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    發(fā)酵馬鈴薯飲料漿液的制備工藝研究

    2019-01-10 03:28:54林蜜彬李瑤涵
    農產(chǎn)品加工 2018年23期
    關鍵詞:糖化酶勻漿濾液

    林蜜彬,楊 柳,李瑤涵,趙 璐,孔 宇,2

    (1.天津科技大學食品工程與生物技術學院,天津 300457;2.天津科技大學,食品生物技術教育部工程研究中心,天津 300457)

    馬鈴薯中的營養(yǎng)成分豐富,含有人體所有必需氨基酸,特別是人體必需氨基酸中的第一限制性氨基酸-賴氨酸。此外還含有鈣、磷、鐵、胡蘿卜素,以及VB1,VB2,VB6等[1]。VB6有預防動脈硬化的作用,馬鈴薯中VB6的含量高于大米和面粉。常吃馬鈴薯與腦溢血的患病率呈負相關[2]。馬鈴薯碳水化合物中含有淀粉,淀粉是多糖,具有利于血糖平穩(wěn)、預防糖尿病的功效[2]。馬鈴薯中鉀元素含量豐富,它是維持機體酸堿平衡的重要元素[3]。

    乳酸菌具有重要的生理功能,既可以維持機體腸道內菌群的生態(tài)平衡、抗感染菌和抑制病原菌,還具有一定的抗腫瘤作用[4]。此外,乳酸菌中含有的乳糖酶可以將牛奶中的乳糖分解,改善乳糖不耐癥;降低血清膽固醇[5]。調節(jié)腸道菌群、生產(chǎn)營養(yǎng)物質、抗氧化、抗變異原性、抗血栓等都是乳酸菌的益生特性,這些益生特性既可以提高食品的貯藏性能,達到延長貯藏期的目的,也可以對宿主的健康有幫助[6]。乳酸菌發(fā)酵還能增加營養(yǎng)素含量,使營養(yǎng)素更好地被人體吸收[7]。營養(yǎng)成分豐富的馬鈴薯漿在被乳酸菌發(fā)酵后營養(yǎng)成分得以保留,同時還具有乳酸菌發(fā)酵的獨特風味。

    1 材料與方法

    1.1 原料與試劑

    馬鈴薯,市售;真菌α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶,丹尼斯克(中國)有限公司提供;瑞士乳桿菌、植物乳桿菌、保加利亞乳桿菌,科漢森(北京)貿易有限公司提供。

    1.2 儀器與設備

    FE20型實驗室pH計,上海梅特勒-托利多儀器有限公司產(chǎn)品;HR1608型飛利浦手持式攪拌機,香港飛利浦電子有限公司產(chǎn)品;AD500S-H型實驗室數(shù)顯分散均質機,上海昂尼儀器儀表有限公司產(chǎn)品;JSC-AHW-3型電子計數(shù)秤,昆山臺衡精密測控股份有限公司產(chǎn)品;HH-8型數(shù)顯恒溫水浴鍋,江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司產(chǎn)品;LMQ.C型新華牌立式滅菌器,山東新華醫(yī)療器械股份有限公司產(chǎn)品;BAO-150A型精密鼓風干燥箱,上海施都凱儀器設備有限公司產(chǎn)品。

    1.3 工藝流程

    馬鈴薯→清洗去皮→糊化(切塊蒸煮20 min)→打漿→液化→糖化→復配→UHT滅菌→灌裝→成品。

    1.4 試驗方法

    1.4.1 馬鈴薯勻漿最佳酶解液化條件的研究與確定

    (1) 馬鈴薯勻漿液化溫度的確定。準確量取250 mL糊化打漿后的馬鈴薯勻漿,用0.1 mol/L檸檬酸溶液調節(jié)液化pH值為6.0,添加12 mg/kg的液化酶(真菌α-淀粉酶),分別在45,50,55,60,65℃條件下液化30 min,冷卻滅酶后過濾,測定馬鈴薯酶解濾液DE值,對不同液化溫度所測定的馬鈴薯勻漿濾液DE值進行比較并分析。

    (2) 馬鈴薯勻漿液化pH值的確定。準確量取250 mL糊化打漿后的馬鈴薯勻漿,固定液化酶用量為12 mg/kg,液化溫度50℃。分別在不同液化pH值5.4,5.7,6.0,6.3,6.6條件下液化30 min,冷卻滅酶后過濾,測定馬鈴薯酶解液DE值,對不同液化pH值所測定的馬鈴薯勻漿濾液DE值進行比較并分析。

    (3)馬鈴薯漿液化時間的確定。準確量取250 mL經(jīng)糊化打漿后的馬鈴薯勻漿,液化酶用量為12 mg/kg,用0.1 mol/L檸檬酸溶液調節(jié)pH值為6.0,在液化溫度為55℃條件下分別液化60,75,90,105,120 min,冷卻滅酶后過濾,測定馬鈴薯酶解濾液的DE值,對不同液化時間測定的馬鈴薯勻漿濾液DE值進行比較并分析。

