• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    阿膠、黃明膠對(duì)被動(dòng)吸煙小鼠肺臟Th17/Treg細(xì)胞亞群分化及相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)的影響差異①

    2019-01-17 06:01:32胡晶紅姚成芳蘭紅云張永清
    中國(guó)免疫學(xué)雜志 2019年1期
    關(guān)鍵詞:阿膠肺臟亞群

    張 喆 胡晶紅 姚成芳 蘭紅云 張永清

    (山東中醫(yī)藥大學(xué),濟(jì)南250355)

    阿膠(Colla Corii Asini)是我國(guó)傳統(tǒng)的名貴中藥,自《神農(nóng)本草經(jīng)》首載至今已有兩千多年的藥用歷史[1]。根據(jù)文獻(xiàn)記載:阿膠產(chǎn)生之初原料為牛皮,后因歷史原因被驢皮取代并沿用至今,而牛皮膠改稱黃明膠(Colla Corii Bovis)[2]。阿膠和黃明膠制作工藝相似,但藥理功效和臨床適應(yīng)癥卻各有側(cè)重[2,3]:除同時(shí)具有止血功效外,阿膠在臨床上用于治療肺燥咳嗽,眩暈心悸,心煩不眠等癥,黃明膠口服治療體虛便秘、腎虛遺精,外用對(duì)跌打損傷、瘡癰腫毒有很好的治療效果。中醫(yī)本草類古籍中有諸多關(guān)于阿膠和黃明膠治療氣道炎癥的記載,如《本草匯》中阿膠項(xiàng)下有“治喘嗽者,不論肺虛肺實(shí),可下可溫,須用以安肺潤(rùn)肺”的記載;《證類本草》中黃明膠項(xiàng)下有“治咳嗽不瘥者,黃明膠炙令半焦為末,每服一錢匕”的記載[2,3],但中醫(yī)理論以“驢皮色黑屬陰,阿井之水千里所注,清而且重,其性下趨,故止虛勞咳嗽”、“黃明膠氣味與阿膠同,但非阿井水及驢皮同造,故不能疏利下行耳”為依據(jù),認(rèn)為黃明膠治療氣道炎癥效果不及阿膠,二者對(duì)氣道炎癥的治療效果及作用機(jī)制比較卻均未見現(xiàn)代研究報(bào)道。隨著對(duì)黏膜免疫研究的不斷深入,發(fā)現(xiàn)吸煙作為許多呼吸道疾病如慢性阻塞性肺炎(COPD)、哮喘及呼吸道感染的主要危險(xiǎn)因素可能與香煙煙霧改變宿主的免疫反應(yīng)有關(guān)[4,5],輔助型T細(xì)胞(T hell cell)亞群參與機(jī)體適應(yīng)性免疫,在氣道炎癥性疾病中扮演著重要角色[6],除早期發(fā)現(xiàn)的Th1/Th2細(xì)胞亞群外,Th17/Treg細(xì)胞亞群功能平衡被認(rèn)為是影響呼吸道炎性因子分泌及促炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵因素[7,8]。因此,本研究建立被動(dòng)吸煙小鼠模型,從Th17/Treg細(xì)胞亞群比例及相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)角度研究阿膠和黃明膠治療氣道炎癥作用機(jī)制的異同。

    1 材料與方法

    1.1實(shí)驗(yàn)材料、試劑

    1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)雄性C57BL/6小鼠32只,體質(zhì)量18~22 g,6~8周齡,購自濟(jì)南朋悅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育有限公司[SYXK(魯)20140007],26℃、12 h 光照,12 h暗室飼養(yǎng),自由進(jìn)水、進(jìn)食,Co60輻照滅菌全營(yíng)養(yǎng)大小鼠飼料。

    1.1.2主要試劑及儀器 抗小鼠熒光抗體:PE-CD3、percp-CD4、APC-cy7-IL-17A、PE-cy5.5-CD25、PE-Foxp-3均購自eBioscience公司;TRIzol Reagent、2×Es Taq Master-Mix、dNTP、RNase、5×Buffer購自北京康為世紀(jì)生物科技有限公司;M-MLV購自Invitrogen公司;RNA酶抑制劑購于BioBasic公司;二乙基焦碳酸酯(DEPC)、瓊脂糖購于AMRESCO公司;丙酮、氯仿、異丙醇、無水乙醇購于天津廣成化學(xué)試劑有限公司;內(nèi)參照GAPDH、Foxp-3、ROR-γ引物由上海博尚生物技術(shù)有限公司合成,引物序列見表1;RIPA裂解液購自Beyotime公司;ELISA IL-17A、ELISA IL-6、ELISA TGF-β1試劑盒均購于聯(lián)科生物技術(shù)有限公司。梯度PCR擴(kuò)增儀(Tgradient,Biometra,德國(guó));凝膠成像系統(tǒng)(Alplha ImagerTM 2200,美國(guó));電泳儀、酶標(biāo)儀(Thermo,美國(guó));FACSCalibur流式細(xì)胞儀(Becton Dickinson公司)。

