納豆紅曲葡萄籽組合輔助降血脂功能試驗

王榮昌 朱勤 郁樺 李玲 王玉瑩 甘露 汪普林 匡榮 朱社敏

摘 要 目的：研究納豆紅曲葡萄籽組合輔助降血脂功能。方法：輔助降血脂功能實驗設(shè)0.33、0.67、 2.0g/kg·bw低、中、高三個劑量組，分別相當(dāng)于人推薦量的5、10、30倍，同時設(shè)空白對照組、模型對照組。實驗采用混合型高脂血癥動物模型，連續(xù)30天經(jīng)口給予大鼠不同濃度的受試樣品液，空白對照組、模型對照組同時給予等量滅菌純化水。實驗結(jié)果：模型對照組與空白對照組比較，大鼠血清總膽固醇（TC）、甘油三脂（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）水平升高，高密度脂蛋白（HDL-C）水平降低，差異均具有顯著性意義（P<0.01），模型成立；給予受試樣品30天后，與模型對照組比較，低、中、高劑量組大鼠TC水平及TG水平均下降，差異均具有顯著性意義（P<0.01），各劑量組LDL-C、HDL-C 水平均未見明顯差異。結(jié)論：納豆紅曲葡萄籽組合在本試驗條件下具有輔助降血脂功能。

關(guān)鍵詞 納豆；紅曲；葡萄籽；輔助降血脂

1 綜述

納豆是大豆經(jīng)過納豆芽孢桿菌發(fā)酵而成，其含有的納豆激酶能夠有效清除人體血液內(nèi)的血栓[1]，且研究表明納豆可降膽固醇和甘油三酯。因此，納豆具有溶解血栓、降血壓、降血脂等功能[2-3]。紅曲是首先發(fā)現(xiàn)具有降脂作用的中藥，其降脂成分為洛伐他汀，洛伐他汀是膽固醇合成途徑中HMG-CoA還原酶的競爭性抑制劑，可以有效減少或阻斷內(nèi)源性膽固醇的合成[ 4 ]， 葡萄作為藥食兼用植物， 其醫(yī)療保健作用受到國內(nèi)外預(yù)防醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的廣泛關(guān)注。葡萄籽提取物的主要功能成分是原花青素 ，原花青素等具有降血脂、抗氧化、致突變等作用[5-6]。納豆紅曲葡萄籽組合物是由納豆、紅曲、葡萄籽提取物制成的保健食品，本文研究了該組合制劑對高脂血癥模型大鼠TC、TG、HDL-C、LDL-C的影響，為其更好的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

2 材料與方法

2.1 樣品與劑量：納豆紅曲葡萄籽膠囊樣品由某生物科技有限公司提供，人用推薦劑量為66.67mg/kg.bw/日（人以60kg計）。按國食藥監(jiān)?；痆2012]107號文附件6輔助降血脂功能評價方法，本實驗設(shè)三個劑量組、空白對照組和模型對照組。空白對照組給予維持飼料，模型對照組及三個劑量組給予模型飼料，低、中、高三個劑量分別為0.33、0.67和2.0g/kg.bw/日（相當(dāng)于人推薦量的5、10和30倍），最低劑量組折合成原藥材：相當(dāng)于納豆0.25 g/ kg.bw/日、紅曲0.033 g/kg.bw/日、葡萄籽1.410.033 g/kg.bw/日（該提取物得率3.5%）。

2.2 實驗動物及設(shè)施：本實驗由浙江省食品藥品檢驗研究院操作，該機(jī)構(gòu)為國家食品藥品監(jiān)督管理局遴選確定保健食品注冊檢驗機(jī)構(gòu)。實驗用SD大鼠由昭衍（蘇州）新藥研究中心有限公司提供，生產(chǎn)許可證號為SCXK（蘇）20130003，清潔級，雄性，購入時體重為150-170g，動物質(zhì)量合格證號為No.201710087。維持飼料和模型飼料由江蘇協(xié)同醫(yī)藥生物工程有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)許可證號為蘇飼證（2014）01008，檢測環(huán)境條件：實驗動物使用許可證號為SYX（浙）2016-0009，飼養(yǎng)環(huán)境：溫度范圍20-25℃，相對濕度范圍40-70%。

2.3 實驗試劑與儀器：實驗試劑：總膽固醇測定試劑盒（酶試劑法）、甘油三脂測定試劑盒（形試劑法）采購于德賽診斷系統(tǒng)（上海）有限公司；高密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒R1及劑盒R2、低密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒R1及試劑盒R2均采購于日本和光純藥工業(yè)株式會社。試驗儀器：株式會社日立制作所生產(chǎn)的日立全自動生化分析儀（7180型）；余姚市金諾天平儀器有限公司生產(chǎn)的電子天平（TD12001型）。

