CD64在細菌感染膿毒癥早期診斷中的應用價值

苗慧慧　楊立明　張艷麗

[摘要]目的 探討CD64在細菌感染膿毒癥早期診斷中的應用價值。方法 選取2015年12月～2017年10月我院重癥監(jiān)護病房收治的76例確診膿毒癥的患者作為研究對象進行回顧性分析，根據(jù)菌培養(yǎng)結果分為細菌感染組（44例）及非細菌感染組（32例）。檢測所有患者的CD64指數(shù)水平及降鈣素原（PCT）值，繪制ROC曲線，比較二者對膿毒癥患者細菌感染早期診斷的敏感性與特異性。結果 細菌感染組患者的CD64及PCT水平均高于非細菌感染組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;CD64、PCT在細菌感染組檢測陽性率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;非細菌感染組的PCT檢測陽性率高于CD64，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。ROC曲線顯示取最佳截斷值CD64（≥1.55）及PCT（≥0.588 ng/ml）時，診斷臨床細菌感染敏感性均為86.36%，特異性分別為72.97%和59.46%。結論 CD64在細菌感染膿毒癥患者的早期鑒別診斷中較PCT有更好的應用價值。

[關鍵詞]CD64指數(shù);降鈣素原;膿毒癥;細菌感染

[中圖分類號] R515.3 ? ? [文獻標識碼] A ? ? [文章編號] 1674-4721（2019）11（c）-0077-03

Application value of CD64 for the early diagnosis in sepsis infected by bacteria

MIAO Hui-hui? ?YANG Li-ming? ?ZHANG Yan-li

Department of NICU， Taigang General Hospital Affiliated to Shanxi Medical University， Shanxi Province， Taiyuan 030003， China

[Abstract] Objective To explore the application value of CD64 for the early diagnosis? in sepsis infected by bacteria. Methods From December 2015 to October 2017， 76 patients confirmed with sepsis admitted to the intensive care unit of our hospital were selected as the research objects for retrospective analysis. According to the results of bacterial culture， they were divided into bacterial infection group （44 cases） and non-bacterial infection group （32 cases）. CD64 index level and procalcitonin （PCT） value of all patients were detected， ROC curve was drawn， and the sensitivity and specificity of the two for early diagnosis of bacterial infection in septic patients were compared. Results CD64 and PCT levels in patients with bacterial infection were higher than those in patients with non-bacterial infection， the differents were statistically significant（P<0.05）. There were no differences on the positive rate of CD64 and PCT in the bacterial infection group （P>0.05）. The positive rate of PCT detection in non-bacterial infection group was higher than CD64， the difference was statistically significant （P<0.05）. ROC curve shows that when the optimal cut-off values CD64（≥1.55） and PCT（≥0.588 ng/ml） were taken， the sensitivity to diagnose clinical bacterial infection was 86.36%， and the specificity was 72.97% and 59.46%， respectively. Conclusion The detection of CD64 has a better application value in the early diagnosis in sepsis infected by bacteria.