    1.2實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1氣道炎癥動(dòng)物模型建立方法 32只小鼠按隨機(jī)數(shù)字法平均分成對(duì)照組、模型組、阿膠組和黃明膠組。除對(duì)照組外,其余各組每日兩次香煙煙熏,煙熏量10支/次(將軍煙:焦油量11 mg,煙堿含量:1.1 mg,一氧化碳量:11 mg,山東中煙工業(yè)有限責(zé)任公司),具體方法為:每次點(diǎn)然5支香煙插入40×30×20 cm3自制煙熏箱自然燃盡,每次2組,共10支香煙,煙熏時(shí)間共30 min,兩次煙熏間隔 4 h以上,阿膠組小鼠每日給予0.2 ml濃度為0.2 g/ml 阿膠溶液灌胃,黃明膠組小鼠每日給予0.2 ml濃度為0.2 g/ml 黃明膠溶液灌胃,模型組小鼠每日0.2 ml 生理鹽水灌胃,按上述方法造模24周后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

    表1RT-PCR引物序列

    Tab.1RT-PCRprimersequence

    GenePrimer sequenceProductlengthGAPDH5'ACCACAGTCCATGCCATCAC4523'TCCACCACCCTGTTGCTGTAFoxp35'CCCATCCCCAGGAGTCTTG1833'ACCATGACTAGGGGCACTGTAROR-γ5'ACAGGGAGCCAAGTTCTCAGT1903'TCGGTCAATGGGGCAGTTCT

    1.2.2檢測(cè)指標(biāo)及實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.2.1外周血細(xì)胞分類計(jì)數(shù) 眼球取血約1.0 ml 收集于加入EDTA-2Na的抗凝管中,緩緩搖晃使血液充分與抗凝劑接觸,取100 μl加到EP管中,使用pocH-100iv血細(xì)胞分析儀檢測(cè)血細(xì)胞成分。

    1.2.2.2酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定ELISA血清IL-17A、IL-6、TGF-β1因子蛋白表達(dá) 眼球取血約1.0 ml收集于EP管中,離心(4 000 r/min,15 min,4℃)取上清,按照ELISA試劑盒的操作說明檢測(cè)IL-17A、IL-6、TGF-β1因子蛋白水平。

    1.2.2.3肺臟HE染色切片觀察病理改變 小鼠取血后脫頸椎處死,無菌分離肺臟組織。左肺上葉置于4%甲醛溶液中固定72 h,按照常規(guī)方法制作石蠟切片,HE染色評(píng)價(jià)其病理改變。

    1.2.2.4逆轉(zhuǎn)錄-PCR檢測(cè)肺臟Foxp-3、ROR-γ 因子轉(zhuǎn)錄水平 小鼠左肺下葉置于經(jīng)DEPC處理的EP管中,采用TRIzol Reagent提取樣本總mRNA,采用oligo dT為RT反應(yīng)引物,PCR反應(yīng)條件:RNase free water 6.5 μl,Taq酶12.5 μl,RT反應(yīng)產(chǎn)物4 μl,上、下游特異性引物各1 μl,總體積20 μl。PCR循環(huán)參數(shù):預(yù)變性95℃,5 min;94℃,1 min;58℃,1 min;72℃,1 min,30個(gè)循環(huán),末次循環(huán)后72℃延長(zhǎng)10 min。PCR產(chǎn)物經(jīng)1.2%凝膠電泳,結(jié)果采用 Alpha凝膠成像系統(tǒng)分析圖像,以GAPDH為內(nèi)參照,計(jì)算目的基因與同步GAPDH灰度值比值作為相對(duì)表達(dá)量。

    1.2.2.5流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)肺臟Th17及Treg細(xì)胞 小鼠右肺經(jīng)過消化、研磨、破紅、過濾等操作制備單核細(xì)胞懸液,調(diào)整單個(gè)核細(xì)胞濃度(1×106/管)后離心,沉淀用1.5 ml刺激液重懸,置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中37℃,5%CO2,刺激培養(yǎng)6 h后收集細(xì)胞,經(jīng)濾網(wǎng)過濾后轉(zhuǎn)移至EP管中,1×PBS洗2次,離心后棄上清,沉淀加入小鼠血清重懸后室溫避光封閉15 min,按說明書參考抗體濃度加入外標(biāo)抗體(PE-CD3、percp-CD4、percp-cy5.5-CD8、PE-cy5.5-CD25),4℃避光孵育30 min;1×PBS洗2次,加入穿膜固定液500 μl, 4℃固定30 min,固定后細(xì)胞用穿膜液洗2次后加入500 μl穿膜液4℃避光孵育30 min,按說明書加入內(nèi)標(biāo)抗體(APC-cy7-IL-17A、PE-Foxp-3),4℃避光孵育30 min后分別用1×Perm Wash和1×PBS各洗1遍,隨后上機(jī)檢測(cè),采用Flowjo7.6分析Th17 亞群(CD3+CD4+IL-17A+)及Treg亞群(CD3+CD4+CD25+Foxp3+)比例。

    2 結(jié)果

    2.1小鼠外周血血細(xì)胞分析 與對(duì)照組相比,模型組小鼠外周血白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、血小板及血紅蛋白含量均升高(P均<0.05),淋巴細(xì)胞數(shù)量降低(P<0.05);阿膠能夠顯著降低中性粒細(xì)胞數(shù)(P<0.05),黃明膠能夠顯著降低嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)(P<0.05),兩組紅細(xì)胞、血小板及血紅蛋白含量均顯著回落,顯示阿膠和黃明膠能夠使肺臟組織缺氧狀態(tài)得到有效緩解。見表2。

    2.2阿膠、黃明膠對(duì)被動(dòng)吸煙小鼠血清 IL-17A、IL-6 、TGF-β1 因子表達(dá)的影響 血清ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示:被動(dòng)吸煙小鼠肺臟IL-17A、IL-6、TGF-β1因子表達(dá)均顯著升高(P均<0.05);阿膠能夠降低IL-17A、IL-6、TGF-β1蛋白表達(dá)(P<0.05);黃明膠對(duì)IL-17A、IL-6因子影響均不顯著,但可顯著降低TGF-β1蛋白水平(P<0.05),結(jié)果見表3。

