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    紅葉石楠組織培養(yǎng)繁育技術(shù)研究

    2019-02-12 21:03:46陳陸琴張謹(jǐn)華
    山西林業(yè) 2019年3期
    關(guān)鍵詞:石楠紅葉試管

    陳陸琴 張謹(jǐn)華

    (1.太原市園林植物研究中心,山西 太原 030041;2.晉中學(xué)院生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,山西 晉中 030619)

    1 引言

    紅葉石楠為光葉石楠和石楠的雜交種,為常綠小喬木或叢生灌木,葉色鮮艷如火,亮麗持久。主要分布在亞洲東南部與東部和北美洲的亞熱帶與溫帶地區(qū),在中國許多省份已廣泛引種栽培。紅葉石楠在溫暖潮濕的環(huán)境下生長(zhǎng)良好,有極強(qiáng)的耐陰和抗旱能力,但是不抗水濕;對(duì)土壤要求不嚴(yán)格,適宜生長(zhǎng)于各種土壤中,抗鹽堿性較好,尤喜砂質(zhì)土壤,但是在紅壤或黃壤中也可以正常生長(zhǎng);對(duì)于氣候以及氣溫的要求比較寬松,能夠抵抗低溫的環(huán)境。

    隨著近幾年太原市園林綠化的快速發(fā)展,大量彩色植物被引進(jìn),而在太原可選用的彩色植物種類較少,常見的有金葉女貞、紫葉小檗等。紅葉石楠因其葉色可隨葉片新老程度呈現(xiàn)不同顏色,尤其是新葉紅色鮮明,在南方已被廣泛應(yīng)用,景觀效果好。紅葉石楠還具有生長(zhǎng)速度快、耐修剪等特點(diǎn),符合現(xiàn)代園林需求,但由于其是雜交種,常規(guī)的有性繁殖受到限制,遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足不了園林綠化中大量應(yīng)用的需要。因此,在北方城市開展紅葉石楠組培快繁技術(shù)研究,對(duì)該樹種開發(fā)及園林應(yīng)用具有重要的意義。

    2 材料與方法

    2.1 試驗(yàn)材料

    實(shí)驗(yàn)材料采自太原植物園珍稀植物引種馴化基地種植的紅葉石楠植株上。

    2.2 試驗(yàn)方法

    2.2.1 無菌外植體的獲得

    晴天在生長(zhǎng)健壯、無病蟲害的植株上采集嫩莖段,剪成帶兩個(gè)芽的小段用洗衣粉浸泡20min,再用流水沖洗1.50h,然后轉(zhuǎn)移到超凈工作臺(tái)上,用濾紙吸干水分,放入體積分?jǐn)?shù)為70%~75%酒精中搖動(dòng)3次~5次,持續(xù)30s立即將外植體取出,在無菌水中清洗2次。然后放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.10%的氯化汞溶液中5.0min~8.0min,取出后在無菌水中至少清洗5次,用無菌吸水紙吸干外植體表面水分,然后再接種到誘導(dǎo)不定芽培養(yǎng)基上,每瓶接種3個(gè)外植體。

    2.2.2 培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件

    基本培養(yǎng)基:MS培養(yǎng)基,均加蔗糖25g/L,瓊脂6.0g/L,pH5.8~6.2。

    培養(yǎng)條件:溫度控制在25℃±2℃,光照時(shí)間為每天12h,光照強(qiáng)度2 000lx。

    2.2.3 不同激素配比對(duì)叢生芽誘導(dǎo)的影響

    將獲得的無菌材料分別接種到6-BA和NAA兩種不同濃度配比的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,30d之內(nèi)每天進(jìn)行觀察和統(tǒng)計(jì)。

    2.2.4 不同激素對(duì)試管苗生根的影響

    以高度約為2.0cm的試管苗為試驗(yàn)材料,基本培養(yǎng)基為1/2MS,瓊脂6g/L,蔗糖15g/L,探究不同濃度的IBA和NAA對(duì)試管苗生根的影響,30d之內(nèi)每天統(tǒng)計(jì)生根率。

    2.2.5 移栽

    選擇苗高3.0cm~5.0cm、根長(zhǎng)1.0cm且有5條以上根的試管苗進(jìn)行移栽。移栽前,先在煉苗室鍛煉5.0d,然后放到溫室打開瓶蓋煉苗2.0d。移栽時(shí)用鑷子將幼苗輕輕取出,把基部的培養(yǎng)基洗干凈,移入到不同基質(zhì)的穴盤中。常用基質(zhì)有①珍珠巖;②珍珠巖∶河沙∶泥炭土=1∶1∶1;③珍珠巖∶泥炭土=1∶1。將穴盤放入小拱棚,移栽7.0d內(nèi)進(jìn)行50%~70%遮陽,要保證溫度在25℃左右、濕度在85%左右。