[Key words] CD64 index; Procalcitonin; Sepsis; Bacterial infection

膿毒癥（sepsis）是指明確或可疑的感染引起的全身炎癥反應綜合征（SIRS），其發(fā)病具有明顯的級聯(lián)反應特點，發(fā)展迅速、治療棘手是目前危重癥患者死亡的主要原因，早診斷、早治療是提高膿毒癥救治水平的關鍵[1-2]。傳統(tǒng)診斷膿毒癥的檢測方法包括細菌培養(yǎng)、白細胞計數(shù)、C反應蛋白（CRP）等，均因檢測周期長、陽性率低、靈敏度及特異性差等限制了其臨床應用。尋求一個更敏感、更特異、更快速的感染指標，早期明確細菌感染，從而有針對性地進行抗感染治療，對疾病的轉歸及醫(yī)療資源的合理分配顯得愈加重要。近年來，CD64、降鈣素原（PCT）作為新的早期感染診斷指標逐漸應用于臨床，本研究選取我院重癥監(jiān)護病房收治的76例確診膿毒癥的患者作為研究對象進行回顧性分析，旨在評估二者對細菌感染膿毒癥的早期診斷價值，為早期正確選擇抗生素提供理論依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2015年12月～2017年10月我院重癥監(jiān)護病房收治的76例確診膿毒癥患者作為研究對象進行回顧性，根據(jù)菌培養(yǎng)結果分為細菌感染組[44例（革蘭陽性細菌13例、革蘭陰性細菌31例）]及非細菌感染組[32例（真菌18例、其他14例）]。細菌感染組中，男29例，女15例;平均年齡（71.22±15.93）歲;平均急性生理學和慢性健康狀況評分系統(tǒng)Ⅱ（APACHE-Ⅱ）評分（16.4±3.1）分。非細菌感染組中，男20例，女12例;平均年齡（76.69±8.65）歲;平均APACHE-Ⅱ評分（15.8±4.2）分。兩組患者的性別、年齡、APACHE-Ⅱ評分等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。細菌感染膿毒癥患者納入標準：據(jù)感染病史、臨床表現(xiàn)、實驗室檢查符合膿毒癥診斷標準（2012美國危重病學會指南）者，根據(jù)細菌學培養(yǎng)陽性確診膿毒癥35例;細菌學培養(yǎng)陰性，但有臨床癥狀，5項非特異性指標達到2項及以上者[3]，即臨床膿毒癥患者9例。排除標準：①妊娠的患者②有血液病者;③有自身免疫系統(tǒng)疾病者;④曾經進行器官移植者;⑤慢性多器官衰竭及腫瘤終末期患者。

1.2方法

所有患者均于入院后4 h內（使用抗生素前）留取微生物學標本，24 h內采集空腹靜脈血行血細胞分類、PCT及CD64檢測。PCT采用羅氏E170發(fā)光儀及配套試劑進行定量檢測。CD64使用美國BD公司生產的FACS Calibur流式細胞儀，采用美國TRILLIUM公司生產的檢測試劑進行定量檢測，檢測前以標準熒光微球對流式細胞儀進行光路和流路質控監(jiān)測，保證每次檢測前儀器的狀態(tài)穩(wěn)定一致。

1.3觀察指標

比較兩組患者的CD64及PCT水平，比較兩者對膿毒癥患者細菌感染早期診斷的敏感性與特異性。敏感性=真陽性/（真陽性+假陰性）×100%;特異性=真陰性/（假陽性+真陰性）×100%。

1.4統(tǒng)計學方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計量資料用均數(shù)±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗;計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。繪制受試者工作特征（ROC）曲線，確定曲線下面積，計算各指標最佳截斷值時敏感性和特異性。

2結果

2.1 CD64、PCT在細菌感染組與非細菌感染組檢測陽性率的比較

細菌感染組CD64指數(shù)為（3.34±1.63）、PCT水平為（24.03±11.94）ng/ml，均高于非細菌感染組的（1.59±0.79）、（2.04±0.87）ng/ml，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。細菌感染組的CD64、PCT檢測陽性率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;非細菌感染組的PCT檢測陽性率高于CD64，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）（表1）。

2.2 CD64、PCT的ROC曲線及兩者敏感性和特異性

CD64及PCT的曲線下面積（AUC）分別為0.811和0.768，取最佳截斷值CD64（≥1.55）及PCT（≥0.588 ng/ml）時，診斷臨床細菌感染敏感性均為86.36%，特異性分別為72.97%和59.46%（見表2、圖1（封四）。

3討論

膿毒癥是創(chuàng)傷、燒傷、休克、感染等臨床急危重患者的嚴重并發(fā)癥之一，也是誘發(fā)膿毒性休克、多器官功能障礙綜合征的重要原因[4]?，F(xiàn)代危重病急救醫(yī)學發(fā)展迅速，但膿毒癥的早期診斷及鑒別診斷進展甚微，隨著人口老齡化、細菌耐藥譜改變、侵入性診斷治療操作、器官移植放化療等的增加，膿毒癥的發(fā)病率及死亡率仍不斷升高，如何早期識別并正確合理使用抗生素成為臨床研究熱點。

