一例鴨黃病毒與鴨疫里默氏桿菌混合感染的診治

田開(kāi)麗 吳立杰

（1.山東智誠(chéng)農(nóng)牧發(fā)展科技股份有限公司，山東濱州 256600；2.山東省無(wú)棣縣良種畜禽繁育場(chǎng)，山東無(wú)棣 251900）

1 發(fā)病情況

2019年8月，山東某鴨場(chǎng)飼養(yǎng)種鴨20000只，220日齡時(shí)突然出現(xiàn)采食下降、高熱、排白綠色水樣稀便，隨之產(chǎn)蛋急劇下降，發(fā)病三天開(kāi)始死亡，后期死亡率逐日增加，產(chǎn)蛋率逐日大幅降低，個(gè)別鴨子伴有神經(jīng)癥狀，出現(xiàn)扭脖、癱瘓等表現(xiàn)。鴨群均免疫過(guò)鴨瘟、鴨肝與禽流感。養(yǎng)殖場(chǎng)鴨群最初發(fā)病時(shí)死亡數(shù)量較少而沒(méi)有引起養(yǎng)殖場(chǎng)重視，自行發(fā)病后飼養(yǎng)員使用過(guò)抗病毒藥及氟苯尼考等多種抗生素均無(wú)效。隨后發(fā)病越來(lái)越嚴(yán)重，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，最終判定為鴨黃病毒與鴨疫里默氏桿菌導(dǎo)致的混合感染，通過(guò)藥敏試驗(yàn)選出極敏感的藥物進(jìn)行用藥，最終達(dá)到較好的治療效果。

2 臨床癥狀

患鴨病初肢體發(fā)軟，不愿走動(dòng)，甚至停止運(yùn)動(dòng)，采食下降或廢絕，飲水量明顯減少，體溫升高，產(chǎn)蛋量減少，部分蛋小且輕，隨病程延長(zhǎng)，出現(xiàn)大批量死亡，嚴(yán)重的病鴨3～5d死亡，死淘率增高，傳播速度極快，個(gè)別鴨子出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，轉(zhuǎn)圈、抽搐、翻個(gè)或身體向一側(cè)傾倒，頭向背部彎曲，兩腿呈劃船樣姿勢(shì)。

3 剖檢變化

急性死亡解剖后發(fā)現(xiàn)心包大量積液，心包膜表面有纖維素性滲出物。心肌、心外膜出血；肝臟腫大，表面有很多出血斑或出血點(diǎn)并被一層灰黃色纖維素膜包裹，有干酪樣滲出物；膽囊腫大，呈深黑紫色；脾臟腫大，表面有壞死灶和出血點(diǎn)；肺臟淤血；輸卵管有炎癥，卵泡變性、壞死；大腦有輕度的水腫，腦膜充血。個(gè)別嚴(yán)重的死鴨，直腸出血，腸道黏膜脫落；鴨掌腫大。

4 實(shí)驗(yàn)室檢查

4.1 病毒鑒定

4.1.1 病毒分離：無(wú)菌取病料，用組織研磨器進(jìn)行充分研磨，以無(wú)菌PBS∶研磨液為1∶5進(jìn)行稀釋，經(jīng)3次反復(fù)凍融，離心后取上清，通過(guò)0.22 μm濾器過(guò)濾除菌，以0.2ml/枚的劑量接種至7日齡的SPF鴨胚尿囊腔中，置于37 ℃孵化箱進(jìn)行孵育，12 h/次照胚觀察，棄掉24 h內(nèi)死亡鴨胚，無(wú)菌條件下收集3 d死亡鴨胚尿囊液儲(chǔ)存于-80 ℃超低溫冰箱備用。觀察死亡鴨胚特征：鴨胚明顯發(fā)育不良，蜷縮，體表大面積出血。

4.1.2 紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)：取死亡鴨胚尿囊液進(jìn)行紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)，結(jié)果陽(yáng)性。

4.1.3 紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)：取死亡鴨胚尿囊液，與鴨黃病毒陽(yáng)性血清進(jìn)行紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)，結(jié)果陽(yáng)性。

4.1.4 試劑盒檢測(cè)：用鴨黃病毒ELISA試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果為陽(yáng)性。診斷為鴨黃病毒感染。

4.2 細(xì)菌鑒定

4.2.1 涂片鏡檢：取可疑病死鴨的心血、肝、腦等組織制作涂片，經(jīng)革蘭氏染色鏡檢是革蘭氏陰性菌；經(jīng)瑞氏染色鏡檢可見(jiàn)為兩極濃染的小短桿菌。