    GroupWBC(103/μl)LYM(103/μl)Neutrophil(103/μl)Eosinophils(103/μl)PLT(g/dl)HGB(g/L)RBC(106/μl)C4.07±0.451.84±0.201.74±0.090.61±0.1114.46±0.5616.6±1.810.5±1.4M4.95±0.631)1.51±0.391)2.57±0.111)0.69±0.1216.90±0.661)18.8±2.31)12.6±1.91)E4.36±0.402)1.87±0.241.99±0.122)0.60±0.0214.61±0.722)17.3±1.92)11.2±1.82)H4.71±0.511.94±0.292.42±0.210.51±0.022)16.37±0.6917.0±2.02)11.7±2.02)

    Note:C.Control group;M.Model group;E.Colla Corii Asini group;H.Colla Corii Bovis group.Compared with control group,1)P<0.01;compared with model group,2)P<0.05.

    2.3小鼠肺組織病理切片分析 肺臟切片HE染色顯示:對(duì)照組為正常肺組織結(jié)構(gòu),模型組肺間質(zhì)有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),有紅細(xì)胞滲出,肺間質(zhì)明顯增厚,氣道管壁增厚、管腔變窄;阿膠組和黃明膠組炎性細(xì)胞浸潤(rùn)程度明顯降低,無紅細(xì)胞滲出,肺間質(zhì)增厚不明顯,氣道管壁增厚、管腔變窄情況明顯改善,其中阿膠對(duì)肺臟炎癥的治療效果較黃明膠更為顯著,結(jié)果見圖1。

    2.4阿膠、黃明膠對(duì)被動(dòng)吸煙小鼠肺臟RORγt、Foxp3因子轉(zhuǎn)錄水平的影響 RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示:模型組小鼠肺臟RORγt 及Foxp3 mRNA表達(dá)均顯著升高(P均<0.05);阿膠可顯著降低RORγt mRNA表達(dá),同時(shí)Foxp3 mRNA表達(dá)隨之降低(P<0.05);與模型組相比,黃明膠組RORγt mRNA表達(dá)降低,F(xiàn)oxp3 mRNA表達(dá)升高,但差異均無顯著(P>0.05),結(jié)果見圖2。

    2.5阿膠、黃明膠對(duì)被動(dòng)吸煙小鼠肺臟Th17、Treg細(xì)胞亞群的影響 與對(duì)照組相比,模型組小鼠肺臟Th17 亞群(CD3+CD4+IL-17A+細(xì)胞)比例及細(xì)胞數(shù)目均顯著升高,Treg 亞群(CD3+CD4+CD25+Foxp3+細(xì)胞)比例及細(xì)胞數(shù)目顯著升高;與模型組相比,阿膠組Th17 亞群及Treg 亞群比例和細(xì)胞數(shù)目均顯著降低(P均<0.05),黃明膠組Th17 亞群及Treg 亞群比例及細(xì)胞數(shù)目均未發(fā)生顯著變化(P>0.05),結(jié)果見圖3。

    GroupsIL-17A(ng/L)IL-6(ng/L)TGF-β1(ng/L)C39.72±2.3637.41±3.8932.52±3.75M50.40±4.931)46.47±5.301)41.58±4.961)E42.63±3.072)38.08±5.862)33.33±3.142)H50.57±3.3448.81±4.9725.33±3.142)

    Note:C.Contol group;M.Model group;E.Colla Corii Asini group;H.Colla Corii Bovis group.Compared with control group,1)P<0.01;compared with model group,2)P<0.05.

    圖1 小鼠肺臟組織切片(×200)Fig.1 Paraffin sections with H&E staining of mice lung tissue(×200)Note: C.Contol group,M.Model group;E.Colla Corii Asini group;H.Colla Corii Bovis group.C1,M1,E1,H1.Inflammatory cell infiltration in lung tissue in each group;C2,M2,E2,H2.Airway inflammation in lung tissue in each group.

    圖2 阿膠、黃明膠對(duì)被動(dòng)吸煙小鼠肺臟RORγt、Foxp3因子轉(zhuǎn)錄水平的影響Fig.2 Effect on expression of RORγt,F(xiàn)oxp3 mRNA of Colla Corii Asini and Colla Corii Bovis in mice with chronic cigarette smoke exposureNote: C.Control group;M.Model group;E.Colla Corii Asini group;H.Colla Corii Bovis group.Compared with control group,*.P<0.01;compared with model group,#.P<0.05.

    圖3 阿膠、黃明膠對(duì)被動(dòng)吸煙小鼠肺臟Th17、Treg細(xì)胞亞群比例及細(xì)胞數(shù)目的影響Fig.3 Effects of Colla Corii Asini and Colla Corii Bovis on balance of Th17/Treg cell subsets in lungs of mice with chronic cigarette smoke exposureNote: C.Control group;M.Model group;E.Colla Corii Asini group;H.Colla Corii Bovis group.Compared with control group,*.P<0.01;compared with model group,#.P<0.05.

