干細胞來源及內(nèi)耳導入途徑的研究進展

田海月向大偉王新蘭鐘翠萍

1寧夏醫(yī)科大學臨床學院研究生院（銀川750003）

2中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊第九四〇醫(yī)院（蘭州730050）

3中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊第九四〇醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科（蘭州730050）

感音神經(jīng)性耳聾（Sensorineural hearing loss，SNHL）是耳鼻喉科常見疾病之一。隨著人口老齡化、噪音污染、感染及氨基糖苷類抗生素的濫用，其發(fā)生率逐年上升。相關數(shù)據(jù)顯示，全球約有4億人正承受聽力障礙疾病的困擾，SNHL占很大比重[1]。2015年的美國，聽力障礙造成750,000,000美元的經(jīng)濟損失，這個數(shù)字仍持續(xù)增長[2,3]。由于耳機的不健康使用，超過百萬的青年人群正面臨著永久的聽力損失[4]。

多種危險因素包括噪聲、神經(jīng)營養(yǎng)因子減少、耳毒性藥物、衰老、全身性疾病、遺傳變異等均可導致不可逆的聽力損失[5]。耳蝸毛細胞（Hair cells，HCs）及螺旋神經(jīng)節(jié)細胞（Spiral ganglionneurons，SGNs）的損傷和變性均可導致SNHL的發(fā)生及發(fā)展[5,6]，且受損后很難再生。

目前，SNHL的治療仍是世界醫(yī)學難題，主要的治療方法有配戴助聽器和人工耳蝸植入，保證治療效果的前提是有正常數(shù)量的SGNs。干細胞技術的研究和應用在醫(yī)學領域迅速涌現(xiàn)，盡管在其他領域已有了快速發(fā)展，但干細胞在內(nèi)耳中的應用仍較少見[6,7]。用于細胞替代治療的移植干細胞，具有快速增殖分化為臨床所用的潛力[8,9]。隨著分子生物學的迅速發(fā)展，細胞移植成為各個領域研究的熱點，即將有功能的細胞植入內(nèi)耳，替代因藥物毒性、退化、外傷、遺傳缺陷而損傷的細胞，以達到治療SNHL的目的。本文將從內(nèi)耳移植細胞來源及途徑的研究進展進行綜述。

1 移植干細胞來源：細胞替代治療

移植干細胞是一類具有自我更新能力的未分化細胞，在適當?shù)陌麅?nèi)基因調(diào)控、胞間聯(lián)系及環(huán)境因素影響下可分化為任何一種目標類型細胞，最終替代體內(nèi)損傷或缺失的細胞從而恢復機體正常功能。移植干細胞的種類包括內(nèi)耳干細胞、神經(jīng)干細胞、胚胎干細胞及脊根神經(jīng)節(jié)、骨髓間充質(zhì)細胞及造血干細胞等。干細胞可以遷移到耳蝸各轉并分布于鼓階、前庭階、中階甚至蝸軸內(nèi)，并且自體的移植可避免免疫排斥反應，具有良好的應用價值。內(nèi)耳干細胞移植是目前研究的熱點與難點，但替代損傷的耳蝸HCs和SGNs的研究仍處于動物實驗階段。

1.1 胚胎干細胞

胚胎干細胞是存在于哺乳動物胚泡囊內(nèi)的多功能干細胞，是具有全潛能性、持續(xù)增殖、自我更新的前體細胞，是干細胞移植的理想選擇。胚胎干細胞可被誘導分化為多種細胞、組織，如何定向誘導胚胎干細胞向特異型細胞分化從而替代損傷細胞成為當今研究熱點。研究表明[10]，胚胎干細胞以宿主基質(zhì)細胞為滋養(yǎng)層，與新生小鼠聽覺上皮、耳蝸感覺上皮共培養(yǎng)可分別分化為類神經(jīng)元細胞、胚胎干細胞來源的神經(jīng)元，主要朝內(nèi)毛細胞（IHCs）方向伸展，且與IHCs建立了突觸聯(lián)系。MarkA.Parker[11]通過鼓階將干細胞移植至模型后觀察到干細胞向蝸軸螺旋管（Rosental管）和Corti氏器的遷移，趙等[12]進一步觀察到移植細胞遷移至中階，抵達Corti氏器，并且表達myosinVIIA。張[13]利用耳蝸外側壁的螺旋韌帶和血管紋移植干細胞，發(fā)現(xiàn)細胞沿基底膜遷移到受損區(qū)域并表達Tubulin。Kollet O等[14]發(fā)現(xiàn)由損傷部位釋放的趨化因子SDF-1可吸引前體細胞抵達損傷部位。Hu等[15]將胚胎干細胞通過蝸軸注射到神經(jīng)纖維區(qū)域分化為膠質(zhì)細胞。Corrales等[16]通過試驗造成鼠耳蝸SGNs細胞損傷而HCs完整，把小鼠胚胎干細胞誘導成的神經(jīng)前體細胞移植到蝸軸，發(fā)現(xiàn)移植物發(fā)出突起，通過Rosenthal's canal，經(jīng)過骨螺旋板，延伸至受損的Corti氏器并逐漸占據(jù)耳蝸神經(jīng)區(qū)域。由此可見，干細胞在趨化因子的吸引下抵達受損區(qū)域后有向目標細胞分化的趨勢。

