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    蒙醫(yī)溫針對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用△

    2018-11-20 08:13:18蘇都斯琴莫日根李玉棠
    中國民族醫(yī)藥雜志 2018年8期
    關(guān)鍵詞:腦缺血脂質(zhì)腦組織

    蘇都斯琴 莫日根 李玉棠

    (1.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)2016級碩士研究生,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010010; 2.呼倫貝爾市蒙醫(yī)醫(yī)院,內(nèi)蒙古 海拉爾 021000; 3.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬人民醫(yī)院,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010010)

    缺血性腦血管疾病是嚴(yán)重威脅人類的一種常見病和多發(fā)病,是引起人類死亡的三大原因之一。缺血引起腦神經(jīng)細(xì)胞損傷和死亡的作用機(jī)制多樣、復(fù)雜。防治缺血性腦血管疾病是目前人類迫切需要解決的難題[1]。蒙醫(yī)溫針對缺血性腦血管病的治療作用好,能夠改善腦卒中后神經(jīng)功能缺損癥狀[2-6]。由于腦缺血后神經(jīng)元損傷一旦達(dá)到不可逆階段,就無法自然修復(fù),后果嚴(yán)重,因而探討其有效的防治措施和發(fā)病機(jī)理,是國內(nèi)外醫(yī)學(xué)研究的熱點和重點[7]。本實驗選擇凝閉大腦中動脈致大鼠局灶性腦缺血為模型,通過蒙醫(yī)溫針治療大鼠腦缺血早期作用,探討其對神經(jīng)功能缺損、腦梗死體積及對大腦皮層超氧化物岐化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量影響,并進(jìn)一步探討蒙醫(yī)溫針防治缺血性腦損傷的機(jī)理。

    1 材料與方法

    1.1 分組 將SD雄性大鼠[體重(280 ±20)g],由中國解放軍醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物中心提供,動物許可證號:SCXK-(軍)2007-004。將大鼠在20℃的環(huán)境下養(yǎng)7d以上后將大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為假手術(shù)組、模型組、藥物對照組、常規(guī)針刺組、蒙醫(yī)溫針組,16只/組。

    1.2 模型制備及干預(yù)方法 采用Zea Longa[8]方法并加以改進(jìn),制備急性腦缺血再灌注大鼠模型。將大鼠進(jìn)行假手術(shù)前12天禁食,但不禁水。假手術(shù)組只分離動脈,不結(jié)扎、插線。大鼠清醒后1h 進(jìn)行治療。蒙醫(yī)溫針組,選取頂會穴、赫依穴。頂會穴選穴方法:大鼠雙耳尖的連線及頭頂正中線的交集處。赫依穴選穴方法:位于第七頸椎與第一胸椎間,下凹正中以及左右兩側(cè)約5mm處各有一穴位。銀針刺入穴位5mm后連接電熱針治療儀(電流為100mA,溫度控制為40℃左右),留針30min;常規(guī)針刺組,選取大椎、氣海、命門穴位,分別毫針直刺5mm、2mm、4mm,留針30mm,留針期間每隔10min行針1次;藥物對照組,按照尼莫地平片10.8mg/(kg.d)劑量,灌胃給藥1次。模型組、假手術(shù)組:常規(guī)飼養(yǎng),不進(jìn)行任何干預(yù)治療。

    1.3 標(biāo)本采集與檢測 各組相應(yīng)時段斷頭處死,快速取手術(shù)側(cè)大腦,置液氮中速凍。檢測時制成10%腦組織勻漿。SOD活性采用黃嘌呤氧化酶法;LPO含量采用硫化巴比妥酸(TBA)法測定過氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物中的丙二醛(MDA)。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 數(shù)據(jù)由SPSS 19.0統(tǒng)計軟件,用ANOVA方法來分析多組間的比較。治療前后的差異由t 檢驗分析。觀測指標(biāo)的平均數(shù)用X±S表達(dá),多組間比較。

    2 結(jié)果

    2.1 治療前后的變化 見表1.

    表1 兩種評分方法比較各組神經(jīng)功能

    注:與模型組比較△P>0.05;▲P< 0.05 , ▲▲P< 0.01

    2.2 大鼠MCAO-R腦組織活性變化 見表2。

    表2 對大鼠MCAO-R不同時間段的缺血腦組織的MDA, SOD比較±S)

    組別MDA(ng/mL)SOD(ug/mL)24h3d7d24h3d7d 假手術(shù)組3.23±0.63▲▲3.01±0.85△3.51±0.89▲▲1.15±0.12▲▲1.24±0.36▲▲1.14±0.32△(n=8)(n=8)(n=8)模型組6.58±0.694.28±1.575.09±0.980.22±0.070.29±0.060.91±0.34 (n=9)(n=9)(n=8)藥物對照組4.22±0.01▲▲1.97±0.96▲1.75±0.36▲▲0.49±0.05▲0.53±0.04▲1.25±0.27△(n=8)(n=8)(n=8)常規(guī)針刺組3.13±0.74▲▲3.38±2.14△3.77±1.01▲0.44±0.03△0.49±0.06△☆1.35±0.09▲(n=10)(n=8)(n=8)蒙醫(yī)溫針組5.18±1.04▲2.08±1.39▲2.39±0.98▲▲0.46±0.05▲0.47±0.04△1.27±0.34△(n=10)(n=9)(n=8)

    注:與模型組比較,△P> 0.05; ▲P< 0.05 ; ▲▲P< 0.01

    3 討論

    近十幾年國內(nèi)外的研究認(rèn)為,自由基連鎖反應(yīng)是腦缺血再灌注損傷的最重要原因。許多文獻(xiàn)均報道,大鼠腦缺血再灌注過程中,腦組織中SOD活力降低。自由基是指某些原子的外層軌道中有不成對的電子基因,它具有非?;顫姷幕瘜W(xué)性質(zhì),可以直接攻擊細(xì)胞或損傷,產(chǎn)生更多的自由基基因,甚至引起鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。目前認(rèn)為:自由基連鎖反應(yīng)是腦梗塞的核心病理環(huán)節(jié)。腦缺血時自由基急劇增加,它對細(xì)胞的損害作用是引起生物膜不飽和脂肪酸,故更易發(fā)生脂質(zhì)過氧反應(yīng)并形成大量脂質(zhì)過氧化物(LPO),因此測定LPO穩(wěn)定的代謝產(chǎn)物MDA含量可反映脂質(zhì)過氧化程度,而超氧化物歧化酶(SOD)是生物體內(nèi)主要的抗氧化酶一超氧自由基清除劑,SOD活性的高低間接反應(yīng)了機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度[9-13]。

    本實驗結(jié)果顯示了腦缺模型大鼠腦組織MDA含量顯著高于假手術(shù)組織(P<0.01),表明各個時問段模型組發(fā)生了較強(qiáng)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng),且隨著缺血時間延長,呈持續(xù)加重。SOD活性呈下降狀態(tài)。蒙醫(yī)溫針可明顯降低MDA含量,提高SOD活性。推測其作用原理與抑制黃嘌呤氧化酶及穩(wěn)定線粒體膜結(jié)構(gòu)有關(guān),對SOD活性的影響可能是蒙醫(yī)溫針清除了部分自由基從而減少了SOD的清除。

    總之,蒙醫(yī)溫針可以明顯對抗大鼠MCAO后自由基的產(chǎn)生,提高機(jī)體自由基的清除能力,增強(qiáng)SOD活性,這將有利于缺血神經(jīng)細(xì)胞功能損傷的恢復(fù),對腦缺血的治療有重要意義。

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