中醫(yī)藥調(diào)控AQPs在功能性便秘中的研究進(jìn)展

余文美，王建民，方笑麗

（1.安徽中醫(yī)藥大學(xué)，安徽合肥230038； 2.安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，安徽合肥230031）

功能性便秘（Functional constipation，F(xiàn)C）是臨床上以腹脹、便次少、便質(zhì)干、大便難為主要癥狀的全球普遍所見(jiàn)的慢性功能性腸道疾病。我國(guó)患病率為 6%［1]，西方國(guó)家高達(dá) 45%［2]。據(jù)多項(xiàng)研究報(bào)道，功能性便秘的發(fā)生與腸道水液代謝失衡密切相關(guān)，廣泛存在于細(xì)胞膜上的水通道蛋白（Aquaporins，AQPs）是一族特異性孔道，能夠介導(dǎo)水液的快速順濃度梯度跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)。近年來(lái)，隨著中醫(yī)藥調(diào)控AQPs與便秘的研究不斷深入，AQPs在便秘的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后方面占有重要地位?，F(xiàn)就近年來(lái)AQPs的分子生物學(xué)特性、AQPs與FC關(guān)系臨床研究進(jìn)展及中醫(yī)藥調(diào)控研究現(xiàn)狀作一概述。1 AQPs的分子生物學(xué)特征

1.1 AQPs結(jié)構(gòu)

AQPs的分子量較小，大約25～34 kd。其有5個(gè)環(huán)通路，由6個(gè)跨膜疏水蛋白組成，其中2個(gè)胞漿池和3個(gè)胞外池，第3個(gè)細(xì)胞外池通過(guò)天冬酞胺－脯氨酸－丙氨酸與第1個(gè)細(xì)胞內(nèi)池連接，橫跨細(xì)胞膜兩側(cè)形成一個(gè)特殊結(jié)構(gòu)——沙漏樣，中間的孔道成為水液?jiǎn)尉€通過(guò)的路徑。這就是AQPs的篩選輸運(yùn)機(jī)制的化學(xué)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)［3]。

1.2 AQPs在腸道中的分布

至今為止，在哺乳動(dòng)物中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了至少15種AQP［4]。AQPs廣泛分布在機(jī)體組織中，其中表達(dá)于腸道的目前被發(fā)現(xiàn)的有11種，AQP1分布在結(jié)腸腺管，此外，在膽管、胰腺、肝臟中也有所發(fā)現(xiàn)［5]。AQP2 大多分布在結(jié)腸［6]；AQP3 分布在結(jié)腸絨毛上皮細(xì)胞［7]；AQP4 分布在結(jié)腸吸收細(xì)胞中［8]；AQP5、AQP12 主要在十二指腸中分布［9]；AQP7、AQP8、AQP10、AQP11 在大小腸細(xì)胞的頂端分布較多［10]；AQP9 分布于結(jié)腸杯狀細(xì)胞［11]。

1.3 AQPs功能

AQPs肩負(fù)著水分子跨細(xì)胞運(yùn)輸?shù)呢?zé)任，細(xì)胞內(nèi)部和外部的水分子可以被有效地和選擇性地運(yùn)輸，從而保持內(nèi)部環(huán)境中的水平衡狀態(tài)［12]。AQPs既是水液代謝的橋梁，也是腸液分泌變化的信使，還是維持腸道細(xì)胞環(huán)境穩(wěn)態(tài)的重要保障，在一些腸神經(jīng)功能調(diào)控中具有重要作用［13]。

2 AQPs對(duì)FC的影響

腸道水液代謝失衡是引發(fā)FC的核心因素之一［14－15]，目前普遍認(rèn)為，水通道蛋白的異常表達(dá)引起結(jié)腸對(duì)水分的過(guò)度吸收，從而導(dǎo)致腸道水液代謝紊亂，導(dǎo)致便秘的發(fā)生［16]。

