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(大連海洋大學(xué) 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部北方海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,遼寧 大連 116023)
刺參Apostichopusjaponicus因食用價(jià)值和藥用價(jià)值均較高,已在中國(guó)得到廣泛養(yǎng)殖,是中國(guó)北方重要的海水養(yǎng)殖品種,具有重要的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。中國(guó)北方多用池塘養(yǎng)殖模式養(yǎng)殖刺參,雨季、潮汐變化及冰凍都會(huì)導(dǎo)致海水鹽度急劇變化,江河入海口附近,雨季易受到江河徑流的影響,池塘中的海水可能數(shù)日處于低鹽狀態(tài)[1],鹽度變化對(duì)刺參的存活和生長(zhǎng)發(fā)育具有重要影響,也是對(duì)刺參養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)造成較大威脅甚至造成重大經(jīng)濟(jì)損失的因素之一[2]。
刺參的鹽度耐受范圍較小,極限生長(zhǎng)鹽度范圍為15~40,適宜生長(zhǎng)的鹽度為20~35,最適生長(zhǎng)鹽度為25~30。龔海濱等[3]研究發(fā)現(xiàn),刺參對(duì)低鹽度和高鹽度海水極度不適應(yīng),會(huì)導(dǎo)致刺參大量死亡,且在低鹽度海水中,其死亡速度快于高鹽度海水。張少華等[4]研究表明,鹽度驟降會(huì)使刺參出現(xiàn)吐腸排臟或個(gè)別化皮等應(yīng)激反應(yīng)。在海水鹽度為18時(shí)達(dá)到最低耐受限,低鹽時(shí)間過(guò)長(zhǎng),刺參會(huì)大量死亡。庚宸帆等[1]研究發(fā)現(xiàn),鹽度脅迫對(duì)刺參滲透調(diào)節(jié)能力有顯著影響,體腔液滲透壓與體腔液Na+、K+、Cl-離子濃度有一定的相關(guān)性。Geng等[5]研究了鹽度對(duì)刺參不同組織結(jié)構(gòu)的影響,發(fā)現(xiàn)不同鹽度下刺參各器官及組織會(huì)發(fā)生顯著變化,其中腸、管足及縱肌變化最明顯。鹽度越低,對(duì)組織的破壞程度越明顯,損傷程度也會(huì)更大。
近年來(lái),對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物鹽度調(diào)控相關(guān)基因的研究取得了一定的進(jìn)展。有研究表明,水通道蛋白(AQP)在三疣梭子蟹Portunustrituberculatus[6]、花鰻鱺Anguillamarmorata[7]、薩羅羅非魚(yú)Sarotherodonmelanotheron[8]、尼羅羅非魚(yú)Tilapianilotica[9]、刀鱭Coilianasus[10]和香港牡蠣Crassostreahongkongensis[11]等物種中的滲透調(diào)節(jié)作用已被證實(shí)。離子轉(zhuǎn)運(yùn)酶,如Na+/K+-ATPase、V-H+-ATPase、F-H+-ATPase和碳酸酐酶等在滲透調(diào)節(jié)器官中起主要作用,可維持機(jī)體正常的生理代謝水平,并通過(guò)參與主動(dòng)調(diào)節(jié)體內(nèi)的離子含量和細(xì)胞體積[12]。NKA基因在高鹽和低鹽適應(yīng)過(guò)程中均起到維持體內(nèi)滲透平衡的作用,NKA基因在海水蝦[13]和大西洋鱈Gadusmorhua[14]、金頭鯛SparusaurataL.[15]、漠斑牙鲆Paralichthyslethostigma[16]、尼羅羅非魚(yú)[17]等硬骨魚(yú)類(lèi)滲透調(diào)節(jié)中的作用已被證實(shí)。Na+/H+-exchanger蛋白基因在三疣梭子蟹低鹽環(huán)境下發(fā)揮重要的滲透調(diào)節(jié)功能[18]。胞質(zhì)碳酸酐酶基因(Cytoplasmic carbonic anhydrase,CAc)在凡納濱對(duì)蝦Litopenaeusvannamei和三疣梭子蟹高低鹽環(huán)境下均響應(yīng),而磷脂酰肌醇連(Clycosyl-phophatidylinostitol-linked Carbonic Anhydrase,CAg)只對(duì)低鹽響應(yīng)[19]。囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子(CFTR)基因在舌齒鱸Dicentrarchuslabrax機(jī)體對(duì)水環(huán)境鹽度變化的應(yīng)激反應(yīng)和調(diào)節(jié)中發(fā)揮作用[20]。免疫球蛋白M (Immunoglobulin M, IgM) 在紅鰭東方鲀Takifugurubripes幼魚(yú)的鹽度滲透調(diào)節(jié)過(guò)程中發(fā)揮作用[21]。熱休克蛋白70(Hsp70)和鈉鉀氯協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(Na-K-Clcotransporter 1, NKCC1)基因在黑點(diǎn)青鳉魚(yú)Oryziasdancena[22]、吉麗羅非魚(yú)[23]和紅鰭東方鲀[21]幼魚(yú)中參與滲透壓調(diào)節(jié)。其中,NKCC1基因能通過(guò)維持細(xì)胞較高的鈉鉀離子滲透梯度,從而提高海水蝦在高鹽環(huán)境的適應(yīng)能力,而RhoGDI基因可通過(guò)調(diào)整細(xì)胞內(nèi)離子濃度,使細(xì)胞在淡水環(huán)境下得以生存,在調(diào)控淡水蝦的滲透調(diào)控中起到重要作用[13]。
AMPK 3個(gè)亞基參與凡納濱對(duì)蝦低鹽滲透脅迫[24]和大菱鲆Scophthalmusmaximus鹽度滲透脅迫過(guò)程[25]。胞內(nèi)氯離子通道蛋白基因PtCLIC[26]、幾丁質(zhì)酶基因PtChtc[27]在三疣梭子蟹的滲透壓調(diào)節(jié)中發(fā)揮作用。Commd1基因(Copper Metabolism Murr 1 Domain)在香港牡蠣發(fā)育和滲透壓調(diào)節(jié)方面可能發(fā)揮作用[28]。花鱸LateolabraxmaculatusGH/IGF軸可能是通過(guò)增加GHRs,進(jìn)而激活下游IGF-1表達(dá)而實(shí)現(xiàn)參與低滲調(diào)控[29]。
目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)刺參鹽度適應(yīng)機(jī)制相關(guān)基因的研究相對(duì)較少。DD104基因的表達(dá)可能與刺參滲透脅迫有關(guān)[30]。有研究表明,Hsp70及Hsp90基因是刺參在鹽度脅迫下的重要響應(yīng)因子[31]。甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因、Hsp70和神經(jīng)乙酰膽堿受體基因參與刺參的低鹽調(diào)節(jié)適應(yīng)過(guò)程[2]。本研究中,選取刺參單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族16a13(Monocarboxylate Transporters 13,SLC16a13)基因、單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族6a8(Solute Carrier Family 6 Member 8,SLC6a8)基因、甲殼素受體蛋白(Fibrinogen C Domain-Containing Protein 1,F(xiàn)IBCD1)基因和AMPA型谷氨酸受體1(Glutamate Ionotropic Receptor AMPA Type Subunit 1,Gria1)基因,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量技術(shù),探究4個(gè)基因在刺參體腔液、腸和呼吸樹(shù)中不同脅迫時(shí)間下的表達(dá),以期豐富刺參的生理學(xué)理論,為刺參健康養(yǎng)殖提供科學(xué)依據(jù)。
試驗(yàn)用刺參取自遼寧省大連市瓦房店附近海域,暫養(yǎng)于大連海洋大學(xué)北方海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室同一養(yǎng)殖池中,水溫保持在(16.0±1.0)℃,試驗(yàn)前稱(chēng)量其體質(zhì)量,刺參的平均濕質(zhì)量為(16.93±3.08)g。
