血清sICAM-1和sVCAM-1水平與甲狀腺相關(guān)眼病的相關(guān)性分析

彭細(xì)峰，顏 堅，蔡玉蓮，鄧江濤，黃 薇，姜文浩

0引言

臨床普遍認(rèn)為，甲狀腺相關(guān)眼病(TAO)是一種自身免疫性疾病或器官免疫性疾病，其與內(nèi)分泌系統(tǒng)功能存在緊密聯(lián)系。目前，TAO確切發(fā)病機(jī)制尚未明確。多項研究表明，黏附分子及可溶性黏附分子水平變化和多種自身免疫性疾病的發(fā)生有關(guān)[1-2]。隨著相關(guān)研究的逐漸深入，有學(xué)者認(rèn)為黏附分子在TAO發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用，眼眶部位血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷及炎性細(xì)胞浸潤屬于TAO產(chǎn)生的重要因素，而血清黏附分子濃度升高則被認(rèn)為是人體白細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞損傷或被激活的標(biāo)志[3-4]。本研究以120例TAO患者和90例健康體檢者作為研究對象，探討血清可溶性細(xì)胞間黏附分子1(sICAM-1)、可溶性血管細(xì)胞黏附分子1(sVCAM-1)水平與TAO病情嚴(yán)重程度及預(yù)后的相關(guān)性。

1對象和方法

1.1對象選取我院2016-08/2018-03收治的TAO患者120例，其中男53例，女67例，年齡18～68(平均51.38±5.26)歲，病程0.23±0.04a。參照臨床活動性評分(CAS)標(biāo)準(zhǔn)分為活動期組(CAS評分≥4分，68例)和非活動期組(CAS評分<4分，52例)。參照TAO病情嚴(yán)重程度判定標(biāo)準(zhǔn)分為輕度組(38例)、中重度組(45例)和極重度組(37例)。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)影像學(xué)檢查顯示雙眼多條眼外肌表現(xiàn)為肌腹肥厚[5]；(2)有眼瞼回縮及眼球突出癥狀[6]；(3)甲狀腺功能障礙或有甲狀腺功能亢進(jìn)病史；(4)首次發(fā)病，病程≤0.5a。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并其它眼科疾??；(2)惡性腫瘤患者；(3)伴隨感染性疾病或嚴(yán)重臟器功能障礙；(4)拒絕參與本研究者。另選取同期健康體檢者90例作為對照，其中男39例，女51例，年齡18～65(平均50.94±5.37)歲。本研究經(jīng)本院倫理委員會審批通過，所有入組對象均對本研究知情同意，并且簽署知情同意書。

1.2方法采集所有受檢者性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)等臨床基本資料，并抽取空腹靜脈血3mL，離心10min后，取上層血清，采用EP冷凍管分裝，并放入-80℃冰箱中儲存?zhèn)錂z。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清樣本中sICAM-1、sVCAM-1水平，具體操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒(美國R&D公司)說明書進(jìn)行，采用全自動酶標(biāo)儀(Multiskan MS，美國Thermo Scientific公司)于450nm波長處檢測各孔吸光度OD值，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算sICAM-1、sVCAM-1水平。

2結(jié)果

2.1不同臨床活動性分期組與對照組受檢者相關(guān)資料的比較活動期組、非活動期組和對照組受檢者性別構(gòu)成比、年齡、BMI比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，且活動期組和非活動期組患者病程比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；活動期組患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平均明顯高于非活動期組和對照組受檢者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(sICAM-1：t=23.895、29.781，均P<0.01；sVCAM-1：t=31.063、38.625，均P<0.01)，但非活動期組和對照組受檢者血清sICAM-1、sVCAM-1水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.391、0.123，P=0.696、0.902)，見表1。

2.2不同病情嚴(yán)重程度組與對照組受檢者相關(guān)資料的比較輕度組、中重度組、極重度組、對照組受檢者性別構(gòu)成比、年齡、BMI比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，且不同病情嚴(yán)重程度組患者病程比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

2.3不同病情嚴(yán)重程度和臨床活動性分期患者血清sICAM-1和sVCAM-1水平的比較參照臨床活動性評分(CAS)標(biāo)準(zhǔn)將不同病情嚴(yán)重程度組的患者分別分為活動期和非活動期。不同病情嚴(yán)重程度組非活動期患者分別與對照組受檢者血清sICAM-1、sVCAM-1水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(sICAM-1：t=0.150、0.220、0.197，均P>0.05；sVCAM-1：t=0.122、0.148、0.178，均P>0.05)；不同病情嚴(yán)重程度組活動期患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平明顯高于非活動期(sICAM-1：t=9.225、14.752、16.684，均P<0.01；sVCAM-1：t=13.604、19.418、19.628，均P<0.01)和對照組(sICAM-1：t=14.979、22.813、27.825，均P<0.01；sVCAM-1：t=24.032、32.570、34.755，均P<0.01)。不同病情嚴(yán)重程度組非活動期患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平無明顯差異，不同病情嚴(yán)重程度組活動期患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平隨病情加重逐漸升高，見表3。

2.4血清sICAM-1和sVCAM-1水平與不同臨床活動性分期患者病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性分析非活動期患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平與其病情嚴(yán)重程度無明顯相關(guān)性(r=0.102、0.095，P=0.135、0.167)；活動期患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平與其病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)(r=0.695、0.824，P=0.005、0.002)。

