氨氮對青海湖裸鯉水花魚苗的急性毒性試驗

羅穎 ，閆麗婷 ，吳洪芳 ，汪鵬程 ，李瑾 ，田文根

（1.青海湖裸鯉救護(hù)中心，青海 西寧 810016；2.青海湖裸鯉繁育與保護(hù)重點實驗室，青海 西寧 810016）

青海湖裸鯉俗稱“湟魚”，屬鯉形目，鯉科，裂腹魚亞科。是青海湖中唯一的水生經(jīng)濟(jì)動物。具有耐寒冷、耐鹽堿的特性。養(yǎng)殖水體中氨氮通常是制約魚類正常生長的重要因子之一。在養(yǎng)殖過程中，尤其是高密度養(yǎng)殖模式下，當(dāng)含量達(dá)到一定值時能夠影響魚類的行為、代謝、免疫等，對養(yǎng)殖個體產(chǎn)生毒害作用，誘發(fā)多種疾病，甚至導(dǎo)致大量死亡，造成巨大損失。該試驗研究氨氮對青海湖裸鯉水花魚苗的毒性，對水體中氨氮對青海湖裸鯉的安全濃度和半致死濃度進(jìn)行確定，為健康養(yǎng)殖青海湖裸鯉提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

該次試驗采用的試驗魚為青海湖裸鯉“水花”魚苗，來自青海湖裸鯉救護(hù)中心，全長為0.9～1.7 cm，試驗中所用的魚體表沒有任何損傷，總生命特征正常。試驗過程中水溫保持在16.5～17.0℃。

試驗藥品：分析純氯化銨、分析純氫氧化鈉。試驗用水：經(jīng)過曝氣48 h的自來水，水溫16.5～17.0℃，pH值7.9。

使用容積為45 L的玻璃魚缸作為毒性試驗容器，每個容器裝20 L試驗液。

1.2 試驗方法

遵照96 h靜水式急性試驗規(guī)范進(jìn)行，用干燥的氯化銨及氫氧化鈉分析純配置不同氨氮濃度。氨氮濃度分別為 0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50 mg/L,根據(jù)青海湖裸鯉魚苗養(yǎng)殖過程中池塘水中的實際pH值，設(shè)置pH值為8.5且氨氮濃度梯度相同的試驗組，并設(shè)置對照組。

測定水中pH值和溫度，將試驗用的青海湖裸鯉“水花”魚苗隨機(jī)在每個箱中放入20尾。持續(xù)觀察96 h，及時打撈死亡個體。試驗中在24、48、72、96 h分別記錄試驗箱中試驗魚的中毒癥狀及病死率。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)處理采用SPSS 19軟件分析引入概率單位歸回算法，安全質(zhì)量濃度（SC）采用下列公式求得：

SC＝0.1×96hLC50。

2 結(jié)果

2.1 氨氮對青海湖裸鯉水花魚苗的急性中毒試驗

試驗開始時，低氨氮試驗組青海湖裸鯉水花魚苗活動正常與對照組相同，但高濃度對照組的青海湖裸鯉水花魚苗游動劇烈，隨著試驗時間延長6 h后，出現(xiàn)游動遲緩、時上浮時下沉、身體側(cè)臥和痙攣的癥狀，最終沉底死亡。

在pH值為7.9條件下氨氮為0.25、0.30 mg/L試驗組以及在pH值為8.5條件氨氮濃度0.25 mg/L試驗組，試驗魚始終與對照組試驗魚活動情況相同。

氨氮對青海湖裸鯉水花魚苗的急毒性試驗結(jié)果見表1及表2。從表中可以看出，除對照組及前兩組以外都出現(xiàn)了不同情況的死亡。隨著氨氮濃度的增加，青海湖裸鯉水花魚苗的病死率增加。在相同氨氮濃度下，中毒時間越長病死率越高，pH值的上升病死率也隨之升高。

2.2 青海湖裸鯉“水花”魚苗的半致死濃度和安全濃度

根據(jù)表1和表2，對氨氮濃度和青海湖裸鯉水花魚苗的病死率進(jìn)行回歸分析計算出氨氮對青海湖裸鯉水花魚苗的半致死濃度（LC50）和安全濃度（SC）如表3所示。

表1 pH值為7.9條件下氨氮對青海湖裸鯉水花魚苗的急性毒性試驗結(jié)果%

表2 pH值為8.5條件下氨氮對青海湖裸鯉水花魚苗的急性毒性試驗結(jié)果 %

表3 氨氮對青海湖裸鯉水花魚苗的半致死濃度和安全濃度

3 分析與討論

養(yǎng)殖水體當(dāng)中氨氮含量主要來源于飼料剩餌、水體缺氧時硝化細(xì)菌對含氮有機(jī)物的還原、魚類等生物糞便的沉積。水花魚苗下塘前水中氨氮于前期肥水以及連續(xù)陰雨天水中缺氧產(chǎn)生。

試驗中在pH值為7.9條件下氨氮濃度低于0.3 mg/L，青海湖裸鯉“水花”魚苗未出現(xiàn)不適及死亡情況。在濃度為0.35 mg/L試驗組，在試驗48～72 h試驗魚陸續(xù)出現(xiàn)出現(xiàn)游動遲緩的癥狀。pH值為8.5條件氨氮濃度低于0.25 mg/L，青海湖裸鯉“水花”魚苗未出現(xiàn)不適及死亡情況。在濃度為0.30 mg/L試驗組，在試驗72 h后有5%試驗魚出現(xiàn)游動遲緩的癥狀在濃度為0.35 mg/L試驗組，在濃度為0.35 mg/L試驗組，試驗進(jìn)行12 h后小部分試驗魚開始出現(xiàn)游動緩慢癥狀。

水體中氨氮的含量往往會隨著水溫和酸堿程度的變化而相應(yīng)改變，在該次試驗中，相同氨氮濃度條件下，試驗魚在pH值8.5環(huán)境中出現(xiàn)氨氮中毒癥狀要早于pH值7.9。pH值8.5條件下試驗組的半致死濃度也高于pH值7.9條件下試驗組。pH值的升高會使氨氮毒性增強(qiáng)。

在青藏高原地區(qū)地表水pH值普遍偏高，故在青海湖裸鯉魚苗下塘前期根據(jù)池水pH值合理施肥，如遇連續(xù)陰雨需注意水質(zhì)調(diào)控。根據(jù)該試驗結(jié)果以期為養(yǎng)殖戶提供有益的參考。