1.2 內(nèi)耳干細胞

內(nèi)耳干細胞位于橢圓囊感覺上皮內(nèi)，具有多向分化的潛能。與其他類型移植細胞相比，內(nèi)耳干細胞有更大的潛能分化為HCs，向聽覺上皮細胞的定向誘導分化更具有可操作性，更加適合內(nèi)耳的內(nèi)環(huán)境，在未來臨床運用上具有更廣泛的治療前景。其中，前庭上皮胰島素樣生長因子可使耳蝸前體細胞的增殖能力明顯增強，轉化成類毛細胞從而表達耳蝸前體細胞特有的基因，在培養(yǎng)基中分化形成表達HCs標記物myosinⅦA和espin的細胞并表達類似早期HCs的功能性離子通道[17,18]。首先，內(nèi)耳干細胞分化表達幾率在10%左右，而神經(jīng)干細胞只有0.1%；其次，在形成靜纖毛束結構方面，內(nèi)耳干細胞更容易完全分化為HCs[19]；最后，內(nèi)耳干細胞有較強的增殖能力，可以為細胞替代治療提供充足的細胞源來恢復相應組織器官的功能。

內(nèi)耳干細胞的治療應用諸多問題尚待解決：①如何調(diào)控干細胞自我更新能力。②如何控制干細胞向特定細胞系分化和提高分化效率。③移植干細胞如何有效整合和功能重建。雖然上述問題真實存在，但相比較其他細胞來源，內(nèi)耳干細胞仍是重塑HCs再生從而恢復聽覺功能治療耳聾的最佳細胞來源和主要研究細胞

1.3 神經(jīng)干細胞

神經(jīng)干細胞來源于具有干細胞特性的海馬組織。由于神經(jīng)干細胞和內(nèi)耳細胞都來自外胚層和神經(jīng)前體細胞，因此就內(nèi)耳細胞移植替代治療來說，神經(jīng)干細胞也是一個比較合適的選擇。神經(jīng)干細胞作為誘導分化為聽覺系統(tǒng)特異性細胞的重要細胞來源具有以下幾個優(yōu)勢：

1、具有自我更新和分化為多種類型細胞的能力。

2、具有很強的可塑性。

神經(jīng)干細胞移植后可分化為HCs、神經(jīng)元和膠質(zhì)細胞，增殖和整合到成年和新生哺乳動物的損傷內(nèi)耳中。移植入損傷耳蝸的神經(jīng)干細胞遷移分布到內(nèi)耳各個部位，包括膜迷路、感覺上皮、螺旋緣等。Hu等[20]把神經(jīng)干細胞注入耳蝸底端鼓階處，發(fā)現(xiàn)它們遷移到聽神經(jīng)纖維、Corti氏器和SGNs等處并分化為神經(jīng)膠質(zhì)細胞。Parker等[21]將胚胎小腦來源的神經(jīng)干細胞移植到耳蝸鼓階內(nèi)，發(fā)現(xiàn)干細胞可分化為各類神經(jīng)細胞。神經(jīng)干細胞植入后從鼓階遷移到蝸螺旋管和Corti氏器內(nèi)，而且耳蝸的微環(huán)境可將干細胞誘導分化為耳蝸所需細胞類型。耳蝸蝸軸內(nèi)的SGNs和Corti氏器感覺上皮細胞可以釋放引導神經(jīng)元從移植區(qū)域遷移到目標部位的一系列生長因子，并支持神經(jīng)元的存活。神經(jīng)干細胞移植后有效地存活、遷移到功能性區(qū)域SGNs，使神經(jīng)干細胞作為一種外源性細胞移植替代損傷和丟失SGNs細胞成為可能。