3討論

目前，TAO發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚，因為眼眶之中無淋巴器官，故相關(guān)研究主要分析免疫細(xì)胞以及免疫分子在TAO發(fā)病中的作用[7-8]。sVCAM-1和sICAM-1均為人體免疫球蛋白超家族成員，多種細(xì)胞膜表面或細(xì)胞外基質(zhì)中含有sICAM-1和sVCAM-1，其通過配體-受體結(jié)合模式在人體生理病理過程中產(chǎn)生重要作用。sVCAM-1和sICAM-1主要介導(dǎo)人體白細(xì)胞識別、轉(zhuǎn)導(dǎo)、黏附過程，白細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞可以黏附方式引發(fā)相應(yīng)級聯(lián)反應(yīng)，從而參與免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)[9-10]。關(guān)于血清sICAM-1的產(chǎn)生方式有兩種學(xué)說：(1)人體細(xì)胞膜表面產(chǎn)生成熟細(xì)胞間黏附分子1，然后在細(xì)胞膜結(jié)合處經(jīng)蛋白水解，膜外部分脫落進(jìn)入血液，最終形成sICAM-1；(2)人體內(nèi)編碼的細(xì)胞間黏附分子1 mRNA通過剪切方式消除編碼跨膜區(qū)域與胞內(nèi)區(qū)堿基后，直接翻譯釋放出sICAM-1。研究發(fā)現(xiàn)，人體病變組織部位產(chǎn)生的細(xì)胞間黏附分子1有其獨特類型，其進(jìn)入血液成為sICAM-1，并與淋巴功能相關(guān)抗原1配體結(jié)合，從而刺激淋巴細(xì)胞，促進(jìn)靜息與未激活狀態(tài)免疫活性細(xì)胞快速黏附于病變部位，起到定靶作用[11-12]。如果淋巴細(xì)胞隨著血液循環(huán)到達(dá)相應(yīng)靶器官，則該部位sICAM-1會以與淋巴細(xì)胞表面淋巴功能相關(guān)抗原1結(jié)合方式，對淋巴細(xì)胞釋放膜信號，實現(xiàn)跨膜游出[13-14]。

表1不同臨床活動性分期組與對照組受檢者相關(guān)資料的比較

組別例數(shù)男/女(例)年齡(x±s,歲)病程(x±s,a)BMI(x±s,kg/m2)sICAM-1(x±s,μg/L)sVCAM-1(x±s,μg/L)活動期組6830/3850.96±0.580.23±0.0322.15±2.34275.12±28.36451.76±46.53非活動期組5223/2951.73±5.240.24±0.0422.50±2.38167.24±18.25230.65±24.70對照組9039/5150.94±5.37-22.74±2.41166.03±17.48230.12±24.61 F/t/χ20.0150.6201.5651.191572.8831014.344P0.9930.5390.1200.306<0.01<0.01

注：對照組：健康體檢者。

表2不同病情嚴(yán)重程度組與對照組受檢者相關(guān)資料的比較

組別例數(shù)男/女(例)年齡(x±s,歲)病程(x±s,a)BMI(x±s,kg/m2)輕度組3816/2250.28±0.360.23±0.0422.23±2.37中重度組4520/2551.80±5.290.24±0.0422.48±2.40極重度組3717/2051.74±5.040.24±0.0522.35±2.34對照組9039/5150.94±5.37-22.74±2.41 F/χ20.9910.9410.6920.508P0.1290.4220.5030.677

注：對照組：健康體檢者。

組別分期例數(shù)sICAM-1sVCAM-1對照組90166.03±17.48230.12±24.61輕度組38活動期23232.86±24.57390.12±40.58非活動期15165.30±17.42230.96±24.65中重度組45活動期25269.12±27.35b456.38±46.90b非活動期20165.08±17.49231.02±24.67極重度組37活動期20307.58±31.24b493.68±50.12b非活動期17165.12±17.51231.28±24.69 F309.545544.232P<0.001<0.001

注：對照組：健康體檢者。bP<0.01vs輕度組活動期。

本研究發(fā)現(xiàn)，對照組受檢者血清中可檢測到sICAM-1、sVCAM-1，表明正常人血清中含有sICAM-1、sVCAM-1。自身免疫性疾病可促進(jìn)黏附分子表達(dá)增加，明顯提高血清可溶性黏附分子含量，故可溶性黏附分子表達(dá)的檢測結(jié)果可作為TAO病情評估的指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，活動期組患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平顯著高于非活動期組和對照組，且非活動期組和對照組受檢者血清sICAM-1、sVCAM-1水平無明顯差異，這與張曉斌等[15]研究結(jié)論一致。表明活動期患者眼部及甲狀腺局部組織產(chǎn)生了明顯炎癥反應(yīng)，誘發(fā)黏附分子大量生成，而非活動期患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平趨于正常，可能是由于非活動期患者炎癥細(xì)胞浸潤逐漸消退。此外，我們發(fā)現(xiàn)不同病情嚴(yán)重程度組活動期患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平明顯高于對照組，且極重度組>中重度組>輕度組，組間比較差異顯著，提示對于活動期TAO患者而言，隨著病情程度增加，血清sICAM-1、sVCAM-1水平顯著升高，表明活動期患者免疫病變活動可對血清sICAM-1、sVCAM-1水平產(chǎn)生影響。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，非活動期患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平與病情嚴(yán)重程度無明顯相關(guān)性，活動期患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平與病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，這與趙勇[16]研究結(jié)論相符。表明非活動期TAO患者病變程度對血清sICAM-1、sVCAM-1水平無顯著影響，而活動期病變程度加劇，會引起血清sICAM-1、sVCAM-1水平明顯升高。

綜上，隨著活動期TAO病情嚴(yán)重程度增加，患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平亦顯著升高，臨床可通過檢測血清sICAM-1、sVCAM-1水平輔助TAO的診斷、分期分級及療效評估。