金銀花不同部位化學(xué)成分的比較研究

章艷玲

（新鄉(xiāng)學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院，河南新鄉(xiāng)453003）

0 引言

金銀花，又名忍冬、銀花、雙花等，自古被譽(yù)為清熱解毒的良藥。它味甘，性寒，具有清熱瀉火、燥濕、涼血、解毒及清虛熱等功效。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，金銀花藥理作用主要表現(xiàn)在抑菌、抗病毒、解熱、抗炎、保肝、止血、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)等方面。金銀花對于傷寒桿菌、痢疾桿菌、大腸及綠膿桿菌、百日咳桿菌等桿菌和葡萄球菌、鏈球菌、肺炎雙球菌、腦膜炎球菌等球菌，都有比較強(qiáng)的抑制能力，所以對于流行性感冒和炎癥均有一定治療效果，且金銀花的毒性低，副作用小。

金銀花的主要活性成分有：有機(jī)酸類化合物、黃酮類化合物、揮發(fā)油成分、三萜類化合物等。對金銀花有效成分的研究多是對花蕾中有效成分的研究，如王國亮等[1]對金銀花的花蕾進(jìn)行分析，從中鑒定出27種揮發(fā)油成分。劉家欣等[2]對湘西栽培的金銀花干燥花蕾中的揮發(fā)油進(jìn)行分析，共鑒定出40種成分，占精油總量的80%。高玉敏等[3]1995年首次從金銀花中分離出4個黃酮類化合物。黃麗瑛等[4]從金銀花花蕾的氯仿提取物中分離得到兩種黃酮類物質(zhì)。張英華等[5]對不同產(chǎn)地的金銀花中綠原酸的含量進(jìn)行比較，指出不同產(chǎn)地金銀花中綠原酸含量有很大差異。也有少數(shù)人對金銀花枝葉中化學(xué)成分進(jìn)行研究，如景小琦等[6]采用紫外分光光度法測定不同時期的金銀花修剪枝中各部位的粗黃酮含量。張雁冰等[7]對密縣金銀花及其莖、葉中綠原酸含量進(jìn)行測定。筆者查閱了大量資料，發(fā)現(xiàn)很少有人對金銀花莖，葉和花中化學(xué)成分進(jìn)行比較研究，因此有必要進(jìn)行更加深入的研究，拓寬其有效成分的研究范圍，為擴(kuò)大金銀花的生藥資源提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 研究對象 試驗所用材料金銀花購自河南封丘中藥市場，經(jīng)河南中醫(yī)大學(xué)中藥學(xué)院藥用植物實驗室鑒定為金銀花(Lonicera japonica Thunb)。樣品經(jīng)曬干后粉碎使用。

1.1.2 儀器與設(shè)備 循環(huán)水式多用真空泵（SHB-Ⅲ鄭州長城）、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（RE-52AA上海亞榮）、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（DHG-9070A上海精宏）、電子分析天平（AUW120日本島津）、PDL-40B型離心機(jī)，722分光光度計（上海分析儀器廠）。恒溫水浴鍋，粉碎儀，電熱爐，回流提取裝置，過濾裝置，干燥箱，常規(guī)玻璃儀器，Uvmini-1240紫外可見分光光度計（日本島津有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 黃酮類化合物的測定

（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作。精密稱取干燥至恒重的無水蘆丁10.0 mg，置于50 mL的容量瓶中，加70%乙醇適量溶解，加70%乙醇定容至刻度。精密量取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00、7.00 mL，分別放置于25 mL容量瓶，加純凈的蒸餾水至7.0 mL每個容量瓶，加5%亞硝酸鈉溶液1 mL，混勻，放置6 min，加10%硝酸鋁溶液1 mL，搖勻，放置6 min，加1 mol/L氫氧化鈉試液10 mL，用水定容，搖勻，放置15 min。以加標(biāo)準(zhǔn)溶液0.00 mL的樣品為空白，在510 nm波長處測定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[8-10]。

（2）黃酮含量測定。準(zhǔn)確稱1.50 g待測樣品粉末，加入60 mL 70%乙醇溶劑放于100 mL圓底燒瓶內(nèi)，置于水浴鍋上，70℃條件下回流提取60 min，過濾，重復(fù)提取兩次；合并過濾液，用70%乙醇定容于100 mL容量瓶中，搖勻待用。精確量取1.0 mL，參照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備，以加標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0 mL的樣品為空白，在510 nm波長處測定吸光度。

1.2.2 碳水化合物的測定 可溶性糖的含量測定采用硫酸-蒽酮法[11]、多糖的含量測定采用苯酚－硫酸法[12-13]。

1.2.3 綠原酸含量的測定

（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作。精密稱取綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品5.0 mg，置于50 mL容量瓶中，用95%的乙醇溶解并定容。準(zhǔn)確量取標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.00、0.50、0.75、1.00、1.25、1.50、2.00、2.50 mL分別放置于10 mL的容量瓶中，并用95%的乙醇定容，以加標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0 mL的樣品為空白，在330 nm波長處測定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[14]。