1.4 骨髓間充質(zhì)細胞

骨髓間充質(zhì)細胞是具有多向分化潛能的干細胞，主要來自成年哺乳動物骨髓的間質(zhì)微環(huán)境中。骨髓間充質(zhì)細胞不僅可以分化為外胚層的細胞，還可以分泌支持細胞生長的細胞因子，骨髓間充質(zhì)細胞在生長因子等作用下向神經(jīng)細胞分化，從而修復受損細胞，是目前能為臨床應用的為數(shù)不多的一種干細胞[22]。骨髓間充質(zhì)細胞進行內(nèi)耳移植的研究重點在于選擇導入方式和比較導入后轉分化為SGNs神經(jīng)元數(shù)量的不同。Kamiya等[23]將間充質(zhì)干細胞灌注到外半規(guī)管后發(fā)現(xiàn)細胞在耳蝸內(nèi)遷移，適當時間后檢測顯示聽力水平明顯提高。Matsuoka等[24]將試驗動物SGNs神經(jīng)元損傷而保持HCs完整，然后通過鼓階和蝸軸兩種途徑注射骨髓間充質(zhì)細胞，發(fā)現(xiàn)細胞可以在耳蝸蝸軸內(nèi)存活卻很少在中階內(nèi)存活，并且通過鼓階注射的骨髓間充質(zhì)細胞不能遷移到蝸軸內(nèi)。由于中階內(nèi)的內(nèi)淋巴液處于高鉀環(huán)境，高鉀對細胞具有毒性作用，局部環(huán)境不適宜骨髓間充質(zhì)細胞的存活和生長，因此移植細胞不能存活，中階內(nèi)干細胞數(shù)量極少。除此之外，Corti器的細胞復合體結構-支持細胞間的粘附連接和緊密連接，對移植細胞來說也是一個挑戰(zhàn)。

總之，研究領域已通過間充質(zhì)干細胞移植來進行聽力的功能性恢復，但是需要進一步探究間充質(zhì)干細胞在內(nèi)耳功能恢復中的確切轉分化能力以及重建損失細胞的作用。

1.5 誘導多功能干細胞

誘導多能干細胞是類似胚胎干細胞的一種細胞類型。多能干細胞能夠分化成外胚層、內(nèi)胚層和中胚層[25]，尤其是源自囊胚內(nèi)細胞團的胚胎干細胞，打開了再生醫(yī)學的新領域[26,27]。多能干細胞存在于大多數(shù)組織中，并從單個胚層分化為細胞，最常見的是間充質(zhì)干細胞[28,29]。這些細胞最初僅從骨髓中分離出來，現(xiàn)已知存在于各種組織類型中，如脂肪組織、骨、臍帶和外周血、羊膜、皮膚、毛囊等。這些細胞具有分化成脂肪組織、骨、軟骨和肌肉的能力[30]。雖然能夠自我更新，但它們只能分化為一種特定的細胞類型并形成單一的細胞[31,32]。內(nèi)源性干細胞駐留在所有組織中，對組織穩(wěn)態(tài)和重塑過程非常重要[28,33]。它們起源于個體發(fā)育并保持靜止狀態(tài)，直到局部刺激激活它們的增殖、分化或遷移[34-37]。耳蝸解剖復雜，周圍有骨質(zhì)包裹，移植干細胞成瘤后可以迅速破壞精細的器官和鄰近的面神經(jīng)。因此，利用誘導多能干細胞替代治療的研究關鍵在于找到調(diào)控細胞起始與終止增殖的辦法，從而調(diào)節(jié)細胞循環(huán)過程，減少成瘤風險。