1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 將正常養(yǎng)殖條件下(鹽度為30,低鹽脅迫0 h)的刺參作為對(duì)照組,低鹽脅迫不同時(shí)間段的刺參作為試驗(yàn)組。試驗(yàn)用水為自來(lái)水曝氣24 h后與天然海水配制成鹽度為18的海水。將刺參放入鹽度為18的海水中進(jìn)行脅迫,并分別在脅迫后1.5、3、6、12、24、48和72 h進(jìn)行取樣,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)取3頭刺參,分別取對(duì)照組及不同脅迫時(shí)間點(diǎn)刺參的腸、呼吸樹(shù)、體腔液,體腔液以3000 r/min離心10 min,獲得體腔細(xì)胞。最后將各組織保存于超低溫冰箱(-80 ℃)中備用。
1.2.2 引物設(shè)計(jì)與篩選 從刺參被鹽度脅迫后的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫(kù)表達(dá)譜中篩選出SLC16a13、SLC6a8、FIBCD1和Gria1 4個(gè)基因,以β-actin作為內(nèi)參基因。以上引物均由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。試驗(yàn)所用引物見(jiàn)表1。
1.2.3 熒光定量 PCR 總RNA提取后分別檢測(cè)其濃度和完整性,然后反轉(zhuǎn)錄合成cDNA第一條鏈,之后保存于冰箱(-20 ℃)中,合成的模板等量混合,以減少個(gè)體差異,使用SYBR?Premix ExTaqTMII(TaKaRa),在ABI 7500 Real-Time PCR擴(kuò)增儀上進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
以正常鹽度30為對(duì)照組,每一個(gè)時(shí)間點(diǎn)設(shè)置3個(gè)重復(fù),對(duì)于任意一個(gè)樣品,計(jì)算目標(biāo)基因和內(nèi)參基因(β-actin)的△△Ct值,取平均值后再用2-△△Ct法計(jì)算基因的相對(duì)表達(dá)量。用SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn),差異顯著性水平設(shè)為0.05。
表1 熒光定量PCR所用引物Tab.1 Primers for Real-time PCR used in the experiment
刺參受低鹽脅迫后,SLC16a13基因在刺參各組織中的表達(dá)情況如圖1所示。在體腔液中,與對(duì)照組(0 h,鹽度為30)相比,SLC16a13基因的表達(dá)量在1.5、3、24、72 h時(shí)間點(diǎn)無(wú)顯著性變化(P>0.05),在6、12、48 h時(shí)間點(diǎn)表達(dá)量顯著上調(diào)(P<0.05);在腸組織中,SLC16a13基因的表達(dá)量在1.5、3 h時(shí)間點(diǎn)無(wú)顯著性變化(P>0.05),在其余時(shí)間點(diǎn)表達(dá)量均顯著上調(diào)(P<0.05),在72 h時(shí)達(dá)到最高;在呼吸樹(shù)組織中,SLC16a13基因表達(dá)量在各時(shí)間點(diǎn)均顯著上調(diào)(P<0.05),在72 h時(shí)表達(dá)量達(dá)到最高。在同一脅迫時(shí)間段,1.5、3 h時(shí)體腔液和呼吸樹(shù)中表達(dá)量顯著高于腸組織(P<0.05),72 h時(shí)腸組織中表達(dá)量最高,其他時(shí)間段SLC16a13在體腔液中表達(dá)量均最高,顯著高于腸和呼吸樹(shù)(P<0.05)。
刺參受低鹽脅迫后,SLC6a8基因在腸和呼吸樹(shù)組織中的表達(dá)情況如圖2所示,在體腔液中的表達(dá)情況如圖3所示。在腸組織中,與對(duì)照組(0 h,鹽度30)相比,SLC6a8基因在3、48 h時(shí)表達(dá)量上調(diào),在其余時(shí)間點(diǎn)該基因表達(dá)量下調(diào);在呼吸樹(shù)組織中,在3、12、24 h時(shí)該基因表達(dá)量上調(diào),12 h時(shí)達(dá)到最高,在其余時(shí)間點(diǎn)表達(dá)量下調(diào),72 h時(shí)達(dá)到最低;在體腔液中,各個(gè)時(shí)間點(diǎn)該基因表達(dá)量均高于對(duì)照組,其中在3 h時(shí)表達(dá)量顯著上調(diào)(P<0.05),其余時(shí)間段表達(dá)量均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。在低鹽脅迫同一時(shí)間段中,體腔液中表達(dá)量均顯著高于腸和呼吸樹(shù)(P<0.05)。