PCT主要是在甲狀腺濾泡旁細胞內合成的無激素活性的前肽物質，無感染時體內含量極少，且局限表達，而在細菌感染時可誘導各種組織多種類型細胞連續(xù)型釋放，6～8 h內迅速達到高峰，并在此后的24 h持續(xù)穩(wěn)定保持高水平，曾一度被認為是診斷膿毒癥特異性及敏感性極高的指標[5-6]，并被列入2012年膿毒癥指南。但近年來多項Meta分析發(fā)現(xiàn)，PCT對膿毒癥診斷優(yōu)勢比為7.79，總的敏感性和特異性均僅71%，建議限制PCT在ICU患者的廣泛應用[7-8]。本研究結果提示，在低血容量休克、窒息、重度顱腦損傷及真菌感染等情況下PCT水平亦增高，PCT在細菌感染組與非細菌感染組的檢測陽性率均超過50%，即PCT在鑒別是否細菌感染方面有一定的限制性和不一致性，與Ramilo等[9]的報道一致。

CD64屬于免疫球蛋白超家族的成員，是IgG Fc片段受體之一，能夠識別免疫球蛋白的Fc片段，從而參與Ig的生理功能或病理殺傷作用，觸發(fā)和調控機體多種免疫反應，在機體感染與抗感染中發(fā)揮重要作用。正常生理情況下，CD64在中性粒細胞表面僅呈低水平表達，當機體突發(fā)感染時，CD64會在IFN-γ等炎癥因子的刺激下，激活中性粒細胞，在短時間內高水平表達，升高至原來的5～10倍[10-11]。Soni等[12]發(fā)現(xiàn)，在非感染性疾病和病毒感染時一般不引起中性粒細胞CD64表達升高。Cid等[13]曾報道CD64用于診斷細菌性感染的靈敏度達79%，特異性達91%，可以作為早期診斷細菌感染的參考指標。史晉叔等[14]提到：當機體被真菌感染時，nCD64的表達量低于細菌感染，高于正常人，而被病毒感染時，nCD64的表達量與正常人比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。但國內外對于CD64在細菌、非細菌感染鑒別中的應用研究甚少，并存在爭議。

膿毒癥感染可以由細菌、病毒、真菌、寄生蟲等引起，本研究結果中由細菌感染導致的膿毒癥患者占57.9%，同時發(fā)現(xiàn)真菌感染呈上升趨勢（達23.7%），不容小覷，早期選擇合理有效抗生素可顯著影響膿毒癥患者的臨床結局，而這有賴于對不同病原體及時、準確的判斷。本研究前期統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)傳統(tǒng)實驗室檢查：白細胞計數(shù)、中性粒細胞比例在細菌與非細菌感染膿毒癥患者中表達水平相當，特異性差。本研究結果提示，細菌感染組的CD64、PCT水平均高于非細菌感染組（P<0.05）;二者診斷細菌感染膿毒癥的敏感性均為86.36%，陽性率比較，差異無統(tǒng)計學意義（72.73% vs. 88.64%，P>0.05）。提示CD64、PCT可作為診斷細菌感染膿毒癥的敏感指標。在非細菌感染組CD64、PCT陽性率比較，差異有統(tǒng)計學意義（25.00% vs. 53.12%，P<0.05），即在診斷細菌感染方面，CD64較PCT有更高的一致性。進一步統(tǒng)計分析顯示：CD64的AUC為0.811，取最佳截斷值時特異性為72.97%，PCT的AUC為0.768，取最佳截斷值時特異性為59.46%，可見CD64指數(shù)診斷細菌感染膿毒癥較PCT更具特異性，加之其采血量少、出結果快，臨床應用前景廣泛。