大量的聽覺輔助方法發(fā)展迅速，但現(xiàn)如今在臨床中沒有任何方法可以通過恢復受損的內(nèi)耳解剖和生理結構來恢復或改善聽覺。隨著干細胞的發(fā)現(xiàn)和深入研究，通過其修復受損的內(nèi)耳結構和正常解剖從而使恢復聽覺成為可能。干細胞來源分為兩種，即激發(fā)自身內(nèi)耳干細胞使其重新獲得自我更新及分化能力；異體來源的誘導分化后的內(nèi)耳細胞修復受損的自身內(nèi)耳細胞。但其實際應用仍存在較多桎梏，比如自身來源及異體來源干細胞的選擇結果是否會影響治療效果；移植入相應部位的干細胞是否會發(fā)揮期待的作用；排斥反應的出現(xiàn)是否會影響自身內(nèi)耳功能；如何有效精確調(diào)控細胞的增殖及凋亡等等。

具有多向分化潛能、自我更新及增殖能力的各類干細胞群是細胞替代治療的理想選擇。但是，各細胞類群存在不同的優(yōu)勢及缺陷。胚胎干細胞的獲取受到道德倫理的制約，且在體內(nèi)無限增殖有造成畸胎瘤的危險。神經(jīng)干細胞取材因其解剖部位危險而獲取困難。骨髓間充質(zhì)干細胞較易從骨髓中提取，容易培養(yǎng)擴增，有多向分化潛能。移植治療的最佳方法是采用耳源性干細胞，具有向內(nèi)耳細胞定向分化的特性，從而重建HCs形態(tài)和神經(jīng)連接，恢復功能。各類干細胞在內(nèi)耳細胞替代治療上有著廣闊的前景，為SNHL患者的治療帶來希望。

2 內(nèi)耳移植的途徑

內(nèi)耳的干細胞移植途徑是保證細胞替代治療的一個主要因素。若使干細胞內(nèi)耳移植實用于臨床，必須確保將移植細胞精確地定位于目標部位，保證移植細胞存活率，調(diào)控細胞循環(huán)增殖程序，最大限度降低其易變性、致瘤性等。移植途徑必須確保外源性移植細胞能夠精準、高效、高存活率地定位于靶器官，而又不影響宿主器官的功能與正常解剖形態(tài)，要以盡可能減少對內(nèi)耳結構和功能的損傷，最大程度恢復內(nèi)耳功能為原則。但是因為耳蝸組織解剖位置深在，結構比較復雜，體積小，造成內(nèi)耳細胞移植替代治療研究進展緩慢，將移植細胞誘導至目標位置并保證存活率、自我更新及分化能力是目前干細胞移植治療中亟待解決的問題，所以必須探索出最有效的運送的途徑和方法。

