HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)在年輕女性宮頸癌篩查及宮頸疾病診治中的應(yīng)用價(jià)值

李滿(mǎn)元 劉文 王寶 趙勁松 王佳美

(錦州市婦嬰醫(yī)院， 遼寧錦州 121000)

臨床研究[1]發(fā)現(xiàn)，人乳頭瘤病毒(HPV)感染是宮頸癌的重要致病因素之一，宮頸癌患者中絕大多數(shù)人合并HPV感染，多數(shù)宮頸癌患者早期確診后經(jīng)過(guò)治療可以治愈，治愈率高達(dá)85%以上。年輕女性中HPV感染率較高，大部分為一過(guò)性無(wú)癥狀感染，致癌率低，但持續(xù)HPV感染的女性患者，其宮頸癌發(fā)病率較高，通過(guò)對(duì)年輕女性實(shí)施HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)可以作為區(qū)分患者HPV感染是否存在持續(xù)性的重要手段，臨床應(yīng)用日益廣泛[2]。本實(shí)驗(yàn)評(píng)估了HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)用于年輕女性宮頸癌篩查及宮頸疾病診治中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取我院2017年6月至2018年5月收治的實(shí)施TCT檢查陽(yáng)性的260例女性患者。應(yīng)用數(shù)字表法將患者分為觀察組與對(duì)照組，各130例。對(duì)照組患者實(shí)施HPV DNA檢測(cè)，觀察組患者實(shí)施HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)。觀察組患者年齡20～30歲，平均(24.16±3.48)歲。對(duì)照組患者年齡20～30歲，平均(25.19±3.59)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：入組患者年齡介于20～30歲，入組實(shí)驗(yàn)前接受TCT篩查，結(jié)果呈陽(yáng)性。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除年齡>30歲，過(guò)往宮頸手術(shù)史者，妊娠期或哺乳期女性，入組前3～7 d有性生活者，陰道接受藥物治療或理療者，其他可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的病例。所有患者入組前知曉實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，簽署知情同意書(shū)，實(shí)驗(yàn)方法符合院倫理委員會(huì)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。兩組患者年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2檢測(cè)方法

1.2.1TCT檢測(cè) 所有患者入組前，3～7 d禁止性生活，禁止使用藥物沖洗陰道或服用影響TCT檢測(cè)的藥物。由專(zhuān)職醫(yī)護(hù)應(yīng)用TCT采集毛刷，收集患者脫落細(xì)胞放入專(zhuān)用采樣瓶中備檢。對(duì)患者檢測(cè)結(jié)果應(yīng)用陰道細(xì)胞學(xué)的分類(lèi)及報(bào)告細(xì)則(TBS)分級(jí)：細(xì)胞呈炎癥反應(yīng)性改變(NILM)、非典型鱗狀上皮細(xì)胞(ASC)、上皮內(nèi)高度病變(ASC-H)、低度鱗狀上皮內(nèi)病變(LSIL)、高度鱗狀上皮內(nèi)病變(HSIL)。

1.2.2HPV E6/E7 mRNA及HPV DNA檢測(cè)[3]所有患者入院治療后，同期行HPV E6/E7 mRNA及HPV DNA檢測(cè)?；颊哌x擇膀胱截石位，完全顯露宮頸后，用無(wú)菌棉簽清潔宮頸表面分泌物后，使用無(wú)菌宮頸采集刷頭沿著宮頸表面，順時(shí)針旋轉(zhuǎn)2～4周采集樣本，將專(zhuān)用采集刷頭浸入儀器對(duì)應(yīng)的測(cè)試細(xì)胞保存液中后完全漂洗，確保采集刷頭上樣本全部進(jìn)入細(xì)胞保存液，密封后，貼標(biāo)簽送病理科檢測(cè)，對(duì)樣本處理、探針雜交、信號(hào)放大、讀板測(cè)定等試驗(yàn)后，以檢測(cè)值≥1診斷為陽(yáng)性。

1.2.3病理檢測(cè)[3]對(duì)HPV E6/E7 mRNA及HPV DNA檢測(cè)陽(yáng)性患者行陰道鏡活檢+病理檢測(cè)。病理分級(jí)：宮頸炎癥、宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)Ⅰ級(jí)、CINⅡ級(jí)、CINⅢ級(jí)、宮頸癌。

1.3觀察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)兩組患者的TBS分級(jí)結(jié)果、HPV E6/E7 mRNA及HPV DNA檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性率及上述兩種檢測(cè)結(jié)果與病理檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)實(shí)施預(yù)處理。計(jì)數(shù)資料應(yīng)用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1兩組患者TBS分級(jí)情況比較 兩組患者應(yīng)用TCT檢測(cè)后TBS分級(jí)情況接近，組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組患者TBS分級(jí)情況比較[(n)%，n=130]