（2）綠原酸含量的測定。將金銀花莖、葉、花各樣品在100℃時烘干至恒重，粉碎過80目篩，準(zhǔn)確稱取處理后的樣品各1.0 g，置于150 mL錐形瓶中，量取50 mL 95%的乙醇加入，用電子天平稱量總重量。于85℃的恒溫水浴鍋里回流4 h。放置，冷卻至室溫時，在電子天平上添加體積分?jǐn)?shù)95%的乙醇至原重，過濾待用。精確吸取提取液的濾液1 mL，用95%的乙醇稀釋50倍，以加標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0 mL的樣品為空白，在327 nm波長處測定吸光度[15]。

1.2.4 其他成分測定 維生素C含量的測定采用2,6-二氯酚靛酚滴定法[16-18]，可溶性蛋白質(zhì)含量的測定采用考馬斯亮藍(lán)法G-250染料結(jié)合法[19]，游離氨基酸含量的測定采用茚三酮呈色法[20]。

2 結(jié)果與分析

2.1 黃酮類化合物的含量及分析

經(jīng)分光光度法測得金銀花莖、葉和花各部位黃酮類化合物的含量分別為：14.26、96.52、40.72 mg/g。金銀花莖、葉和花中黃酮類化合物含量由高到低為：葉＞花＞莖。且金銀花葉中黃酮類化合物的含量96.52 mg/g是金銀花花蕾中測定結(jié)果40.72 mg/g的2.37倍，葉子中的含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于花中的含量（表1）。

表1 金銀花莖、葉和花中的化學(xué)成分含量 mg/g

2.2 碳水化合物含量及分析

用硫酸-蒽酮法和苯酚－硫酸法分別測金銀花莖、葉和花3種材料，測得可溶性糖含量分別為85.32、50.64、52.03 mg/g，多糖的含量為：67.53、46.96、43.45 mg/g。金銀花莖、葉和花中可溶性糖、多糖的含量高低是：可溶性糖：莖＞花＞葉；多糖含量：莖＞葉＞花（表1）。

2.3 綠原酸含量及分析

從表1可以看出經(jīng)紫外分光光度法測得金銀花莖、葉和花中綠原酸含量分別為：15.25、23.05、32.35 mg/g。金銀花莖、葉和花中綠原酸的含量由高到低是：花＞葉＞莖（表1）。

2.4 維生素C含量

從表1可以看出用2,6-二氯酚靛酚滴定法測得金銀花莖、葉和花各部位維生素C的含量分別為：0.34、1.47、1.05 mg/g。金銀花莖、葉和花中維生素C含量由高到低為：葉＞花＞莖（表1）。

2.5 可溶性蛋白質(zhì)含量及分析

從表1可以看出：金銀花莖、葉和花中可溶性蛋白質(zhì)的含量分別為：2.16、2.82、4.14 mg/g。因此，可溶性蛋白質(zhì)含量由高到低是：花＞葉＞莖。

2.6 游離氨基酸的含量及分析

從表1可以看出：金銀花莖、葉和花中游離氨基酸的含量分別為：0.0447、0.16、0.269 mg/g。因此，游離氨基酸含量由高到低是：花＞葉＞莖。

3 討論與結(jié)論

金銀花是主要的中草藥之一，其藥用價值廣泛，年使用量特別大，前人對金銀花有效成分的研究多是對花蕾中有效成分的研究，如王國亮等[1]對金銀花的花蕾進(jìn)行分析，從中鑒定出27種揮發(fā)油成分。劉家欣等[2]對湘西栽培的金銀花干燥花蕾中的揮發(fā)油進(jìn)行分析，共鑒定出40種成分，占精油總量的80%。張英華等[5]對不同產(chǎn)地的金銀花中綠原酸的含量進(jìn)行比較，指出不同產(chǎn)地金銀花中綠原酸含量有很大差異。也有少數(shù)人對金銀花枝葉中化學(xué)成分進(jìn)行研究，如景小琦等[6]采用紫外分光光度法測定不同時期的金銀花修剪枝中各部位的粗黃酮含量。張雁冰等[7]對密縣金銀花及其莖、葉中綠原酸含量進(jìn)行測定。筆者查閱了大量資料，發(fā)現(xiàn)很少有人對金銀花莖，葉和花中化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)地比較研究。

與金銀花花蕾相比，金銀花莖、葉采集更容易，價格更便宜。且近幾年隨著金銀花種植規(guī)模的擴(kuò)大，金銀花修剪整形技術(shù)也得到大力推廣，每年都可得到大量的枝葉，價格低廉，這些金銀花枝葉尤其是金銀花葉子應(yīng)該得到充分的利用。

本研究對金銀花莖、葉和花中的黃酮類物質(zhì)、維生素C、綠原酸、可溶性蛋白質(zhì)、游離氨基酸、可溶性糖和多糖的含量進(jìn)行系統(tǒng)的比較研究，研究結(jié)果為：黃酮類化合物和維生素C含量均為葉＞花＞莖；綠原酸、可溶性蛋白質(zhì)和游離氨基酸含量均為：花＞葉＞莖；可溶性糖：莖＞花＞葉；多糖含量：莖＞葉＞花。結(jié)果表明金銀花莖、葉和花中的化學(xué)成分相似，具有較強(qiáng)的藥理作用。本研究的不足之處在于所購試驗材料均為同一生長期的材料，未對不同生長時期材料中的化學(xué)成分進(jìn)行研究，未來可以考慮對不同生產(chǎn)時期金銀花各部位的化學(xué)成分進(jìn)行更深入的研究，以便為金銀花莖、葉的有效利用提供更全面科學(xué)的理論依據(jù)。