    3 討論

    眾所周知,吸煙是哮喘、肺氣腫、慢性阻塞性肺炎(COPD)等呼吸道疾病發(fā)生的主要危險(xiǎn)因素[9]。近年來,隨著人們對(duì)吸煙危害的認(rèn)知程度加深,吸煙率呈現(xiàn)逐年下降趨勢(shì),但大氣細(xì)顆粒物(Fine particulate matter,PM2.5)污染問題日益嚴(yán)重,已成為人類呼吸系統(tǒng)面臨的新挑戰(zhàn)[10]。香煙煙霧引發(fā)呼吸道疾病的作用機(jī)制十分復(fù)雜,目前仍未完全闡明,局部免疫失調(diào)導(dǎo)致的持續(xù)炎癥反應(yīng)在疾病的形成、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸中的重要作用被國(guó)內(nèi)外諸多動(dòng)物及人類研究所證實(shí)[11-13],其中,Th17/Treg細(xì)胞亞群平衡及相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)在慢性氣道炎癥性疾病發(fā)病機(jī)制中的作用是當(dāng)前的研究熱點(diǎn)[14,15]。Th17細(xì)胞亞群主要分泌IL-17A等細(xì)胞因子促進(jìn)中性粒細(xì)胞聚集和活化,導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生強(qiáng)烈的炎癥反應(yīng),參與多種炎癥性疾病和自身免疫性疾病,特異性轉(zhuǎn)錄因子ROR-γt在誘導(dǎo)Th17亞群分化中發(fā)揮主導(dǎo)作用;CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)是一類起負(fù)調(diào)節(jié)作用的CD4+CD25+T細(xì)胞亞群,能夠抑制T淋巴細(xì)胞活化,在維持免疫耐受中起著關(guān)鍵性作用,叉頭狀轉(zhuǎn)錄因子3(Foxp3)作為其特征性標(biāo)志同時(shí)也參與其分化和發(fā)育。兩類細(xì)胞均來自初始CD4+T細(xì)胞,其分化過程受多種細(xì)胞因子共同調(diào)節(jié),調(diào)控機(jī)制仍未完全明確。當(dāng)前被多數(shù)研究者接受的觀點(diǎn)為:當(dāng)TGF-β與IL-6同時(shí)存在時(shí),初始T細(xì)胞向Th17細(xì)胞分化,而只有TGF-β的情況下,初始T細(xì)胞向Treg細(xì)胞分化。兩類細(xì)胞在分化過程中互相遏制,功能上相互拮抗,對(duì)于維持體內(nèi)內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定至關(guān)重要[16-18]。當(dāng)呼吸道黏膜上皮細(xì)胞接觸到有害顆粒物后,被激活的抗原提呈細(xì)胞分泌大量IL-6等前炎性細(xì)胞因子,在趨化中性粒細(xì)胞的同時(shí),上調(diào)RORγt表達(dá),Th17亞群特異性趨化轉(zhuǎn)錄因子RORγt誘導(dǎo)初始T細(xì)胞向Th17細(xì)胞分化,加重Th17介導(dǎo)的炎癥反應(yīng),增加的Th17細(xì)胞分泌大量IL-17A等促炎細(xì)胞因子,募集中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)至炎癥組織釋放彈性蛋白酶、基質(zhì)金屬蛋白酶破壞肺組織,刺激更多炎性介質(zhì)釋放;而活化的T細(xì)胞和損傷細(xì)胞修復(fù)過程中分泌大量TGF-β促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)沉積,誘導(dǎo)氣道重塑和纖維化的發(fā)生。Treg細(xì)胞亞群通過分泌IL-10等細(xì)胞因子抑制T淋巴細(xì)胞活化,在炎癥反應(yīng)中表達(dá)上調(diào)發(fā)揮抗炎保護(hù)作用,但體內(nèi)Treg細(xì)胞表達(dá)上調(diào)會(huì)抑制其他免疫細(xì)胞對(duì)癌細(xì)胞的監(jiān)視作用,說明即使未出現(xiàn)肺功能改變,吸煙也是引發(fā)腫瘤產(chǎn)生的重要危險(xiǎn)因素[19]。