    (4)液化酶用量的確定。準確量取250 mL糊化打漿后的馬鈴薯勻漿,用0.1 mol/L檸檬酸溶液調節(jié)液化pH值為5.7,固定液化溫度55℃。分別添加8,11,14,17,20 mg/kg的真菌α-淀粉酶酶解90 min,冷卻滅酶后過濾,測定過濾后的馬鈴薯酶解濾液DE值,對不同的酶使用量所測定的馬鈴薯勻漿濾液DE值進行比較并分析。

    (5)馬鈴薯勻漿液化的正交試驗。以馬鈴薯勻漿液化溫度、液化時間、酶用量和液化pH值作為因素,結合單因素分析結果和四因素三水平正交試驗設計方法,確定糊化后最佳的馬鈴薯勻漿液化條件。

    1.4.2 馬鈴薯漿糖化條件的篩選確定

    (1) 糖化酶(葡萄糖淀粉酶) 用量的確定。準確量取250 mL最佳液化條件液化后的馬鈴薯勻漿,用0.1 mol/L檸檬酸溶液調節(jié)液化pH值為4.5,在糖化溫度為60℃,糖化酶用量分別為50,100,150,200,250 mg/L的條件下糖化2 h,冷卻滅酶后過濾,測定馬鈴薯酶解濾液的DE值,對不同糖化酶用量所測定的馬鈴薯濾液DE值進行比較并分析。

    (2)糖化時間的確定。準確量取250 mL最佳條件液化后的馬鈴薯勻漿,用0.1 mol/L檸檬酸溶液調節(jié)糖化pH值為4.5,添加糖化酶100 mg/L,在糖化溫度為60℃的條件下,分別糖化25,50,75,100,125 min,冷卻滅酶后過濾,測定馬鈴薯酶解濾液的DE值,對不同糖化時間所測定的馬鈴薯濾液DE值進行比較并分析。

    (3)糖化pH值的確定。準確量取250 mL最佳液化條件液化后的馬鈴薯勻漿,添加糖化酶100 mg/L,分別在糖化pH值為3.9,4.2,4.5,4.8,5.1,糖化溫度為60℃條件下糖化2 h,冷卻滅酶后過濾,測定馬鈴薯酶解濾液的DE值,對不同pH值糖化后所測定的馬鈴薯濾液DE值進行分析并比較。

    (4)糖化溫度的確定。準確量取250 mL最佳液化條件液化后的馬鈴薯勻漿,用0.1 mol/L檸檬酸溶液調節(jié)糖化pH值為4.5,糖化酶用量100 mg/L,在糖化溫度為45,50,55,60,65℃條件下分別糖化2 h,冷卻滅酶后過濾,測定馬鈴薯酶解濾液DE值,對不同糖化溫度所測定的馬鈴薯濾液DE值進行比較并分析。

    (5)馬鈴薯勻漿糖化的正交試驗。以馬鈴薯勻漿糖化的溫度、糖化時間、糖化酶用量和糖化pH值作為因素,結合單因素分析結果和四因素三水平正交試驗設計方法,確定糖化后最佳的馬鈴薯勻漿糖化條件。

    1.5 測定方法

    pH值測定。采用pH計直接測定;DE值測定。采用國標《GB/T 22428.1—2008》用斐林試劑滴定法[12]。

    2 結果與分析

    2.1 糊化后的馬鈴薯勻漿最佳液化工藝條件確定

    2.1.1 液化溫度對馬鈴薯勻漿液化效果的影響

    液化溫度對馬鈴薯漿液化效果的影響見圖1。

    馬鈴薯勻漿DE值的變化隨液化溫度的升高呈上升趨勢,DE最大時溫度為50℃和55℃,此時DE值分別為9.81%和9.82%,之后DE值又隨著液化溫度的升高有所下降。通過分析可以得到真菌α-淀粉酶最適宜的液化溫度為55℃。

    2.1.2 液化pH值對馬鈴薯勻漿液化效果的影響

    液化pH值對馬鈴薯漿液化效果的影響見圖2。

    圖1 液化溫度對馬鈴薯漿液化效果的影響

    圖2 液化pH值對馬鈴薯漿液化效果的影響

    DE值的變化隨液化pH值升高呈上升趨勢,DE值最大時pH值為6.0,此時DE值為11.45%,之后DE值又隨著pH值的升高呈現(xiàn)下降趨勢。通過分析可以得出真菌α-淀粉酶最適的液化pH值為6.0。

    2.1.3 液化時間對馬鈴薯勻漿液化效果的影響

    液化時間對馬鈴薯漿液化效果的影響見圖3。

    圖3 液化時間對馬鈴薯漿液化效果的影響

    隨著液化時間延長DE值呈快速增長趨勢,DE值最大時液化時間為105 min,此時DE值為13.51%,之后DE值又隨著液化時間的繼續(xù)延長而趨于水平。通過分析可以得出真菌α-淀粉酶最適的液化時間為105 min。

    2.1.4 液化酶用量對馬鈴薯勻漿液化效果的影響

    真菌α-淀粉酶用量對馬鈴薯漿液化效果的影響見圖4。

    DE值隨真菌α-淀粉酶用量增加呈現(xiàn)上升趨勢,DE值最大時液化酶用量為17 mg/kg,此時DE值為15.7%,之后DE值又隨著液化酶用量的增加而呈現(xiàn)小幅下降。通過分析可以得出液化酶的用量為17 mg/kg時液化作用效果較好。