2.2兩組患者檢測(cè)結(jié)果比較 觀察組患者檢測(cè)陽(yáng)性病例42例，占比為32.31%；對(duì)照組患者檢測(cè)陽(yáng)性病例53例，占比為40.77%；兩組患者的陽(yáng)性檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.3兩組患者中檢測(cè)陽(yáng)性患者的病理檢測(cè)結(jié)果比較 觀察組患者CINⅡ級(jí)以下檢出率低于對(duì)照組患者(P<0.05)；兩組患者病理分級(jí)為CINⅡ以上檢出率差異不大，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩組患者中檢測(cè)陽(yáng)性患者的病理檢測(cè)結(jié)果比較[(n)%，n=130]

3 討 論

HPV病毒持續(xù)感染是女性宮頸癌發(fā)病的高危風(fēng)險(xiǎn)因素之一，隨著女性患者對(duì)宮頸癌的認(rèn)識(shí)及早期篩查意愿的不斷增強(qiáng)，定期檢測(cè)HPV的感染情況對(duì)于防控宮頸癌的發(fā)展具有較高臨床應(yīng)用價(jià)值[4]。宮頸癌發(fā)病近年來(lái)出現(xiàn)低齡化的走勢(shì)，對(duì)于30歲以下有過(guò)性生活的中青年女性，其宮頸癌發(fā)病率呈逐年增高趨勢(shì)，故對(duì)于此類(lèi)人群的宮頸癌早期檢測(cè)成為目前學(xué)術(shù)界研究的重點(diǎn)[5]。

臨床研究[6]發(fā)現(xiàn)，TCT檢查聯(lián)合HPV DNA檢測(cè)技術(shù)對(duì)于宮頸癌早期篩查具一定預(yù)測(cè)價(jià)值，少數(shù)年輕女性發(fā)生HPV感染后，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間感染被自我修復(fù)，此類(lèi)患者應(yīng)用HPV DNA檢測(cè)時(shí)會(huì)被定義為陽(yáng)性，導(dǎo)致該檢測(cè)技術(shù)對(duì)于年輕女性的宮頸癌篩查假陽(yáng)性率增高。HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)可以輕松避免年輕女性過(guò)往HPV感染出現(xiàn)的篩查假陽(yáng)性現(xiàn)象，提高病理診斷符合率[7]。臨床研究發(fā)現(xiàn)，HPV病毒中E6/E7 基因是宮頸癌的主要致病基因[8]，E6通過(guò)抑制宿主p53基因表達(dá)阻斷細(xì)胞凋亡過(guò)程，影響相關(guān)細(xì)胞的抗癌作用；E7可抑制pRB基因表達(dá)影響細(xì)胞周期，促進(jìn)炎癥細(xì)胞大量增殖惡變，進(jìn)而發(fā)展為癌癥[9]。HPV E6/E7 mRNA的水平可以預(yù)測(cè)HPV病毒活性及癌變風(fēng)險(xiǎn)，通過(guò)評(píng)估患者體內(nèi)HPV E6/E7 mRNA水平的高低，對(duì)于宮頸癌的早期篩查具有較高臨床價(jià)值[10]。

我院通過(guò)對(duì)TCT檢查陽(yáng)性患者實(shí)施HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)，兩組患者應(yīng)用TCT檢測(cè)后TBS分級(jí)情況接近，實(shí)驗(yàn)分組患者臨床資料無(wú)差別，符合實(shí)驗(yàn)要求；觀察組患者陽(yáng)性檢出率為32.31%低于對(duì)照組患者的陽(yáng)性檢出率40.77%；兩組患者CINⅡ級(jí)以下檢出率存在顯著差異，病理分級(jí)為CINⅡ以上檢出率差異不大，上述結(jié)果表明對(duì)照組患者采用的HPV DNA檢測(cè)技術(shù)對(duì)于既往出現(xiàn)過(guò)HPV感染，而現(xiàn)在自愈的患者存在假陽(yáng)性診斷，而HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)可有效排除上述既往出現(xiàn)過(guò)HPV感染目前無(wú)癥狀的患者，大幅提高診斷準(zhǔn)確度，降低假陽(yáng)性率，提高病理診斷符合率。

綜上所述，臨床對(duì)TCT檢查陽(yáng)性的年輕女性實(shí)施HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)，可提高宮頸癌的篩查準(zhǔn)確度，有助于區(qū)分不同類(lèi)型的宮頸疾病的臨床診治，值得廣泛推廣與應(yīng)用。由于本次實(shí)驗(yàn)病例樣本數(shù)量較少，所得結(jié)論存在一定局限性，日后會(huì)加入更大量病例樣本做持續(xù)性研究。