注:不同小寫(xiě)字母表示同一組織在低鹽脅迫不同時(shí)間段存在顯著性差異(P<0.05);不同大寫(xiě)字母表示同一低鹽脅迫時(shí)間段不同組織之間存在顯著性差異(P<0.05),標(biāo)有相同字母者表示組間無(wú)顯著性差異(P>0.05),下同Note: Different lowercase letters indicate significant difference (P<0.05) within the same tissue in different periods of low salinity stress;different capital letters indicate significant difference (P<0.05) among different tissues in the same stress period, and the means with the same letters are not significant differences(P>0.05),et sequentia圖1 低鹽(18)脅迫下單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族16a13基因在刺參各組織中不同脅迫時(shí)段的表達(dá)Fig.1 SLC16a13 gene expression in different issues of the sea cucumber exposed to low salinity (18) stress for various period
圖2 低鹽(18)脅迫下單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族6a8基因在刺參腸和呼吸樹(shù)各組織中不同脅迫時(shí)段的表達(dá)Fig.2 SLC6a8 gene expression in intestine and respiratory tree the sea cucumber exposed to low salinity (18) stress for various period
圖3 低鹽(18)脅迫下單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族6a8基因在體腔液中不同脅迫時(shí)段的表達(dá)Fig.3 SLC6a8 gene expression in coelomic fluid of the sea cucumber exposed to low salinity (18) stress for various periods
刺參受低鹽脅迫后,F(xiàn)IBCD1基因在刺參各組織中的表達(dá)情況如圖4所示。在體腔液中,與對(duì)照組(0 h,鹽度30)相比,除72 h時(shí)表達(dá)量下調(diào)外,其余各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)量均上調(diào),在1.5、6、12 h時(shí)表達(dá)量均顯著升高(P<0.05),在其他各時(shí)間點(diǎn)該基因表達(dá)量無(wú)顯著性變化(P>0.05)。在腸組織中,與對(duì)照組相比,在1.5 h時(shí)表達(dá)量無(wú)顯著性變化(P>0.05),在12 h時(shí)表達(dá)量顯著上調(diào)(P<0.05),在其余各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)量均顯著下調(diào)(P<0.05)。在呼吸樹(shù)組織中,在24、72 h時(shí)表達(dá)量下調(diào),但與對(duì)照組無(wú)顯著性差異(P>0.05),在其余時(shí)間點(diǎn)表達(dá)量均有所下調(diào)。在同一脅迫時(shí)間段,脅迫前期(1.5~24 h)體腔液中表達(dá)量顯著高于腸和呼吸樹(shù)(P<0.05),后期72 h時(shí)表達(dá)量下調(diào)至低于腸和呼吸樹(shù)(P<0.05)。
圖4 低鹽(18)脅迫下甲殼素受體蛋白基因在刺參各組織中不同脅迫時(shí)段的表達(dá)Fig.4 FIBCD1 gene expression in different issues of the sea cucumber exposed to low salinity (18) for various periods