    3 試驗(yàn)結(jié)果與分析

    3.1 不同濃度激素對(duì)叢生芽誘導(dǎo)的影響

    試驗(yàn)中,分別在培養(yǎng)基中添加不同濃度的6-BA和NAA,均可誘導(dǎo)芽分化,但芽的分化數(shù)量與生長(zhǎng)情況差異很大。當(dāng)NAA濃度為0.1mg/L時(shí),6-BA濃度由0.50mg/L增加到1.50mg/L,不定芽分化率由82.30%增加到95.6%;當(dāng)6-BA濃度為1.50mg/L時(shí),NAA濃度由0.05mg/L增加到0.20mg/L,不定芽分化率先高后低。實(shí)踐證明,當(dāng)二者配比大時(shí)不定芽分化率會(huì)增大,但是有部分幼苗出現(xiàn)了玻璃化,這類分化苗不能繼續(xù)使用。通過試驗(yàn),紅葉石楠在MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L培養(yǎng)基中不定芽分化率和增殖效果較好,分化率達(dá)到95.60%,平均分化芽8.3個(gè),平均芽高3.72cm,而且可以直接作為生根試管苗的材料應(yīng)用。

    3.2 不同激素對(duì)試管苗生根的影響

    培養(yǎng)基中添加不同濃度的NAA和IBA誘導(dǎo)生根,試驗(yàn)觀察到使用IBA誘導(dǎo)出的根細(xì)而長(zhǎng),生根率隨IBA濃度的增加而升高;當(dāng)IBA濃度達(dá)1.0mg/L時(shí),部分生根苗基部會(huì)產(chǎn)生少量愈傷組織,影響生根率。使用NAA誘導(dǎo)出的根粗而短,當(dāng)NAA的濃度由0.10mg/L增加到0.50mg/L時(shí),生根率會(huì)提高,但在試管苗基部會(huì)有大量愈傷組織產(chǎn)生,呈松軟狀態(tài)。在愈傷組織部位產(chǎn)生的根比較脆,容易折斷,移栽時(shí)不能夠選用這樣的生根苗。通過試驗(yàn),紅葉石楠在1/2MS+IBA0.50mg/L時(shí)生根率達(dá)到98%,沒有產(chǎn)生愈傷組織,平均生根5條~6條,平均根長(zhǎng)1.50cm。

    3.3 試管苗的移栽

    經(jīng)過煉苗以后,將生根苗從培養(yǎng)瓶中移出,洗去根部培養(yǎng)基,用1.0‰多菌靈溶液浸蘸根部,然后移栽到50穴的穴盤中放入塑料小拱棚,每隔5.0d噴1次多菌靈,7.0d以后可定時(shí)揭膜透氣,15d以后打開小拱棚塑料膜。試驗(yàn)所用的3種基質(zhì)對(duì)移栽成活率沒有明顯差異,成活率都能達(dá)到95%以上。但從后期生長(zhǎng)情況來看,在珍珠巖+河沙+泥炭土中小苗生長(zhǎng)快,而且壯實(shí),當(dāng)出現(xiàn)3對(duì)~5對(duì)新葉時(shí),就可以進(jìn)行定植,進(jìn)入大田養(yǎng)護(hù)管理。

    4 結(jié)論與討論

    在紅葉石楠組織培養(yǎng)過程中,由于莖段光滑比較容易消毒,使用0.10%氯化汞溶液浸泡6.0min效果良好,但也應(yīng)當(dāng)注意消毒時(shí)間。時(shí)間過長(zhǎng),會(huì)使外植體受到損傷甚至死亡,時(shí)間不足則容易感染霉菌,影響無菌苗的獲得率。該研究發(fā)現(xiàn),6BA與NAA二者相互配合使用,可以有效誘導(dǎo)不定芽的分化。因此,紅葉石楠誘導(dǎo)不定芽分化增殖最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L,在此培養(yǎng)基中分化出的幼苗高度可達(dá)3.72cm,能直接用作生根試管苗材料。通過此方式縮短培養(yǎng)周期,能降低生產(chǎn)成本,可以滿足工廠化育苗需求。低鹽濃度的培養(yǎng)基有利于根的生長(zhǎng),生長(zhǎng)素對(duì)根的生長(zhǎng)效應(yīng)較明顯。在生根試驗(yàn)中,選用1/2MS培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基時(shí),生根率會(huì)隨著IBA濃度改變而改變。紅葉石楠最佳生根培養(yǎng)基是1/2MS+IBA0.5mg/L,生根苗長(zhǎng)勢(shì)健壯。移栽于珍珠巖∶河沙∶泥炭土=1∶1∶1基質(zhì)中的紅葉石楠幼苗,成活率高達(dá)95%,植株長(zhǎng)勢(shì)旺盛。

    通過多年的引種試驗(yàn),太原地區(qū)從外地引進(jìn)的紅葉石楠制品苗木由于其適應(yīng)性差,不易成活。為解決這一問題,通過組培苗的生產(chǎn),在溫室移栽成活后,4月移入大田,一年內(nèi)修剪3次,定期增施磷肥促進(jìn)植株根系發(fā)達(dá),同時(shí)增強(qiáng)抗寒抗旱能力,冬季再用無紡布進(jìn)行包裹防護(hù)。這樣經(jīng)過3年的鍛煉馴化,即可用于園林綠化,而且能夠有效地解決紅葉石楠在太原地區(qū)的應(yīng)用。

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