干細胞移植方式包括靜脈注射[38]、蛛網(wǎng)膜下腔穿刺移植[39]、內(nèi)耳移植等等。目前，用于外源物質(zhì)內(nèi)耳移植的途徑有耳蝸外側壁[13]、圓窗膜、耳蝸底轉、鼓階[40,41]、中階及蝸軸[42]等。Iguchi等通過小鼠耳蝸外側壁移植細胞，術后3日聽力檢查顯示耳蝸ABR閾值明顯增高并且沒有明顯的恢復[43]。因此，耳蝸外側壁徑路可以破壞耳蝸功能，改變耳蝸離子內(nèi)環(huán)境和（或）內(nèi)淋巴電位。除此，經(jīng)外側壁方法移植到中階可能會損傷血管紋和耳蝸血供[44]。為了評估耳蝸外側壁徑路對耳蝸功能的影響，張等[13]比較了耳蝸外側壁和鼓階兩種徑路后發(fā)現(xiàn)，兩種徑路對耳蝸螺旋神經(jīng)元無明顯影響，毛細胞基本無缺失，術后耳蝸ABR閾值急劇升高，但1-2周后恢復并基本穩(wěn)定；術后1月，兩種徑路的耳蝸ABR閾值差異無統(tǒng)計學意義。由此，他得出結論：耳蝸外側壁移植干細胞的方法對耳蝸功能影響有限。分析上述實驗結果的差異性原因，可能是術后觀察時間不同，Iguchi研究了術后3日的ABR閾值，而張研究了術后1周、2周、1月的ABR閾值情況。耳蝸移植術后ABR閾值恢復需要一定時間。經(jīng)耳蝸底轉和圓窗膜移植干細胞后ABR閾值沒有顯著變化，只要操作足夠精細，兩種路徑對聽力都不會造成顯著影響。圓窗膜打孔后暫時的聽功能障礙是由圓窗膜注射引起的外淋巴漏造成的，未造成HCs的永久性損傷或缺失。由于內(nèi)外環(huán)境因素導致的耳蝸組織多種屏障損壞，通透性增加，外源性活性物質(zhì)更容易進入。其次，損害因素造成HCs與SGNs的變性、壞死，導致細胞表形以及內(nèi)部成分變化，增加受損細胞的敏感性。再次，耳蝸組織內(nèi)炎性介質(zhì)加強自身與外界物質(zhì)之間的粘附性。在良好的操作條件下，外源性物質(zhì)耳蝸內(nèi)移植的途徑均未引起耳蝸的炎癥反應，對聽力也無顯著影響。Stover[45]實驗證實，耳蝸底轉途徑的神經(jīng)干細胞轉染效率均高于圓窗膜途徑并指出耳蝸底轉轉染效率高有以下幾個原因：①經(jīng)鼓階注射至外淋巴的深度較大，更能促進外淋巴的流動，從而更好地將移植細胞團運送至耳蝸各個部位；②將鉆孔封閉后不可避免地減少耳蝸容積，增加外淋巴的壓力，加速外淋巴的流動；③圓窗膜鉆孔后淋巴液外漏，減小外淋巴壓力；④耳蝸底轉鉆孔會使骨屑落入鼓階外淋巴，改變耳蝸內(nèi)成分的動態(tài)平衡，增強耳蝸組織細胞的易感性。他們的實驗還[45]證實，圓窗膜注射與耳蝸底轉開窗操作方式均未引起中耳感染，前庭功能紊亂等并發(fā)癥。經(jīng)圓窗膜注射優(yōu)勢：操作時間短，可保持耳蝸的正常解剖，炎癥損傷輕，出血少，但技術難度大，易引起外淋巴漏。耳蝸底轉途徑優(yōu)勢：視野清晰，安全可靠，可重復多次導入的優(yōu)點，但可能造成局部出血、組織粘連和骨纖維化等并發(fā)癥。綜上所述，圓窗膜進路能夠保持耳蝸自然解剖結構的完整性，無需填補，可自行愈合；經(jīng)耳蝸底轉開窗進路途徑標準，應用最多。

Hildebrand等[46]經(jīng)中階徑路即通過圓窗插入一個經(jīng)過基底膜的細管，將胚胎外胚層組織移植到已致聾的豚鼠耳蝸，發(fā)現(xiàn)移植細胞存在于中階、鼓階和前庭階，由此可見，部分細胞可以在高鉀離子濃度的環(huán)境存活，但是移植細胞存活量少且整合功能尚不清楚。

