結(jié)核分枝桿菌耐藥基因檢測在耐藥肺結(jié)核治療中的應用價值研究

閆芹 李君 王麗珩*（通訊作者）

（1.2 濟南市長清區(qū)疾病預防控制中心 山東 濟南 250399）

（3 濟南市疾病預防控制中心 山東 濟南 250021）

肺結(jié)核是臨床中較為常見的一種疾病，相關統(tǒng)計顯示我國是結(jié)核病高負擔國家，肺結(jié)核患者的數(shù)量超過了500萬，占全球患者總數(shù)的四分之一左右。藥物治療是臨床中治療肺結(jié)核患者的主要方式，但是隨著臨床藥物使用的增加，臨床中耐藥肺結(jié)核患者也逐漸增多，傳統(tǒng)的檢測診斷方式檢驗時間長、效果差，臨床應用效果不理想[1]。如何對耐藥肺結(jié)核患者進行有效的診斷成為了臨床研究的重點內(nèi)容，本次研究就對結(jié)核分枝桿菌耐藥基因檢測在該疾病患者中的應用效果進行了探討分析，詳細內(nèi)容如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2006年1月-2018年12月于我單位進行檢查的患者共計474例，所有患者均為肺結(jié)核患者，男365例，女109例，年齡（19～87）歲，平均年齡（46.55±3.55）歲。將所有患者的一般資料進行比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

收集患者的痰，制作痰標本，進行檢查工作，詳細內(nèi)容如下：①相關材料由我單位結(jié)核病生物分子實驗室提供；痰標本其處理后使用Bactec-960儀進行培養(yǎng)工作，培養(yǎng)時間為3～7天，部分培養(yǎng)物用于藥敏高、低濃度實驗，而部分培養(yǎng)物則進行DNA提取工作，將其放置與-20℃環(huán)境中備用；②進行7H10培養(yǎng)基藥敏實驗以及PCR擴增和SSCP分析，采用不同的濃度分別進行實驗；③異煙肼（INH，H）高濃度為10mg/L，低濃度為1mg/L；利福平（RFP，R）高濃度為250mg/L，低濃度為25mg/L；鏈霉素（SM，s）高濃度為100mg/L，低濃度為10mg/L；乙胺丁醇（EB）高濃度為50mg/L，低濃度為5mg/L；卡那霉素（K）高濃度為6mg/L，低濃度為50mg/L；吡嗪酰胺（PZA）高濃度為250mg/L，低濃度為50mg/L；氧氟沙星（O）濃度為2mg/L；對氨基水楊酸（PAS）濃度為6mg/L；左旋氧氟沙星（V）高濃度為5mg/L，低濃度為0.5mg/L；聯(lián)合藥敏濃度則為HR：H為1mg/L，R為50mg/L；HRS：H為1mg/L，R為50mg/L，S為10mg/L；HRE：H為1mgL，R為50mg/L，E為5mg/L。

1.3 觀察指標

記錄結(jié)核分枝桿菌不同耐藥菌株數(shù)以及耐藥基因突變情況。

1.4 統(tǒng)計學分析

使用SPSS 22.0對患者的相關參數(shù)進行分析，計數(shù)資料以率 (%)表示，采用χ2檢驗，P＜0.05作為差異有統(tǒng)計學意義。

2.結(jié)果

474例患者中，利福平敏感株433株，突變株數(shù)24株，突變率為5.54%，利福平耐藥株41株，突變株數(shù)21株，突變率為51.22%，利福平高耐株30株，突變株數(shù)18株，突變率為60%，利福平低耐株11株，突變株數(shù)3株，突變率為27.27%；異煙肼敏感株393株，突變株數(shù)40株，突變率為10.18%，異煙肼耐藥株81株，突變株數(shù)32株，突變率為39.51%，異煙肼高耐株53株，突變株數(shù)31株，突變率為58.49%，異煙肼低耐藥4株，突變株數(shù)1株，突變率為25%；鏈霉素敏感株395株，突變株數(shù)96株，突變率為24.30%，鏈霉素耐藥株79株，突變株數(shù)48株，突變率為60.76%，鏈霉素高耐株55株，突變株數(shù)46株，突變率為83.63%，鏈霉素低耐株34株，突變株數(shù)2株，突變率為5.88%；對比以上數(shù)據(jù)利福平、異煙肼以及鏈霉素三種耐藥基因突變率隨其耐藥濃度的增加而增加，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

3.討論

肺結(jié)核是臨床中極為常見的一種疾病，其嚴重地威脅著患者的身體健康，影響著社會穩(wěn)定和發(fā)展，而隨著臨床藥物使用頻率和數(shù)量的增加，臨床中耐藥肺結(jié)核也呈現(xiàn)出明顯的增加，針對患者的不同情況給予相應的治療已經(jīng)成為了臨床研究的主要內(nèi)容[2]。

利福平、異煙肼以及鏈霉素敏感株均為臨床中進行耐藥性檢測的重要指標，并且該三種敏感株均存在基因突變的情況，研究其基因突變率耐藥濃度之間的關系可以有效了解臨床中耐藥肺結(jié)核患者耐藥情況的變化。在本次研究中發(fā)現(xiàn)，在實驗中利福平、異煙肼以及鏈霉素三種敏感株的基因突變率會隨著其耐藥濃度的增加而增加，顯示在臨床中隨著不規(guī)律用藥時間的增加，敏感株的突變率會出現(xiàn)的明顯的增高，導致其耐藥性得到增強，說明結(jié)核分枝桿菌耐藥基因檢測能夠在臨床中對用藥方案進行指導和參考。

綜上所述，結(jié)核分枝桿菌耐藥基因檢測在臨床中能夠有效了解耐藥肺結(jié)核患者的耐藥情況變化，指導臨床進行正確的用藥，具有重要的臨床意義，值得推廣應用。