2.4 統(tǒng)計方法：實驗數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（ x±s）表示，方差分析和統(tǒng)計學(xué)檢驗采用孫瑞元等編輯的DAS統(tǒng)計軟件中多組均數(shù)分析。先對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗，若方差齊，采用單因素方差分析進(jìn)行總體比較，發(fā)現(xiàn)差異再用T檢驗法進(jìn)行多個劑量組與一個對照組均數(shù)間的兩兩比較。若方差不齊則改用秩和檢驗進(jìn)行統(tǒng)計。

3 實驗方法

按國食藥監(jiān)保化[2012]107號文附件6輔助降血脂功能評價方法進(jìn)行實驗，具體如下：

3.1 造模：取適應(yīng)期結(jié)束SD大鼠112只，體重180-220g，按體重隨機(jī)取12只大鼠為空白對照，大鼠給予維持飼料；其眾大鼠均給子定制的模型飼料。1周后，所有大鼠均不禁食眼內(nèi)毗采血，采血后分離血清，用全自動生化分析儀測定血清TC、TG、HDL-C、LDL-C水平。選取造模成功大鼠48只，根據(jù)TC水平將大鼠隨機(jī)分成低、中、高三個樣品組和一個模型對照組，每組12只，分組后各樣品組和模型對照組比較TC、TG、LDL-C 和HDL-C水平及初始體重差異應(yīng)均無顯著性，空白對照12只大鼠為空白對照組。

3.2 受試樣品的給予：低、中、高三個樣品組分別灌胃給予相應(yīng)的樣品液，模型對照組和空白對照組大鼠均灌胃給予滅菌的純化水，每天一次，連續(xù)30天，試驗期間，空白對照組給予維持飼料，模型對照組和各樣品組給予模型飼料。

3.3 指標(biāo)檢測：在給受試樣品第1、2、3、4周，稱取大鼠體重。給受試樣品第30天，在給予受試樣品1h后，大鼠不禁食限內(nèi)毗采血，采血后分離血清，用全自動生化分析儀測定血清TC、TG、HDL-C、LDL-C水平。

4 實驗結(jié)果

4.1 造模后大鼠分組試驗結(jié)果

結(jié)果見表1.原始數(shù)據(jù)均符合方差齊性要求，與空白對照組比較，模型對照組大鼠TC、TG、LDL-C水平升高，HDL-C水平降低，差異均具有顯著性意義（P<0.01），說明模型成立，與模型對照組比較，各劑量組大鼠TC、TG、HDL-C、LDL-C差異均無品書性意義（P>0.05），即分組符合要求。

4.2 輔助降血脂功能評價試驗結(jié)果

結(jié)果見表2.原始數(shù)據(jù)均符合方差齊性要求，與空白對照組比較，模型對照組大鼠TC、TG、LDL-C水平升高，HDL-C水平降低，差異均有顯著性意義（P<0.01）， 說明模型成立。與模型對照組比較，低、中、高劑量組大鼠TC水平及TG水平均下降，差異均具有顯著性意義（P<0.01），同時，各劑量組大鼠的HDL-C、LDL-C水平和模型對照組比較差異均無顯著性意義（P>0.05），顯示本試驗組合具有輔助降血脂功能。

4.3對大鼠體重影響試驗結(jié)果

結(jié)果見表3。原始數(shù)據(jù)均符合方差齊性要求。與空白對照組比較，模型對照組大鼠第2、3、4周體重升高，差異均有顯著性意義（P<0.05或P<0.01）；與模型對照組比較，高劑量組大鼠第1、2、3、4周體重下降，差異均有顯著性意義（P<0.05），高劑量組大鼠第1、2、3、4周體重與空白對照組比較，體重差異無顯著性意義（P>0.05）。其余各劑量組大鼠體重差異均無顯著性意義（P>0.05）.

5 小結(jié)與結(jié)論

實驗結(jié)果表明：與空白對照組比較，模型對照組大鼠血清TC、TG、LDL-C水平升高，HDL-C水平降低，差異均具有顯著性意義（P<0.01），混合型高脂血癥動物模型成立，且第2、3、4周體重升高（P<0.05或P<0.01）；給予受試樣品30天后，與模型對照組比較，低、中、高劑量組大鼠TC水平及TG水平下降，差異均具有顯著性意義（P<0.01），同時，各劑量組大鼠的LDL-C、HDL-C水平和模型對照，組比較差異均無顯著性意義（P>0.05），高劑量組大鼠第1、2、3、4周體重下降，差異均有顯著性意義（P<0.05）結(jié)論：納豆紅曲葡萄籽組合具有輔助降血脂功能。

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