    前人研究顯示Th17/Treg細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子在吸煙誘導(dǎo)的氣道炎癥中的作用機(jī)制十分復(fù)雜,實(shí)驗(yàn)結(jié)果的差異可能因個(gè)體耐受程度不同而有所差異,同時(shí)我們也發(fā)現(xiàn)不同的模型構(gòu)建方法雖然能得到相似的病例改變,但作用機(jī)制可能有所差異,如在建立動(dòng)物模型探索COPD的發(fā)病機(jī)制時(shí),單獨(dú)應(yīng)用香煙煙霧與煙熏聯(lián)合脂多糖(LPS)滴鼻,以及香煙煙霧暴露的方法及煙霧劑量、小鼠品系選擇等對(duì)結(jié)果均產(chǎn)生很大影響。一直以來,阿膠以“補(bǔ)血圣藥”著稱,對(duì)各種出血癥及貧血有顯著療效,現(xiàn)代研究也逐漸揭開了阿膠抑制癌細(xì)胞增殖、協(xié)助放化療后機(jī)體免疫重建、抗休克、抗疲勞、美容等藥理功效的作用機(jī)理[3]。但是作為治療肺陰虛咳嗽的常用藥,阿膠治療氣道炎癥的作用機(jī)制鮮有研究報(bào)道。因此,為探明阿膠和黃明治療呼吸道炎癥的效果及作用機(jī)制的異同,同時(shí)發(fā)掘中藥抗霧霾的藥理功效,本研究采用較低劑量香煙煙霧連續(xù)暴露方式建立動(dòng)物模型,且未使用脂多糖誘導(dǎo)急性炎癥反應(yīng),意圖模擬大氣細(xì)顆粒物和被動(dòng)吸煙時(shí)低濃度有害氣體的致病環(huán)境,在此基礎(chǔ)上從組織、細(xì)胞、分子層面上探討阿膠和黃明膠對(duì)氣道炎癥小鼠肺臟保護(hù)作用。結(jié)果顯示:C57BL/6小鼠經(jīng)過24周低劑量香煙煙霧暴露后肺間質(zhì)有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),肺泡破裂融合,出現(xiàn)紅細(xì)胞滲出,氣道上皮細(xì)胞在煙霧顆粒刺激下IL-6、TGF-β等前炎性因子表達(dá)顯著升高,誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等炎性細(xì)胞浸潤(rùn)造成基質(zhì)損傷,同時(shí)通過上調(diào)轉(zhuǎn)錄因子RORγt表達(dá)促進(jìn)Th17細(xì)胞亞群分化,細(xì)胞因子IL-17A表達(dá)升高;組織的不斷損傷和修復(fù)導(dǎo)致肺間質(zhì)明顯增厚,氣道管壁增厚、管腔變窄等氣道重塑過程的發(fā)生,導(dǎo)致呼吸功能受到影響;同時(shí),在低濃度香煙煙霧引發(fā)的慢性氣道炎癥中,Treg細(xì)胞亞群及轉(zhuǎn)錄因子Foxp3表達(dá)上調(diào),原因可能是機(jī)體免疫系統(tǒng)通過上調(diào)Treg細(xì)胞抑制機(jī)體過強(qiáng)的免疫反應(yīng)來保護(hù)宿主,避免因過強(qiáng)的免疫反應(yīng)造成嚴(yán)重病理損害。本研究顯示:阿膠通過下調(diào)細(xì)胞因子IL-6、TGF-β及轉(zhuǎn)錄因子RORγt的表達(dá)降低小鼠肺臟Th17細(xì)胞亞群比例及數(shù)目從而減輕氣道炎癥程度,F(xiàn)oxp3因子表達(dá)和Treg細(xì)胞比例及數(shù)目相應(yīng)降低,肺臟病理切片顯示炎癥情況得到明顯改善,無紅細(xì)胞滲出,肺間質(zhì)增厚、氣道管壁增厚、管腔變窄情況明顯改善。在本研究中,盡管病理切片顯示黃明膠能有效減輕香煙煙霧導(dǎo)致的肺臟炎癥,但細(xì)胞及細(xì)胞因子檢測(cè)未顯示黃明膠對(duì)IL-6、IL-17A因子表達(dá)及Th17細(xì)胞的抑制作用,肺臟Treg細(xì)胞比例及轉(zhuǎn)錄因子Foxp3表達(dá)出現(xiàn)較小幅度的上調(diào),而對(duì)于Th17亞群和Treg亞群重要的活化因子,黃明膠組小鼠血清TGF-β水平卻呈現(xiàn)顯著下降,與其余研究結(jié)果相矛盾,出現(xiàn)這一結(jié)果的原因可能與血清TGF-β與其在肺臟的表達(dá)并不是完全統(tǒng)一,亦有可能是由于實(shí)驗(yàn)誤差或取樣方法有關(guān),需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證;同時(shí),黃明膠治療氣道炎癥的效果不及阿膠,說明古籍中“黃明膠氣味與阿膠同,但非阿井水及驢皮同造,故不能疏利下行耳”雖是從中醫(yī)理論角度進(jìn)行闡釋,但仍具有一定科學(xué)性。另外,本研究選擇的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥劑量是按照阿膠和黃明膠藥品說明書中成人用藥劑量的中等水平換算而來,阿膠和黃明膠對(duì)Th17/Treg細(xì)胞分化的影響是否與給藥劑量有關(guān)仍需進(jìn)一步研究確定。