刺參受低鹽脅迫后,Gria1基因在各組織中的表達(dá)情況如圖5所示。與對(duì)照組(0 h,鹽度30)相比,在體腔液中,表達(dá)量在3、6、24 h時(shí)無(wú)顯著性差異(P>0.05),在1.5、48 h時(shí)顯著上調(diào)(P<0.05),72 h時(shí)顯著下調(diào)(P<0.05)。在腸組織中,該基因表達(dá)量總體趨勢(shì)為上調(diào),并于6 h時(shí)達(dá)到最高。在呼吸樹(shù)組織中,除72 h以外,在其他時(shí)間點(diǎn)該基因表達(dá)量均下調(diào),且顯著低于對(duì)照組(P<0.05),72 h時(shí)表達(dá)量略高于對(duì)照組(P>0.05)。同一脅迫時(shí)間點(diǎn),1.5 h時(shí)體腔液中Griai的表達(dá)量顯著高于其他組織(P<0.05),其他時(shí)間點(diǎn)(12 h時(shí)除外),Gria1在腸組織的表達(dá)量均顯著高于其他組織(P<0.05)。
圖5 低鹽(18)脅迫下谷氨酸離子受體AMPA型亞基1基因在刺參各組織中不同脅迫時(shí)段的表達(dá)Fig.5 Gria1 gene expression in different issues of the sea cucumber exposed to low salinity (18) for various periods
單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族16a13,又稱(chēng)MCT13,屬于溶質(zhì)運(yùn)載蛋白家族SLC16A亞家族成員,是一類(lèi)跨膜蛋白,負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)運(yùn)乙酰乙酸、酮體和乳酸等物質(zhì),在維持細(xì)胞正常pH值環(huán)境和能量代謝方面發(fā)揮著重要作用[32]。目前,已發(fā)現(xiàn)該家族有14個(gè)成員。研究表明,MCTs具有偶聯(lián)轉(zhuǎn)運(yùn)細(xì)胞新陳代謝中產(chǎn)生的單羧酸與質(zhì)子的功能[33]。Hirai等[34]研究發(fā)現(xiàn),MCT13在小鼠肝臟和小腸中被PPAR-α激動(dòng)劑誘導(dǎo),表明該轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白可能參與營(yíng)養(yǎng)攝取。Nowik等[35]研究調(diào)查小鼠腎臟轉(zhuǎn)錄組的變化,檢測(cè)到SLC16家族的SLC16a13(MCT13)mRNA表達(dá)水平有變化。Patel等[36]在研究溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在重要組織中的作用中多個(gè)溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白均表現(xiàn)出上調(diào)表達(dá),其中包括MCT13基因在肝臟組織中被上調(diào)表達(dá),由此認(rèn)為多種組織中的各種溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的穩(wěn)態(tài)表達(dá)是精心調(diào)控的。本研究結(jié)果表明,刺參受低鹽脅迫后SLC16a13基因在各組織中總體表現(xiàn)為上調(diào)表達(dá),說(shuō)明該基因參與刺參的鹽度適應(yīng)過(guò)程。
單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族6是通過(guò)將溶質(zhì)耦合到氯與鈉轉(zhuǎn)運(yùn)體,沿著電化學(xué)梯度共轉(zhuǎn)運(yùn)介導(dǎo)溶質(zhì)穿過(guò)質(zhì)膜[37]。SLC6a8屬于單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族6成員之一,是一種質(zhì)膜蛋白,其功能是將肌酸轉(zhuǎn)入或者轉(zhuǎn)出細(xì)胞,也稱(chēng)為肌酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。其相關(guān)途徑包括蛋白激酶介導(dǎo)的磷酸化和脫蛋白,具備神經(jīng)遞質(zhì)和鈉同向轉(zhuǎn)運(yùn)體活性,是攝取肌酸的必需品[38]。肌酸和磷酸肌酸在磷酸鹽結(jié)合能的儲(chǔ)存和傳輸中起到重要作用,為細(xì)胞提供能量[39]。
