層細(xì)胞中也呈現(xiàn)高表達狀況,有效調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞增殖[5]。但早發(fā)型子癇前期血管生成及不良結(jié)局與TSP-1、Endoglin關(guān)系仍鮮有報道,因而筆者對我院收治的早發(fā)型子癇前期患者作為研究對象,分析妊娠期血清及胎盤組織TSP-1、Endoglin表達與早發(fā)型子癇前期血管生成及不良結(jié)局的相關(guān)性。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    選取2016年1月至2017年1月間金華市中心醫(yī)院收治的60例早發(fā)型子癇前期患者作為研究組,同期選取30例健康產(chǎn)檢孕婦作為對照組,輕度早發(fā)型子癇前期(A組)共30例,年齡(28.48±3.28)歲,孕周(30.83±1.32)周,收縮壓(151.38±3.89)mmHg,舒張壓(101.83±3.58)mmHg,重度早發(fā)型子癇前期(B組)共30例,年齡(28.51±3.31)歲,孕周(30.73±1.35)周,收縮壓(162.41±3.92)mmHg,舒張壓(109.94±3.57)mmHg,對照組年齡(28.63±3.41)歲,孕周(30.39±1.41)周,收縮壓(131.34±3.35)mmHg,舒張壓(84.75±3.29)mmHg,各組受試者年齡、孕周差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05),該研究經(jīng)本院倫理委員會批準(zhǔn)并獲得患者的知情同意。

    1.2入組及排除標(biāo)準(zhǔn)

    入組標(biāo)準(zhǔn):①患者符合《產(chǎn)科學(xué)》中早發(fā)型子癇前期診斷標(biāo)準(zhǔn)[6];②均為初產(chǎn)、單胎;③入組前均未接受任何治療;④患者均以剖宮產(chǎn)終止妊娠。排除標(biāo)準(zhǔn):①既往有糖尿病、高血壓、甲狀腺功能亢進;②有酗酒、吸煙、藥物或毒品濫用史;③有結(jié)核、肝炎等慢性傳染性疾??;④心、肝、腎等臟器功能異常。

    1.3 方法

    本組研究中所有受試者均在入組后采集空腹靜脈血5mL,后采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血中TSP-1、Endoglin水平。研究對象分娩時取胎盤,并在胎盤中心母體面避開梗塞和鈣化區(qū)取全層胎盤組織,使用生理鹽水沖洗并采用10%福爾馬林溶液固定。采用免疫組化SP法檢測A組、B組及對照組胎盤組織中TSP-1及Endoglin水平,并采用CD34雙標(biāo)法記錄胎盤中微血管密度,所用試劑盒購買自聯(lián)科生物科技有限公司,所有操作均嚴(yán)格遵照試劑盒說明書進行操作。

    采用SP法行免疫組化檢測結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)如下:細(xì)胞染色強度分4級,分別記為0分、1分、2分、3分,0分:無著色;1分:染色呈淺黃色;2分:染色呈棕黃色;3分:染色呈棕褐色。依照陽性細(xì)胞數(shù)進行評分,記為陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù),包括0分、1分、2分、3分、4分,其中未染色記為0分;陽性細(xì)胞數(shù)<25%記為1分;陽性細(xì)胞數(shù)在25%~50%記為2分;陽性細(xì)胞數(shù)在51%~75%記為3分,陽性細(xì)胞數(shù)>75%記為4分,染色強度與陽性細(xì)胞數(shù)評分乘積記為免疫組化評分,分為強陽性、陽性、弱陽性和陰性,其中6~8分記為強陽性;4~5分記為陽性;3~2分記為強陽性;0~1分記為陰性。陽性率=(強陽性+陽性+弱陽性)/總例數(shù)×100.00%。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

    使用SPSS 19.0行統(tǒng)計學(xué)分析,計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(χ±S)的形式表示,多組間比較采用方差分析,兩組間比較采用獨立樣本t檢驗。計數(shù)資料采用例數(shù)(百分比)的形式表示,組間比較應(yīng)用χ2檢驗。各因素關(guān)系采用Spearman相關(guān)分析,以P<0.05時表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2結(jié)果