陳萌等［17]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，便秘大鼠的結(jié)腸AQP1、AQP3呈現(xiàn)一個(gè)高表達(dá)的狀態(tài)，并伴結(jié)腸水分吸收增加。有研究提出，AQP4可能參與便秘的發(fā)生，其通過(guò)制造便秘小鼠模型，發(fā)現(xiàn)某味中藥發(fā)揮通便作用是因?yàn)榻档虯QP4水平，增加腸道內(nèi)水分子含量［18]。有實(shí)驗(yàn)通過(guò)切除大鼠大部分（約2/3）結(jié)腸，分別于術(shù)后第14天和術(shù)后第28天記錄大鼠結(jié)腸細(xì)胞中AQP3、AQP8、AQP9的表達(dá)含量，結(jié)果進(jìn)一步論證了AQP與水分吸收與便秘的關(guān)系［19]。

3 中藥方劑調(diào)控AQPs與FC

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為便秘多因氣血不復(fù)、陽(yáng)氣不通、陰寒不散而大便難暢，患者就診時(shí)大多病程較長(zhǎng)，因調(diào)治不得法而便秘難除，故治療時(shí)很難求得速效。中醫(yī)藥有整體調(diào)護(hù)和綜合治療等優(yōu)勢(shì)，近年來(lái)，隨著分子生物學(xué)與基因技術(shù)的發(fā)展，單味中藥、中藥單體、中藥方劑、針刺電針等對(duì)FC中AQPS表達(dá)含量作用的研究逐漸完善。

3.1 單味中藥調(diào)控AQPs與功能性便秘

單味中藥以其取材容易、制作工藝簡(jiǎn)便、療效確切等優(yōu)勢(shì)在治療FC中應(yīng)用廣泛，但機(jī)制不明。AQPs的提出為研究單味中藥對(duì)水液代謝的作用提供了新思路。

方圓之等［18]觀察白芍的通便作用及其對(duì)小鼠結(jié)腸血管活性腸肽（VIP）及AQP4的影響，結(jié)果顯示，白芍中、高劑量組AQP4水平明顯降低，提示白芍可通過(guò)降低AQP4表達(dá)達(dá)到通便的效果。雒軍等［20]觀察當(dāng)歸對(duì)血虛便秘模型小鼠結(jié)腸AQP4表達(dá)的影響，結(jié)果顯示，當(dāng)歸不同劑量組小鼠結(jié)腸AQP4 表達(dá)明顯降低（P＜0.05），提示當(dāng)歸可通過(guò)降低AQP4表達(dá)以達(dá)到通便的效果。杜麗娟等［21]觀察大黃對(duì)便秘大鼠腸動(dòng)力及結(jié)腸AQP3表達(dá)的調(diào)節(jié)作用，結(jié)果顯示，大黃組通便功能良好，AQP3mRNA含量水平較模型組低（P＜0.05），提示大黃可通過(guò)降低AQP4表達(dá)以達(dá)到通便的效果。

3.2 中藥單體調(diào)控AQPs與功能性便秘

中藥單體亦被證明可調(diào)控AQPs而影響FC。孫莉莉等［22]觀察大黃酸對(duì)便秘小鼠腸道傳輸功能和結(jié)腸肌電及結(jié)腸黏膜AQP3表達(dá)的影響，結(jié)果顯示，大黃酸組AQP3平均光密度值較便秘組低（P＜0.05），提示大黃酸通過(guò)降低AQP3表達(dá)以達(dá)到緩解便秘的效果。Zheng YF等［23]觀察大黃素對(duì)便秘小鼠AQP3的影響，結(jié)果顯示，大黃素可升高AQP3mRNA和蛋白的表達(dá)，是由cAMP－PKA通路實(shí)現(xiàn)的，提示大黃素可調(diào)控AQP3達(dá)到下利以治便秘的作用。

3.3 中藥復(fù)方調(diào)控AQPs與功能性便秘

方劑學(xué)中提及治病可配合多味中藥臨證加減，隨證組方。臨床醫(yī)師根據(jù)診治經(jīng)驗(yàn)總結(jié)出中藥復(fù)方治療功能性便秘，療效顯著，可能與AQPs有關(guān)。