    猜你喜歡
    阿膠肺臟亞群
    TB-IGRA、T淋巴細(xì)胞亞群與結(jié)核免疫的研究進(jìn)展
    歡迎來到2060年!
    歡迎來到2060年!
    甲狀腺切除術(shù)后T淋巴細(xì)胞亞群的變化與術(shù)后感染的相關(guān)性
    阿膠的小脾氣
    《肺臟介入醫(yī)學(xué)》已出版
    《肺臟介入醫(yī)學(xué)》已出版
    論耳與肺臟的相關(guān)性
    肺臟:隱藏多年的造血器官
    外周血T細(xì)胞亞群檢測(cè)在惡性腫瘤中的價(jià)值
    精品人妻一区二区三区麻豆| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 中文字幕制服av| 波多野结衣巨乳人妻| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲精品,欧美精品| 2018国产大陆天天弄谢| 在现免费观看毛片| 国产片特级美女逼逼视频| 日本wwww免费看| 99热这里只有是精品在线观看| 国产视频首页在线观看| 激情五月婷婷亚洲| a级毛片免费高清观看在线播放| 一级片'在线观看视频| 欧美另类一区| 久久久久久久午夜电影| 日韩强制内射视频| 69人妻影院| 91久久精品国产一区二区成人| 午夜福利在线观看吧| 老司机影院成人| 国产中年淑女户外野战色| 在现免费观看毛片| 久久久久久久久大av| 日韩强制内射视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 免费看光身美女| 国产亚洲一区二区精品| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产综合懂色| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 久久精品国产自在天天线| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国产淫片久久久久久久久| 亚洲天堂国产精品一区在线| 免费av不卡在线播放| 日本午夜av视频| 深爱激情五月婷婷| 最近的中文字幕免费完整| 99热这里只有是精品50| 欧美三级亚洲精品| 亚洲精品乱久久久久久| 2021少妇久久久久久久久久久| av线在线观看网站| 亚洲成人av在线免费| 少妇被粗大猛烈的视频| 精品久久久久久久末码| 亚洲天堂国产精品一区在线| 天堂中文最新版在线下载 | 国产精品无大码| 日韩强制内射视频| 亚洲成人一二三区av| 免费看不卡的av| 国产高潮美女av| 日韩欧美三级三区| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲欧美成人精品一区二区| 久久6这里有精品| 免费看美女性在线毛片视频| 大香蕉97超碰在线| 久久久久久久亚洲中文字幕| 天堂中文最新版在线下载 | 精品久久久久久久久亚洲| 最近视频中文字幕2019在线8| 久久精品夜色国产| 日韩成人伦理影院| 亚洲无线观看免费| 晚上一个人看的免费电影| 国产成人a∨麻豆精品| 亚洲成人中文字幕在线播放| 大话2 男鬼变身卡| 国内揄拍国产精品人妻在线| 51国产日韩欧美| 丝袜美腿在线中文| 久久综合国产亚洲精品| 69av精品久久久久久| 校园人妻丝袜中文字幕| 97热精品久久久久久| 亚洲国产色片| 超碰97精品在线观看| 日韩欧美国产在线观看| 亚洲人成网站在线观看播放| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产伦在线观看视频一区| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 99久久中文字幕三级久久日本| 午夜老司机福利剧场| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 国产 亚洲一区二区三区 | 日本av手机在线免费观看| 又爽又黄无遮挡网站| 国产一区二区三区综合在线观看 | 两个人的视频大全免费| or卡值多少钱| 熟妇人妻不卡中文字幕| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 综合色av麻豆| 久久97久久精品| 国产精品嫩草影院av在线观看| 色视频www国产| 观看免费一级毛片| 国产成人午夜福利电影在线观看| 久久久久国产网址| 熟女电影av网| 蜜臀久久99精品久久宅男| 亚洲怡红院男人天堂| 日韩强制内射视频| 国产精品嫩草影院av在线观看| 亚洲国产成人一精品久久久| 最近中文字幕2019免费版| 日韩大片免费观看网站| 成人av在线播放网站| 精品久久久噜噜| av网站免费在线观看视频 | 国产色爽女视频免费观看| 永久网站在线| 国产精品精品国产色婷婷| 国产v大片淫在线免费观看| 国产黄片美女视频| 国产黄a三级三级三级人| 精品人妻熟女av久视频| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 国产色爽女视频免费观看| 永久免费av网站大全| 国产精品日韩av在线免费观看| 一级黄片播放器| 久久久久久久久久成人| 午夜免费男女啪啪视频观看| 日日啪夜夜撸| 天天躁日日操中文字幕| 成人一区二区视频在线观看| 少妇人妻一区二区三区视频| 亚洲精品国产av成人精品| 午夜精品一区二区三区免费看| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 国产视频首页在线观看| 99久国产av精品| 网址你懂的国产日韩在线| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 97超碰精品成人国产| 亚洲熟女精品中文字幕| 男人和女人高潮做爰伦理| av专区在线播放| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 日本av手机在线免费观看| 熟妇人妻不卡中文字幕| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 韩国高清视频一区二区三区| 国产av码专区亚洲av| 亚洲国产欧美人成| 欧美丝袜亚洲另类| 欧美人与善性xxx| 男人舔女人下体高潮全视频| 亚洲国产最新在线播放| 尾随美女入室| 美女国产视频在线观看| 97精品久久久久久久久久精品| 国产伦一二天堂av在线观看| 国产成年人精品一区二区| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 伊人久久精品亚洲午夜| 美女国产视频在线观看| 麻豆av噜噜一区二区三区| 亚洲色图av天堂| 亚洲av免费在线观看| 国产麻豆成人av免费视频| 国产精品99久久久久久久久| 爱豆传媒免费全集在线观看| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 日本免费a在线| 亚洲成人一二三区av| 久久久久久久久久人人人人人人| 777米奇影视久久| 免费在线观看成人毛片| 欧美三级亚洲精品| 嫩草影院精品99| 亚洲精品国产av蜜桃| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 亚洲内射少妇av| 欧美3d第一页| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 久久精品久久精品一区二区三区| 久久久精品免费免费高清| 少妇人妻一区二区三区视频| 乱系列少妇在线播放| 久久久久国产网址| 