本研究結果提示CD64、PCT在細菌感染膿毒癥患者早期診斷中均較為敏感，但相比之下，前者特異性更高，可作為鑒別是否細菌感染的良好指標，對指導抗生素的早期合理使用及療效評價可能更準確。丁峰等[15]發(fā)現(xiàn)多種標志物聯(lián)合檢測有助于提高重癥細菌性感染診斷的敏感性和特異性，考慮到膿毒癥患者病情復雜、治療棘手，多標志物的聯(lián)合應用也許是膿毒癥早期診斷難題的重要突破口。如何將其與傳統(tǒng)炎癥標志物結合，更快、更準確地指導膿毒癥治療，尚需多中心、大樣本量的臨床研究進一步證實。

[參考文獻]

[1]中華醫(yī)學會重癥醫(yī)學分會.中國嚴重膿毒癥/膿毒性休克治療指南（2014）[J].中華危重病急救醫(yī)學，2015，27（6）：401-426.

[2]張惠葉，潘冬林，楊君等.中性粒細胞CD64對成人膿毒癥診斷價值的薈萃分析[J].中華臨床感染病雜志，2015，8（5）：444-450.

[3]Choo YK，Cho HS，Seo IB，et al.Comparison of the accuracy of neutrophic CD64 and C-reactive protein as a single test for the early detection of neonatal sepsis[J].Korean J Pediatr，2012，55（1）：11-17.

[4]姚詠明，盛志勇.創(chuàng)、燒傷膿毒癥研究的重要領域與進展[J].解放軍醫(yī)學雜志，2005，30（10）：857-860.

[5]Yang AP，Liu J，Yue LH，et al.Neutrophil CD64 combined with PCT，CRP and WBC improves the sensitivity for the early diagnosis of neonatal sepsis[J].Clin Chem Lab Med，2016， 54（2）：345-351.

[6]Park BS，Kim SE，Park SH，et al.Procalcitonin as a potential predicting factor for prognosis in bacterial meningitis[J].J Clin Neurosci，2016，36：129-133.

[7]Vincent JL，Nuffelen MV，Lelubre C.Host response biomarkers in sepsis：the role of procalcitonin[J].Methods Mol Biol，2015，1237（1237）：213.

[8]Nargis W，Ahamed BU，Ibrahim M.Procalcitonin versus C-reactive protein：usefulness as biomarker of sepsis in ICU patient[J].Int J Crit Illn Inj Sci，2014，4（3）：195.

[9]Ramilo O，Rodriguez-Fernandez R，Mejias A.Promise and limitations of procalcitonin to identify bacterial infections in the pediatric intensive care unit[J].J Pediatrics，2016，179：7-9.

[10]Jong ED，Lange DWD，Beishuizen A，et al.Neutrophil CD64 expression as a longitudinal biomarker for severe disease and acute infection in critically ill patients[J].Int J Lab Hematol，2016，38（5）：576-584.

[11]李德紅，居軍.診斷感染性疾病的新指標：中性粒細胞CD64[J].檢驗醫(yī)學，2012，1：67-70.

[12]Soni S，Wadhwa N，Kumar R，et al.Evaluation of CD64 expression on neutrophils as an early indicator of neonatal sepsis[J].Pediatr Infect Dis J，2013，32（1）：33-37.

[13]Cid J，Aguinaco R，Sáncheze R，et al.Neutrophil CD64 expression expression as marker of bacterial infection：a systematic review and meta-analysis[J].J Infect，2010，60（5）：313-319.

[14]史晉叔，涂懷軍，李劍.中性粒細胞CD64鑒別細菌感染的研究進展[J].廣東醫(yī)學，2016，37（2）：303-304.

[15]丁峰，張清會，徐慧，等.PCT與CRP及CD64指數(shù)對細菌感染慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者診斷及指導治療的意義[J].中華醫(yī)院感染學雜志，2017，27（10）：2198-2201.

（收稿日期：2019-01-29? ?本文編輯：李二云）