CIK細胞聯(lián)合加味二陳湯治療化療耐藥的晚期NSCLC的臨床研究

丁 倩，李亞玲，王莉娟，蔡 蕊，呂盼盼，丁浩平，熊紹權(quán)

[關(guān)鍵字] CIK；加味二陳湯；肺癌；脾虛痰濕證

化療作為晚期NSCLC主要治療方法，自上世紀90年代確立了第3代含鉑方案為一線標準治療的地位以來，由于其不良反應(yīng)、耐藥性以及腫瘤患者免疫力低下等因素，其療效已達到一個平臺，患者獲益受到限制，中位PFS為4～6個月，中位總生存期為8～10個月[1]，總生存率提高約 4%[2]。因此，迫切需要尋找化療耐藥后的新治療策略。細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞（CIK）是一種腫瘤過繼免疫治療，該方法有副反應(yīng)少、提高生存質(zhì)量、延長生存期等優(yōu)點[3-4]。本研究以CIK細胞聯(lián)合加味二陳湯治療化療耐藥的晚期NSCLC患者取得了較好療效，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 病例資料 選擇2013年1～11月在成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤科自愿接受CIK細胞或聯(lián)合加味二陳湯治療的化療耐藥晚期NSCLC患者57例，在充分知情告知的情況下，由患者自行選擇不同的CIK治療方案，根據(jù)治療方案的不同，將患者分為治療組（n=34）和對照組（n=23），兩組一般資料比較無顯著差異（P＞0.05，表1）。

1.2 病例選擇標準 納入標準：（1）符合晚期NSCLC病理診斷；（2）已接受一線或二線化療方案，并耐藥；（3）Karnofsky 功能狀態(tài)評分（KPS）≥60 分，預(yù)期生存時間≥6個月；（4）不伴腦轉(zhuǎn)移；（5）中醫(yī)辨證符合脾虛痰濕證。排除標準：（1）用藥間斷時間持續(xù)＞2 w；（2）觀察中合用分子靶向藥物等其他抗腫瘤方法；（3）合并心腦血管、肝腎等嚴重疾病。

1.3 CIK細胞制備及檢測 采集外周靜脈血50 ml，用血細胞分離機采集單個核細胞（PBMC），淋巴細胞分離液密度梯度離心法進一步純化，無菌生理鹽水洗滌 2 次后，將 PBMC 按照（1～2）×106/ml的濃度懸浮于無血清培養(yǎng)基中，37℃、5%CO2環(huán)境下加入重組干擾素 -γ（IFN-γ，1000 U/ml）培養(yǎng)，24 h 后加入CD3 單克隆抗體（50 ng/ml）和白細胞介素 -2（IL-2，300 U/ml）誘導(dǎo)細胞生長增殖，每3 d半量換液或擴瓶一次，并補充IL-2（300 U/ml）。在第14 d收獲CIK細胞，并用流式細胞儀采用熒光抗體法檢測T細胞亞群（CD3+、CD56+，即CIK主要效應(yīng)細胞）比例。 檢測病原學(xué)陰性、內(nèi)毒素＜5 Eu后，制備成細胞懸液。

表1 兩組基線資料比較

1.4 治療方法 對照組只接受CIK治療，治療組接受加味二陳湯治療2 w后，聯(lián)合CIK治療。

1.4.1 CIK治療 制備的CIK細胞懸液洗滌后，懸于生理鹽水150 ml，用輸血器1～2 h內(nèi)輸完，1次/2 d，5次為1個療程，每療程間隔3～4 w，所有患者均治療3個療程。

1.4.2 中藥治療 加味二陳湯組方：法半夏15 g，天南星 15 g，陳皮 15 g，川芎 10 g，蒼術(shù) 10 g，茯苓10 g，甘草5 g。合并其他證型者加減用藥：如氣虛者，加黃芪、人參等益氣；血虛者，加阿膠、當歸等補血。用法：水煎服，每日一劑，連續(xù)用藥直至觀察達到終點。

1.5 觀察指標 （1）無進展生存期（PFS）：為治療第1 d至出現(xiàn)腫瘤進展、臨床進展證據(jù)或者因任何原因?qū)е禄颊咚劳龅臅r間。（2）生活質(zhì)量：在治療前后，采用KPS評分評價患者生活質(zhì)量，評分提高≥10分為改善，下降≥10分為降低，提高或下降＜10分為穩(wěn)定。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS21.0統(tǒng)計軟件分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗，計量資料采用t檢驗，等級資料采用ridit檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組PFS比較 治療組與對照組中位PFS分別為 3.8個月、2.9個月（P＜ 0.05，圖 1）。

圖1 兩組PFS比較

2.2 兩組生活質(zhì)量比較 治療組的生活質(zhì)量改善率顯著高于對照組（P＜0.05，表2）。

表2 兩組生活質(zhì)量比較[n（%）]

2.3 不良反應(yīng) 治療期間未發(fā)現(xiàn)明顯中藥相關(guān)消化道反應(yīng)，如惡心、嘔吐等，以及肝腎功損害等不良反應(yīng)。

3 討論

目前，肺癌的發(fā)病率和死亡率居惡性腫瘤的首位，其中NSCLC占80%以上，5年生存率僅8%～10%[5]，大部分患者確診時已失去手術(shù)機會，一線標準化療療效已達平臺期，二線化療有效率一般低于10%，患者難以從中進一步獲益[6]。隨著分子靶向的研究發(fā)展，一部分患者可以從基于表皮生長因子受體（EGFR）基因突變和間變性淋巴瘤激酶（ALK）重排的靶向治療中獲益，但該類治療也終將耐藥，部分患者將恢復(fù)化療。因此，探討化療耐藥后的治療策略尤為重要，CIK免疫及中藥治療是重要的選擇。

CIK是具有抗腫瘤活性的免疫效應(yīng)細胞，正常組織中含量極少，能在體外誘導(dǎo)大量增殖，其副作用少、安全性高、殺瘤譜廣、腫瘤殺傷活性強、回輸后無需外源因子維持等[7]。有報道表明，CIK用于肝癌、胃癌等多種惡性腫瘤可提高臨床療效、增強免疫、降低不良反應(yīng)等[8-10]，在晚期NSCLC輔助或維持治療中也取得了類似效果[11-12]。

二陳湯出自《太平惠民和劑局方》，其主要成分半夏、茯苓等，具有理氣健脾、燥濕化痰之功效。多項研究提示[13-14]，以二陳湯為主的中藥對晚期NSCLC可減輕癥狀、提高生活質(zhì)量、降低化療毒性等，具有抗腫瘤、抑制轉(zhuǎn)移、增強免疫等效應(yīng)[15-16]。

本研究以CIK細胞聯(lián)合加味二陳湯治療化療耐藥的晚期NSCLC，結(jié)果顯示，治療組中位PFS（3.8個月）顯著長于對照組（2.9個月）（P＜ 0.05），提示加味二陳湯可進一步增強CIK細胞抗腫瘤、延長生存期效果。對治療前后患者生存質(zhì)量改善的分析結(jié)果顯示，治療組的生活質(zhì)量改善率顯著高于對照組（58.82%vs 30.43%，P＜0.05），與其他研究報道結(jié)果一致[17]。安全性分析顯示，治療期間，治療組未發(fā)現(xiàn)有明顯中藥相關(guān)的不良反應(yīng)，提示CIK聯(lián)合加味二陳湯治療安全性好。

綜上所述，CIK細胞聯(lián)合加味二陳湯治療化療耐藥的晚期NSCLC，可延長患者生存期，提高生活質(zhì)量，且安全性好，值得進一步研究。