日韩强制内射视频| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲精品aⅴ在线观看| 深爱激情五月婷婷| 啦啦啦韩国在线观看视频| 欧美日韩在线观看h| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 老女人水多毛片| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 欧美激情在线99| 日韩视频在线欧美| 久久精品国产自在天天线| 日日摸夜夜添夜夜爱| 丝袜喷水一区| 久久久久精品久久久久真实原创| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲av二区三区四区| 2018国产大陆天天弄谢| 特大巨黑吊av在线直播| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 亚洲欧美成人综合另类久久久| 亚洲精品日本国产第一区| 欧美日本视频| 亚州av有码| 人妻系列 视频| 欧美最新免费一区二区三区| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 午夜精品国产一区二区电影 | 两个人的视频大全免费| 国产视频首页在线观看| 国产成人精品一,二区| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 精品久久久久久久末码| 欧美激情国产日韩精品一区| 午夜激情久久久久久久| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 免费观看在线日韩| 丝袜美腿在线中文| 久久久久免费精品人妻一区二区| 午夜激情久久久久久久| 直男gayav资源| 22中文网久久字幕| 男插女下体视频免费在线播放| 欧美变态另类bdsm刘玥| 丰满人妻一区二区三区视频av| 天堂俺去俺来也www色官网 | 91精品伊人久久大香线蕉| 日韩一区二区视频免费看| 国产极品天堂在线| 国产淫片久久久久久久久| www.av在线官网国产| 午夜激情久久久久久久| 高清在线视频一区二区三区| 欧美日韩在线观看h| 毛片女人毛片| 国产毛片a区久久久久| 爱豆传媒免费全集在线观看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 成人毛片60女人毛片免费| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国产男人的电影天堂91| 国产久久久一区二区三区| 中文字幕av成人在线电影| av在线播放精品| 欧美一级a爱片免费观看看| 少妇丰满av| 51国产日韩欧美| 精品不卡国产一区二区三区| 成人漫画全彩无遮挡| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 日本一二三区视频观看| 亚洲色图av天堂| 男女国产视频网站| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 男人爽女人下面视频在线观看| 人妻一区二区av| 国产成年人精品一区二区| 中文字幕免费在线视频6| 亚洲av中文av极速乱| 婷婷色综合www| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 丰满乱子伦码专区| 成人欧美大片| 少妇的逼好多水| 乱码一卡2卡4卡精品| 深夜a级毛片| 97精品久久久久久久久久精品| av.在线天堂| 在线观看免费高清a一片| 国产亚洲精品av在线| 久久人人爽人人爽人人片va| 欧美一级a爱片免费观看看| 亚洲国产av新网站| 又爽又黄无遮挡网站| 男女啪啪激烈高潮av片| 成人性生交大片免费视频hd| 永久免费av网站大全| 亚洲va在线va天堂va国产| 女人久久www免费人成看片| 一级毛片久久久久久久久女| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 精品久久久久久久久av| 国产免费又黄又爽又色| 亚州av有码| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲成人中文字幕在线播放| 久热久热在线精品观看| av播播在线观看一区| 国产麻豆成人av免费视频| 日本黄大片高清| 日韩欧美精品免费久久| 少妇高潮的动态图| 国产免费视频播放在线视频 | 最近手机中文字幕大全| 黄色一级大片看看| 两个人视频免费观看高清| av在线亚洲专区| 色综合站精品国产| 国产午夜精品一二区理论片| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 我的老师免费观看完整版| 精品久久久精品久久久| 插逼视频在线观看| 性插视频无遮挡在线免费观看| 欧美人与善性xxx| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 欧美极品一区二区三区四区| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 亚洲自偷自拍三级| 丝袜喷水一区| 亚洲国产欧美在线一区| av在线老鸭窝| 精品国产三级普通话版| 99久久人妻综合| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 日韩亚洲欧美综合| 久久久久久久久久久免费av| 亚洲国产精品成人综合色| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲欧洲国产日韩| 久久精品国产亚洲av天美| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 在线播放无遮挡| 精品久久国产蜜桃| 亚洲天堂国产精品一区在线| 美女黄网站色视频| 久久99热这里只频精品6学生| 日韩视频在线欧美| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 久热久热在线精品观看| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 欧美xxxx性猛交bbbb| 麻豆久久精品国产亚洲av| 偷拍熟女少妇极品色| 国产探花在线观看一区二区| 亚洲精品乱久久久久久| 亚洲av不卡在线观看| 中文天堂在线官网| 能在线免费观看的黄片| 男女边摸边吃奶| 熟女人妻精品中文字幕| 午夜福利在线在线| 亚洲一区高清亚洲精品| 日韩欧美精品v在线| 麻豆av噜噜一区二区三区| 边亲边吃奶的免费视频| 简卡轻食公司| 国产乱人视频| videossex国产| 老司机影院毛片| 男女视频在线观看网站免费| 国产探花极品一区二区| 国产高清有码在线观看视频| 免费av观看视频| 青春草亚洲视频在线观看| 十八禁国产超污无遮挡网站| 精品久久久久久电影网| 夫妻性生交免费视频一级片| 偷拍熟女少妇极品色| 成人综合一区亚洲| 亚州av有码| 亚洲在线观看片| 人妻夜夜爽99麻豆av| 麻豆成人午夜福利视频| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 国产精品嫩草影院av在线观看| 天堂中文最新版在线下载 | 国产精品久久视频播放| 搞女人的毛片| 毛片一级片免费看久久久久| 国产亚洲精品av在线| 亚洲av成人av| 国产激情偷乱视频一区二区| 最近最新中文字幕免费大全7| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 成人国产麻豆网| 在线免费观看不下载黄p国产| 久久精品人妻少妇| 久久久色成人| 