周永學(xué)等［24]觀察硝菔通結(jié)方對(duì)FC大鼠結(jié)腸組織中信號(hào)通路VIP－cAMP－PKA－AQP3的作用，結(jié)果顯示，模型組AQP3含量水平較正常組低（P＜0.05），硝菔通結(jié)方組AQP3含量水平較模型組高（P＜0.05），且低中高劑量組呈梯度上升趨勢(shì)，提示硝菔通結(jié)方可通過(guò)cAMP－PKA通路調(diào)節(jié)AQP3mRNA和蛋白的表達(dá)，從而影響FC。王健等［25]觀察芪榔合劑對(duì)FC小鼠結(jié)腸AQP8和AQP4含量表達(dá)的影響，結(jié)果表明芪榔合劑可調(diào)控FC小鼠結(jié)腸中的AQP8和AQP4。季成春等［26]對(duì)止痛潤(rùn)腸濃煎飲用于防治痔術(shù)后便秘進(jìn)行研究，結(jié)果顯示，痔術(shù)后便秘大鼠的AQP3表達(dá)下調(diào)，治療后呈現(xiàn)上調(diào)，提示止痛潤(rùn)腸濃煎飲的通便治療作用可能與AQP3的參與有關(guān)。

由上所述可知，AQPs在各個(gè)相應(yīng)部位的異常表達(dá)可引起便秘，將單味中藥、中藥單體、中藥復(fù)方有機(jī)結(jié)合在一起，為治療便秘提供了新的切入點(diǎn)。中醫(yī)藥優(yōu)勢(shì)在于配伍，配伍藥物的成分分析過(guò)于困難，無(wú)法判定何種成分對(duì)AQPs的影響最為突出，如何配伍才能達(dá)到最好的臨床治療效果是值得思考的問(wèn)題。

4 針刺電針調(diào)控AQPs與功能性便秘

針刺治療可疏通經(jīng)氣，調(diào)暢氣血，溝通機(jī)體內(nèi)外，使腸道內(nèi)郁滯的氣血得以暢通，從而改善局部循環(huán)。AQPs的發(fā)現(xiàn)使針灸在水液代謝方面的研究進(jìn)入了一個(gè)新的階段。

《靈樞·雜病》記載“腹?jié)M，大便不利，腹大，……，取足少陰”，提出可針刺足少陰治療便秘。針刺電針對(duì)功能性便秘的療效亦得到現(xiàn)代臨床研究證實(shí)。兩項(xiàng)研究通過(guò)觀察結(jié)腸慢傳輸型便秘患者不同處理組（治療穴取天樞）治療前后排便相關(guān)癥狀、患者滿意度、安全性等指標(biāo)，得出電針對(duì)結(jié)腸慢傳輸型便秘患者臨床癥狀、滿意度的療效肯定且安全性高，其綜合療效優(yōu)于有循證醫(yī)學(xué)證據(jù)的一線便秘藥物乳果糖口服液［27]，同時(shí)具有良好的遠(yuǎn)期效應(yīng)［28]。羅芳麗等［29]通過(guò)對(duì)近十年以來(lái)國(guó)內(nèi)發(fā)表的針灸治療FC的臨床隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)文獻(xiàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析與評(píng)價(jià)，總結(jié)出天樞、上巨虛、三陰交等最常用的主穴與三陰交、脾俞、足三里等常見(jiàn)配穴。一項(xiàng)對(duì)大鼠（肝郁脾虛模型）電針刺不同穴位結(jié)腸AQP4的表達(dá)情況進(jìn)行的隊(duì)列研究結(jié)果顯示，針刺天樞、上巨虛、三陰交、太沖組的結(jié)腸AQP4灰度值明顯大于其他各組（P＜0.05）［30]，不同特定穴配伍針刺療效差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，以天樞、上巨虛、三陰交、太沖配伍療效最為顯著。綜上所述，針灸治療功能性便秘臨床療效確切、患者滿意度高，可能通過(guò)調(diào)控AQPs在結(jié)腸中的表達(dá)發(fā)揮作用。

由上述研究發(fā)現(xiàn)，AQPs不僅參與腸道的分泌