Matsuoka[47]等比較鼓階注射和蝸軸注射兩種注射方法的特點，移植細胞分布都主要在鼓階和前庭階，而中階內(nèi)的分布很少，鼓階注射方法在蝸軸內(nèi)沒有移植細胞，而蝸軸注射方法可以在蝸軸內(nèi)看到較多的移植細胞，更有效地到達SGNs附近。外淋巴腔和蝸軸的解剖屏障可能對遷延起阻隔作用，所以蝸軸注射可能是較理想的方式。外淋巴腔和蝸螺旋管的解剖屏障不是絕對的，它們之間可能存在微小的解剖通道，鼓階注射的干細胞可以沿著該通道到達SGNs，并順著神經(jīng)纖維到達Corti氏器附近。鼓階途徑是將干細胞植入外淋巴，移植空間大，流動的外淋巴液有利于移植細胞的遷移及分布，并且鼓階處的開窗對神經(jīng)的損傷小，術后聽力影響不大[48]。除了上述途徑，靜脈注射、蛛網(wǎng)膜下腔穿刺移植研究及聽神經(jīng)干徑路也是學者們的興趣所在。劉日淵等[22]認為上述移植治療方式均可對內(nèi)耳造成或多或少的損傷，并嘗試經(jīng)蛛網(wǎng)膜下腔穿刺注射干細胞對耳聾進行治療，并取得相應成果。從解剖角度分析[49]，耳蝸外淋巴液通路可通過耳蝸水管與蛛網(wǎng)膜下腔相通。經(jīng)蛛網(wǎng)膜下腔注射干細胞從頸髓移動至延髓，再到耳蝸水管、小腦、內(nèi)聽道及大腦等組織。靜脈注射的干細胞受內(nèi)耳微環(huán)境影響可向血管內(nèi)皮祖細胞分化，也可以通過旁分泌的VEGF及損傷部位生成的VEGE提高外周血內(nèi)皮祖細胞的水平；VEGF亦可通過Rho/MRTF-A信號通路調(diào)節(jié)干細胞向內(nèi)皮細胞分化[50]，從而加快耳蝸血管紋內(nèi)皮細胞損傷的修復，治療內(nèi)耳損傷。有關淋巴系統(tǒng)及靜脈移植途徑植入干細胞治療耳聾的有效性及其作用機制仍需進一步研究。聽神經(jīng)干徑路主要為了替代變性的螺旋神經(jīng)元，可以同人工耳蝸植入聯(lián)合進行。移植胚胎干細胞從移植位置沿聽神經(jīng)干向外周和中樞遷移，但遷移到Rosenthal's管的細胞數(shù)量較少[51]。內(nèi)耳門附近，移植神經(jīng)母細胞到達未受損的聽神經(jīng)干后，細胞在蝸軸分化為螺旋神經(jīng)元細胞[52]。盡管聽神經(jīng)干移植似乎適合用來移植細胞，但移植細胞不能到達Rosenthal's管[53]。耳蝸移植可部分替代毛細胞，但對于螺旋神經(jīng)元損傷尚缺乏有效治療方法。細胞移植為螺旋神經(jīng)元變性引起的感音神經(jīng)性耳聾帶來了希望。內(nèi)耳被淋巴液填充，周圍包圍骨質(zhì)，內(nèi)耳移植后，外源性細胞存在于外淋巴液或蝸軸中，外淋巴液主要由離子和葡萄糖組成，僅含極少的生長因子和神經(jīng)營養(yǎng)因子，而耳蝸僅有一條終末動脈供血，血供較差，由此可見耳蝸不適合外源細胞存活和繁殖。因此，如何把細胞移植到位置深在、解剖復雜、富有間隔及淋巴液的耳蝸，為移植細胞提供合適的微環(huán)境，以及如何提高移植細胞在耳蝸內(nèi)的存活率而不對耳蝸形成進一步的傷害，是開展內(nèi)耳細胞移植治療的重點及難點。

內(nèi)耳獨特的生理結構和功能決定了SNHL的治療不僅需要耳神經(jīng)生物學研究者的艱苦探索，更需要多學科交叉發(fā)展，以提供創(chuàng)造性的研究工具和技術方法。當然，除內(nèi)耳干細胞移植，基因治療也在耳聾尤其是遺傳性耳聾的防治中發(fā)揮重要作用?？赏ㄟ^精準定位至有害等位基因的靶位插入和過表達缺失或下調(diào)的基因，從而進行疾病的表型修復，修復損傷、丟失或失功能的內(nèi)耳成分，減輕環(huán)境對于內(nèi)耳的損傷[54]。

SNHL是耳科常見的發(fā)病率最高的致殘性感官缺陷，主要發(fā)病部位在耳蝸HCs和SGNs，損傷后難以再生。由于其發(fā)病機制復雜、致病因素多樣等缺乏有效的、有針對性的治療方案。隨著分子生物學研究的深入和基因工程技術的發(fā)展，為由老年性、自身免疫性、噪聲性、感染性、藥物中毒性等因素引起的聽覺系統(tǒng)損傷提供了科學基礎。雖然助聽設備的使用和人工聽覺植入技術仍是臨床中使用率最高、效果較好的方案，但是，移植干細胞替代治療在臨床中的應用研究也開始處于起步發(fā)展階段。建立有限的毛細胞數(shù)量的動物模型，限制了許多分子生物學和生物化學分析，從而需要建立更為穩(wěn)定的毛細胞體外培養(yǎng)細胞系，獲得高效、安全、控釋和靶向特異的外源分子內(nèi)耳遞送技術[54]?，F(xiàn)階段面臨許多問題，包括干細胞獲取、純化、移植途徑、培養(yǎng)鑒定、遷移分化及存活率等問題。干細胞增殖、分化機制相當復雜，使其成功的分化為HCs或SGNs細胞需要找到誘導HCs或SGNs細胞生成的相關因素，應用這些因素到研究中并成功應用于臨床，還需進一步深入探索。