    2.1三組孕婦血清中TSP-1及Endoglin水平比較

    三組孕婦血清TSP-1、Endoglin水平比較均有顯著性差異(均P<0.05),B組最高,對照組最低。進一步每兩組間比較后發(fā)現(xiàn),B組血清TSP-1、Endoglin水平均顯著高于A組和對照組(t值分別為2.346、3.758、2.780、3.995,均P<0.05),A組上述指標(biāo)顯著高于對照組(t值分別為2.258、2.863,均P<0.05),見表1。

    表1三組血清中TSP-1及Endoglin水平比較(χ±S)

    Table 1 Comparison of serum TSP-1 and Endoglin levels

    among three groups(χ±S)

    2.2三組孕婦胎盤組織中TSP-1及Endoglin表達比較

    三組孕婦胎盤組織中TSP-1、Endoglin表達比較有顯著性差異(均P<0.05),B組最高,對照組最低。進一步每兩組間比較后發(fā)現(xiàn),B組孕婦胎盤組織中TSP-1及Endoglin表達均顯著高于A組和對照組(χ2值分別為5.079、24.093、2.588、31.093,均P<0.05),A組上述指標(biāo)顯著高于對照組(χ2值分別為8.531、17.143,均P<0.05),見表2。

    表2三組孕婦胎盤組織中TSP-1及Endoglin表達比較[n(%)]

    Table 2 Comparison of expressions of TSP-1 and Endoglin in placental tissues among three groups[n(%)]

    指標(biāo)對照組(n=30)A組(n=30)B組(n=30)χ2PTSP-1 強陽性(n)135 陽性(n)21014 弱陽性(n)346 陰性(n)24135 總陽性6(20.00)17(56.67)25(83.33)24.3750.000Endoglin 強陽性(n)059 陽性(n)3914 弱陽性(n)5106 陰性(n)2261 總陽性8(26.67)19(63.33)29(96.67)36.7330.000

    2.3三組孕婦胎盤組織微血管密度計數(shù)結(jié)果比較

    三組孕婦胎盤組織微血管密度計數(shù)有顯著性差異(P<0.05),B組最低,對照組最高。進一步每兩組間比較后發(fā)現(xiàn),B組顯著低于A組和對照組(t值分別為2.547、4.765,均P<0.05),A組顯著低于對照組(t=3.558,P<0.05),見表3。

    2.4 TSP-1及Endoglin相關(guān)性分析

    A組及B組患者血清中、胎盤中TSP-1與Endoglin呈顯著正相關(guān)(均P<0.05),但對照組血清中及胎盤中TSP-1與Endoglin無顯著相關(guān)性(均P>0.05),見表4。

    表3三組孕婦胎盤組織微血管密度計數(shù)結(jié)果比較(χ±S)

    Table 3 Comparison of microvascular density count results in placental tissues among three groups(χ±S)

    組別例數(shù)(n)微血管密度對照組3090.21±4.23A組3037.84±2.18B組3020.38±2.48F5.326P0.013

    表4 TSP-1及Endoglin相關(guān)性分析

    Table 4 Correlation analysis of TSP-1 and Endoglin

    樣本源A組B組對照組血清r0.6410.9340.243P0.0470.0000.649胎盤r0.7250.9780.195P0.0380.0000.715

    2.5 TSP-1、Endoglin與微血管密度計數(shù)相關(guān)性分析

    A組及B組患者血清中、胎盤組織中TSP-1、Endoglin與微血管密度計數(shù)均呈顯著負(fù)相關(guān)(均P<0.05),但對照組血清中及胎盤組織中TSP-1、Endoglin與微血管密度計數(shù)均無顯著相關(guān)性(均P>0.05),見表5。

    表5 TSP-1、Endoglin與微血管密度計數(shù)相關(guān)性分析

    Table 5 Correlation analysis between TSP-1 and Endoglin and microvascular density count

    樣本源 TSP-1 Endoglin A組B組對照組A組B組對照組血清r-0.641 -0.814 -0.105 -0.645 -0.837 -0.143 P0.0190.0000.5930.0240.0000.120胎盤r-0.716 -0.903 -0.142 -0.598 -0.912 -0.183 P0.0080.0000.6320.0430.0000.539