熟女电影av网| 国产老妇伦熟女老妇高清| 99久久九九国产精品国产免费| 毛片一级片免费看久久久久| 麻豆成人av视频| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 久久这里有精品视频免费| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 国产亚洲一区二区精品| 男女下面进入的视频免费午夜| 最近2019中文字幕mv第一页| 久久99精品国语久久久| 成人二区视频| 少妇人妻一区二区三区视频| 内地一区二区视频在线| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产视频内射| 男女边摸边吃奶| 青春草国产在线视频| 亚洲欧美精品自产自拍| 亚洲精品第二区| 国产av在哪里看| 亚洲国产精品成人久久小说| 男女边摸边吃奶| 能在线免费观看的黄片| 亚洲自拍偷在线| 晚上一个人看的免费电影| 亚洲自拍偷在线| 欧美极品一区二区三区四区| 国产 一区精品| 中文字幕制服av| 深夜a级毛片| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 七月丁香在线播放| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 美女黄网站色视频| 老女人水多毛片| 床上黄色一级片| 男女那种视频在线观看| a级毛片免费高清观看在线播放| 日韩电影二区| 久久久精品欧美日韩精品| 免费观看精品视频网站| av又黄又爽大尺度在线免费看| a级一级毛片免费在线观看| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 欧美成人午夜免费资源| 婷婷色综合大香蕉| 丝袜喷水一区| 亚州av有码| 赤兔流量卡办理| 亚洲av成人av| 在线播放无遮挡| av一本久久久久| 久久久久久久久久久丰满| 777米奇影视久久| 亚洲av成人精品一区久久| 午夜激情久久久久久久| 国产精品久久久久久久电影| 69人妻影院| 日韩国内少妇激情av| 久久97久久精品| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 春色校园在线视频观看| 日日啪夜夜撸| 丝瓜视频免费看黄片| 亚洲av免费在线观看| 少妇的逼水好多| 国产综合精华液| 黄色日韩在线| 亚洲av免费高清在线观看| 婷婷色麻豆天堂久久| 成人亚洲精品av一区二区| 最近最新中文字幕免费大全7| 国产伦精品一区二区三区四那| 视频中文字幕在线观看| 插逼视频在线观看| 一级黄片播放器| 久久久久精品久久久久真实原创| 欧美97在线视频| 国产高清国产精品国产三级 | 欧美97在线视频| av在线天堂中文字幕| 一个人看的www免费观看视频| 高清欧美精品videossex| 亚洲av中文av极速乱| 久久久久久久国产电影| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲无线观看免费| 丰满少妇做爰视频| 婷婷色麻豆天堂久久| 熟妇人妻不卡中文字幕| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 亚洲在久久综合| 一级毛片我不卡| 欧美精品一区二区大全| 亚洲人与动物交配视频| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 精品国内亚洲2022精品成人| www.av在线官网国产| 午夜亚洲福利在线播放| 伦精品一区二区三区| 淫秽高清视频在线观看| 久久精品国产亚洲av天美| 看非洲黑人一级黄片| 亚洲四区av| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 男女下面进入的视频免费午夜| 好男人在线观看高清免费视频| 三级国产精品欧美在线观看| 丝袜美腿在线中文| 三级经典国产精品| or卡值多少钱| 免费av观看视频| 在线观看一区二区三区| 亚洲av电影不卡..在线观看| 成人亚洲欧美一区二区av| 69av精品久久久久久| 色5月婷婷丁香| 青青草视频在线视频观看| 欧美潮喷喷水| 五月玫瑰六月丁香| 直男gayav资源| 99久久中文字幕三级久久日本| 熟妇人妻不卡中文字幕| 99久久精品热视频| 欧美成人精品欧美一级黄| 精华霜和精华液先用哪个| 免费在线观看成人毛片| 欧美日韩在线观看h| 特大巨黑吊av在线直播| 久久99蜜桃精品久久| 又爽又黄无遮挡网站| 国产av在哪里看| 国产精品伦人一区二区| 男女边摸边吃奶| 欧美丝袜亚洲另类| 成年女人看的毛片在线观看| 国产男人的电影天堂91| 可以在线观看毛片的网站| 99热网站在线观看| 十八禁国产超污无遮挡网站| 精品久久久久久久久亚洲| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 街头女战士在线观看网站| 日韩亚洲欧美综合| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 精品久久久久久成人av| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 超碰97精品在线观看| 2022亚洲国产成人精品| 久久精品久久久久久久性| 日韩av在线免费看完整版不卡| 三级国产精品片| 一区二区三区高清视频在线| 久久人人爽人人片av| 91av网一区二区| 一级爰片在线观看| 国产视频首页在线观看| 九九在线视频观看精品| 久久久久网色| 久久这里只有精品中国| 国产高清三级在线| 日本免费a在线| 波野结衣二区三区在线| 国产精品国产三级国产专区5o| 少妇人妻一区二区三区视频| 青春草视频在线免费观看| 男女国产视频网站| 熟女电影av网| 51国产日韩欧美| 七月丁香在线播放| 午夜免费观看性视频| videossex国产| 91久久精品电影网| 精品久久久久久成人av| 国产成年人精品一区二区| 欧美激情久久久久久爽电影| 亚洲综合精品二区| 欧美日韩在线观看h| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 搡老乐熟女国产| 欧美激情国产日韩精品一区| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲真实伦在线观看| 真实男女啪啪啪动态图| 国产精品一区二区三区四区久久| 伦理电影大哥的女人| 亚洲va在线va天堂va国产| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 午夜精品国产一区二区电影 | 国产成年人精品一区二区| 成人午夜精彩视频在线观看| 久久久久九九精品影院| 亚洲精品亚洲一区二区| 观看免费一级毛片| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲第一区二区三区不卡| 久久久久性生活片| 五月玫瑰六月丁香| 国产精品人妻久久久久久| 国产亚洲精品久久久com| 22中文网久久字幕| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 欧美xxxx性猛交bbbb| 高清日韩中文字幕在线| 美女被艹到高潮喷水动态| 亚洲国产最新在线播放| 精品国产露脸久久av麻豆 | 亚洲av二区三区四区| 韩国高清视频一区二区三区| 国产一区二区在线观看日韩| 波多野结衣巨乳人妻| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 男女边摸边吃奶| 亚洲av电影不卡..在线观看|