有研究表明,肌酸在Na+/K+-ATP酶活性、神經(jīng)遞質(zhì)釋放、維持膜電位、Ca2+穩(wěn)態(tài)和離子梯度恢復(fù)方面具有重要作用[40]。研究表明,SLC6a8基因在包括骨骼肌、腎臟、小腸、心臟、腦和視網(wǎng)膜在內(nèi)的各種組織中表達(dá)[41]。由于肌酸可逆地結(jié)合磷酸鹽,可能會(huì)補(bǔ)充機(jī)體短期內(nèi)ATP能量的耗竭[42],其細(xì)胞的積累能夠支持細(xì)胞具備儲(chǔ)存代謝能量的能力。本研究結(jié)果表明,低鹽脅迫過(guò)程中,SLC6a8基因在腸和呼吸樹(shù)中的表達(dá)總體呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),這說(shuō)明在鹽度脅迫過(guò)程中,刺參可能需要SLC6a8基因的表達(dá)變化來(lái)調(diào)節(jié)刺參機(jī)體中肌酸的運(yùn)輸,進(jìn)而為刺參的鹽度適應(yīng)過(guò)程提供能量需求。SLC6a8基因在體腔液的表達(dá)一直呈現(xiàn)出上調(diào)狀態(tài),高表達(dá)量說(shuō)明其在刺參鹽度適應(yīng)過(guò)程中發(fā)揮重要作用,也說(shuō)明刺參在鹽度適應(yīng)過(guò)程中體腔液對(duì)肌酸提供能量的需求大,在體腔液、腸和呼吸樹(shù)中SLC6a8達(dá)到最大表達(dá)量的時(shí)間點(diǎn)有所不同,說(shuō)明其在體腔液、腸和呼吸樹(shù)對(duì)肌酸提供能量的需求不同??傊?,刺參在鹽度脅迫下肌酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因SLC6a8的表達(dá)模式說(shuō)明,SLC6a8基因可能參與刺參的鹽度適應(yīng)過(guò)程,此推測(cè)還需要進(jìn)一步進(jìn)行試驗(yàn)驗(yàn)證。
谷氨酸離子受體AMPA型亞基1(Gria1/AMPA1)與L-谷氨酸結(jié)合后誘導(dǎo)構(gòu)象改變,導(dǎo)致陽(yáng)離子通道的打開(kāi),進(jìn)而對(duì)Na+、K+有通透性,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的許多突觸中起著重要作用[43]。有研究表明,暴露于急性應(yīng)激條件下,大鼠的前額皮質(zhì)椎體神經(jīng)元AMPA受體調(diào)節(jié)的突觸電流有顯著上升趨勢(shì)[44],谷氨酸受體轉(zhuǎn)運(yùn)增強(qiáng),谷氨酸受體在膜上表達(dá)升高[45]。在應(yīng)激刺激下,增加突觸傳遞,突觸傳遞是可逆、迅速的,可能會(huì)使突觸前膜上的谷氨酸釋放增加[46],同時(shí),突觸后膜上鹽皮質(zhì)激素受體快速增加,會(huì)影響細(xì)胞膜AMPA受體的數(shù)量,導(dǎo)致海馬迅速活躍及神經(jīng)遞質(zhì)增強(qiáng)。
本研究結(jié)果表明,刺參受低鹽脅迫后谷氨酸受體蛋白基因Gria1在不同組織和時(shí)間點(diǎn)有不同的表達(dá)模式,這種結(jié)果說(shuō)明在刺參對(duì)鹽度的適應(yīng)過(guò)程中,Gria1/AMPA1基因參與其中。
FIBCD1屬于甲殼素受體蛋白家族,其纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域可以選擇性地與鈣依賴(lài)的乙?;M分結(jié)合,并且在胞吞作用及免疫防御和免疫反應(yīng)調(diào)制中起到作用[47]。本研究結(jié)果表明,刺參受低鹽脅迫后FIBCD1基因在各組織中均檢測(cè)到其表達(dá),說(shuō)明刺參對(duì)鹽度的適應(yīng)過(guò)程中可能需要在免疫過(guò)程中發(fā)揮作用的FIBCD1參與,由于刺參缺乏完善的免疫系統(tǒng),可能需要免疫相關(guān)基因參與其過(guò)程,進(jìn)而達(dá)到適應(yīng)鹽度應(yīng)激的過(guò)程。有研究表明,作為重要免疫因子的熱休克蛋白基因Hsp70及Hsp90也是刺參在鹽度脅迫下的重要響應(yīng)因子[31]。
綜上所述,SLC16a13、SLC6a8、FIBCD1和Gria1 4個(gè)基因均參與刺參的鹽度適應(yīng)過(guò)程。本研究結(jié)果可為刺參的健康養(yǎng)殖提供重要的科學(xué)依據(jù),下一步需要進(jìn)一步驗(yàn)證4個(gè)基因在刺參鹽度適應(yīng)過(guò)程中發(fā)揮的具體功能。