    3討論

    3.1子癇前期對孕產(chǎn)婦健康的影響

    子癇前期是妊娠期特有疾病,其以蛋白尿、高血壓等作為主要臨床特征,??赡軐颊叨鄠€器官、組織造成嚴(yán)重不良影響,嚴(yán)重威脅孕產(chǎn)婦及嬰兒的健康,一般情況下,子癇前期常由于全身小血管痙攣,造成內(nèi)皮損傷,可能誘發(fā)患者病發(fā)腦出血、腦水腫、肝腎功能損傷、心力衰竭等,可能造成產(chǎn)后出血、胎盤早剝等諸多產(chǎn)科并發(fā)癥[7]。此外,由于子癇前期患者其胎盤多存在供血不足現(xiàn)象,可能導(dǎo)致胎兒出現(xiàn)胎兒生長受限、胎兒窘迫、死產(chǎn)、死胎等。有研究指出,隨著胎盤及胎兒的娩出,妊娠期高血壓病理改變并可能伴隨出現(xiàn)自行逆轉(zhuǎn)。

    3.2 TSP-1與早發(fā)型子癇前期的關(guān)系

    母體抗血管生成因子和循環(huán)促血管生成不平衡能在早發(fā)型子癇前期發(fā)生及發(fā)展過程中起到十分重要的作用。TSP-1是人體內(nèi)重要的一種多功能糖蛋白,是體內(nèi)天然新生血管生成抑制因子,是重要的新生血管生成內(nèi)源性抑制物[8]。有報道指出,在子癇前期發(fā)生及發(fā)展過程中內(nèi)源性血管生成抑制劑是重要的病理生理過程[9]。TSP-1在血管內(nèi)皮細(xì)胞的激活過程中起到十分作用,增加氧代謝產(chǎn)物和血管活性物質(zhì)釋放量,并可能導(dǎo)致纖維蛋白原沉積增加,最終可能導(dǎo)致血栓形成[10]。本組研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),早發(fā)型子癇前期患者血中及胎盤組織中TSP-1水平均顯著高于對照組(P<0.05),且血中及胎盤組織中TSP-1水平與微血管密度計數(shù)均顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05),結(jié)果表明早發(fā)型子癇前期患者由于存在抑制新生血管形成和損害血管內(nèi)皮組織現(xiàn)象,導(dǎo)致血管功能受損。而TSP-1胎盤高水平影響滋養(yǎng)細(xì)胞功能,導(dǎo)致胎盤組織出現(xiàn)血管內(nèi)皮組織受損,造成胎盤組織出現(xiàn)反復(fù)缺氧、缺血,導(dǎo)致胎盤功能受損,并與患者預(yù)后質(zhì)量密切相關(guān)。

    3.3 Endoglin表達與早發(fā)型子癇前期的關(guān)系

    有研究結(jié)果顯示,正常人體內(nèi)中Endoglin水平較低,在妊娠后Endoglin水平常隨之增高,且隨著孕周增加而緩慢上升,且在妊娠25周后大部分常大幅增加且在分娩前達到高峰后逐漸恢復(fù)至正常水平[11]。Endoglin過度表達可能導(dǎo)致血管痙攣、腦水腫、高血壓發(fā)病率增高[12]。本組研究中通過檢測所有受試者體內(nèi)Endoglin水平研究結(jié)果顯示,早發(fā)型子癇前期患者血中及胎盤中Endoglin水平均顯著高于對照組(P<0.05),且B組患者血中及胎盤中Endoglin水平顯著高于A組(P<0.05)。深入分析發(fā)現(xiàn),微血管密度計數(shù)及預(yù)后質(zhì)量均與Endoglin水平密切相關(guān),提示隨著早發(fā)型子癇前期患者病情發(fā)展,胎盤持續(xù)缺氧、缺血加速,刺激體內(nèi)Endoglin水平表達量增加,抑制滋養(yǎng)細(xì)胞分化及侵潤,誘導(dǎo)滋養(yǎng)細(xì)胞侵潤過淺。引起全身小血管痙攣,加重患者病情,導(dǎo)致患者預(yù)后質(zhì)量不佳。

    綜上所述,早發(fā)型子癇前期血管生成與患者血清及胎盤組織中TSP-1、Endoglin水平呈顯著正相關(guān)關(guān)系,但本組研究臨床樣本數(shù)較少,有待后續(xù)擴大臨床樣本數(shù)深入研究。

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