    2.1.5 液化馬鈴薯勻漿正交試驗結果與分析

    馬鈴薯漿液化參數(shù)L9(34)正交設計方案及試驗結果見表1。

    圖4 真菌α-淀粉酶用量對馬鈴薯漿液化效果的影響

    表1 馬鈴薯漿液化參數(shù)L9(34)正交設計方案及試驗結果

    以DE值作為指標,馬鈴薯勻漿液化的影響因素從小到大順序為液化pH值(D) <液化時間(C) <液化酶用量(A) <液化溫度(C)。通過試驗結果分析可得馬鈴薯液化的最優(yōu)配方為A3B1C1D3,即各因素最優(yōu)水平為液化酶用量16 mg/kg,液化溫度45℃,液化時間90 min,液化pH值6.0,得到的DE值為19.65%。

    2.2 液化后的馬鈴薯勻漿糖化的最佳工藝條件確定

    2.2.1 糖化酶用量對馬鈴薯勻漿酶解效果的影響

    糖化酶用量對馬鈴薯漿糖化效果的影響見圖5。

    液化后的馬鈴薯勻漿DE值隨糖化酶用量的增加呈上升趨勢。DE值最大時酶用量為250 mg/L,此時馬鈴薯勻漿DE值為54.67%??紤]到糖化酶在較低用量時酶解效果就很顯著,從而通過分析可得出酶用量在50~150 mg/L時為宜。

    2.2.2 糖化時間對液化后馬鈴薯勻漿酶解效果的影響

    圖5 糖化酶用量對馬鈴薯漿糖化效果的影響

    糖化時間對馬鈴薯漿糖化效果的影響見圖6。

    圖6 糖化時間對馬鈴薯漿糖化效果的影響

    隨糖化時間延長,DE值變化速率趨于水平。時間為50 min時,DE值最大,為70.68%。考慮到糖化酶在短時間內就能達到很好的酶解效果,糖化酶的最適時間為25~50 min。

    2.2.3 糖化pH值對液化后馬鈴薯勻漿糖化效果的影響糖化pH值對馬鈴薯漿糖化效果的影響見圖7。

    圖7 糖化pH值對馬鈴薯漿糖化效果的影響

    DE值的變化隨著液化后馬鈴薯漿糖化pH值的升高呈現(xiàn)上升趨勢,DE值最大時為pH值4.5,此時DE值為71.22%;接著隨著pH值的增加,DE值呈下降趨勢。從而通過分析可得出糖化酶的最適糖化pH值為4.5。

    2.2.4 糖化溫度對液化后馬鈴薯勻漿糖化效果的影響

    糖化溫度對馬鈴薯漿糖化效果的影響見圖8。

    DE值隨糖化溫度的升高呈上升趨勢,DE值最大時溫度為55℃,此時DE值為72.5%;溫度為55℃之后DE值的變化又隨著糖化溫度的升高而呈下降趨勢。從而通過分析可以得出,糖化酶的最適糖化溫度為55℃。

    2.2.5 馬鈴薯勻漿糖化的正交試驗結果

    馬鈴薯漿糖化參數(shù)L9(34)正交設計方案及試驗結果見表2。

    圖8 糖化溫度對馬鈴薯漿糖化效果的影響

    表2 馬鈴薯漿糖化參數(shù)L9(34)正交設計方案及試驗結果

    以糖化后的馬鈴薯勻漿DE值為指標,糖化馬鈴薯勻漿的影響因素從大到小依次為酶用量(B')>糖化時間(A')>糖化溫度(D')>糖化pH值(C')??紤]到生產(chǎn)過程中生產(chǎn)成本和生產(chǎn)效率,進而選出最優(yōu)配方,即糖化馬鈴薯勻漿的各因素最優(yōu)水平為糖化時間25 min,糖化酶用量40 mg/L,糖化pH值5.1,糖化溫度55℃,得到DE值為68.85%。

    3 結論

    獲得馬鈴薯漿液化和糖化工藝的最佳條件,為之后的乳酸菌發(fā)酵馬鈴薯飲料提供最優(yōu)的馬鈴薯漿液。首先,采用單因素試驗研究真菌α-淀粉酶和糖化酶的酶用量、酶解溫度、pH值和酶解時間。利用單因素結果,采用四因素三水平正交試驗設計再次優(yōu)化真菌α-淀粉酶和糖化酶的酶解條件。最終根據(jù)正交試驗結果確定了馬鈴薯漿液化工藝的最優(yōu)條件為真菌α-淀粉酶用量16 mg/kg,液化pH值6.0,液化溫度45℃,液化時間90 min,DE值19.65%;液化后的馬鈴薯漿糖化工藝的最優(yōu)條件為糖化酶用量40 mg/L,糖化pH值5.1,糖化溫度55℃,糖化時間25 min,制得的馬鈴薯漿具有馬鈴薯清香,DE值為68.85%。

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