4.2.2 細(xì)菌培養(yǎng)：將病死鴨的腦組織、心血和肝臟無(wú)菌接種至巧克力瓊脂平板、TSA固體培養(yǎng)基、鮮血瓊脂平板和麥康凱瓊脂平板上，分別置于37℃的燭缸中（含CO2）和37℃恒溫箱培養(yǎng)24 h。培養(yǎng)結(jié)果：在巧克力瓊脂平板中出現(xiàn)稍微凸起、表面光滑、透明的圓形菌落，TSA固體培養(yǎng)基中長(zhǎng)有整齊光滑、微凸有光澤的菌落，鮮血瓊脂平板中可以正常生長(zhǎng)，未溶血。而麥康凱瓊脂平板中未出現(xiàn)菌落。

4.2.3 生化試驗(yàn)：糖發(fā)酵試驗(yàn)中對(duì)甘露醇、葡萄糖、麥芽糖、乳糖均不發(fā)酵；硫化氫試驗(yàn)、檸檬酸鹽利用試驗(yàn)、MR試驗(yàn)、V-P試驗(yàn)均為陰性；接觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性。

4.2.4 血清型鑒定：常規(guī)玻片凝集試驗(yàn)結(jié)果顯示，與鴨疫里默氏桿菌1型陽(yáng)性血清混合后出現(xiàn)顆粒狀凝集。不出現(xiàn)顆粒狀凝集，診斷為鴨疫里默氏桿菌感染。

4.3 藥敏試驗(yàn)

根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果，青霉素、頭孢噻肟高敏；慶大霉素、阿莫西林、氟苯尼考、強(qiáng)力霉素中敏；丁胺卡那、恩諾沙星、鏈霉素不敏。

5 診斷

根據(jù)流行病學(xué)特點(diǎn)、臨床癥狀、剖檢變化和實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果顯示，診斷該疫病為鴨黃病毒與鴨疫里默氏桿菌的混合感染。

6 治療

（1）發(fā)病鴨群全部按照產(chǎn)品說(shuō)明用頭孢噻肟鈉飲水，連續(xù)飲用4d，一天兩次集中飲水，期間禁止斷料斷水。嚴(yán)重鴨群選擇頭孢類藥物肌肉注射，連續(xù)使用3d[1]。

（2）適當(dāng)對(duì)全部鴨群使用清熱解毒，增強(qiáng)自身免疫力的產(chǎn)品或飼料添加劑（雙黃連，黃芪多糖，多維，葡萄糖等）。

（3）注意養(yǎng)殖場(chǎng)管理，及時(shí)更換墊料，一天兩次帶鴨噴霧消毒，做好通風(fēng)與保暖，減少應(yīng)激，對(duì)病鴨隔離飼養(yǎng)，對(duì)死鴨無(wú)害化處理。

通過(guò)上述方法的使用，5d后鴨群已經(jīng)基本上恢復(fù)正常。

7 討論

對(duì)于鴨黃病毒感染一定要盡快診斷，防止后期繼發(fā)細(xì)菌感染或者并發(fā)感染多種疾病的出現(xiàn)，使簡(jiǎn)單疾病復(fù)雜化。而鴨疫里默氏桿菌如果出現(xiàn)治療效果不明顯再加上季節(jié)更替、天氣惡劣或者管理不善更會(huì)加重病情。單純的病毒病沒(méi)有引起高死亡率，但自身抵抗力降低，阻擋不了細(xì)菌的侵入，從而引起繼發(fā)感染，增高死亡率。使疾病更難以診斷，增加治療難度。這就要求養(yǎng)殖戶不要胡亂用藥，可能會(huì)延誤甚至加重病情，或者增加耐藥性，鴨疫里默氏桿菌容易產(chǎn)生耐藥性，且不同血清型、不同地區(qū)藥物敏感情況都不同，因此用藥前最好進(jìn)行藥敏試驗(yàn)的篩選，確定極敏藥物，及時(shí)并且準(zhǔn)確用藥才是治療疾病的根本。另外，預(yù)防為主，因此，日常飼養(yǎng)管理就顯得格外重要。維護(hù)鴨舍及周邊衛(wèi)生，保持適當(dāng)?shù)娘曫B(yǎng)密度，做到通風(fēng)與保暖兼顧，維持飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)平衡，適當(dāng)添加維生素或者微量元素等，都可以達(dá)到預(yù)防疾病的目的。