淺談高效液相色譜技術(shù)在食品檢測中的應(yīng)用

顧靜靜

摘要：食品行業(yè)發(fā)展以及人類健康提升中，食品檢測發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，隨著食品安全檢測標準的逐步提升，高效液相色譜技術(shù)呈現(xiàn)出無法比擬的優(yōu)勢。未來高效液相色譜技術(shù)將會實現(xiàn)更好地發(fā)展并為人們生活、健康等做出更大的貢獻。作為食品檢測人員需要在日常工作中積極總結(jié)經(jīng)驗教訓(xùn)，完善檢測技術(shù)方法，更好地促進食品行業(yè)的安全、健康發(fā)展。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜技術(shù)；食品檢測；應(yīng)用

一、高效液相色譜設(shè)備結(jié)構(gòu)及原理

1、高效液相色譜設(shè)備結(jié)構(gòu)

高效液相色譜設(shè)備涉及到幾個部分，主要包括高壓泵、進樣器、色譜柱、檢測器以及收集處理數(shù)據(jù)設(shè)備等。高壓泵要有一定的耐腐蝕性，使得流動相和樣品通過色譜分離柱和檢測系統(tǒng)時有足夠的動力。色譜柱能夠?qū)ξ镔|(zhì)進行有效的分離，流出液中濃度變化可以通過檢測器轉(zhuǎn)變?yōu)楣鈱W(xué)或電學(xué)信號。數(shù)據(jù)收集處理設(shè)備能夠?qū)z測器中檢測到的信號呈現(xiàn)在屏幕上。

2、原理分析

對于食品中的合成著色劑，在提取時可以使用液———液分配法等進行，制作成水溶液，利用高效液相色譜儀器實現(xiàn)多頻率的分離，通過標準化的溶液實現(xiàn)標準化曲線的建設(shè)，利用外標法，通過保留時間的長短進行準確地定性，定量一般是通過峰面積進行的。利用高壓泵將要檢測的液體吸入到儀器中，對壓力和流量計算后，進入到進樣器中，與流動相一起進入到色譜柱中，對比溶劑兩相間樣品分配系數(shù)的不同，在色譜柱中進行分離，檢測器對于不同時間流入的信號進行收集，通過數(shù)據(jù)處理設(shè)備獲得色譜圖，然后再次分析。

二、高效液相色譜技術(shù)在食品添加劑中的運用

2.1食品甜味劑的檢測

根據(jù)有無營養(yǎng)價值，甜味劑可分為營養(yǎng)型與非營養(yǎng)型甜味劑，一般所說的甜味劑是人工合成的非營養(yǎng)型甜味劑。糖精鈉是使用時間最長的人工合成甜味劑之一，WHO制訂的ADI（亞德諾半導(dǎo)體）為0～2.5 mg/kg。單獨測定食物中的糖精鈉方法相對簡單，應(yīng)用反相色譜柱，以甲酸0.02 mol/L、乙酸銨（5∶95）為流動相，紫外檢測器，波長選擇230 nm，能很容易地獲得結(jié)果，這是國家規(guī)范檢驗方法。使用反相離子對分配型HPLC法能同時測定食品中甘草苷和糖精鈉，簡單、快速的操作。其條件為Chrosorb RP-18（5μm）柱，流動相為乙醇0.05 M磷酸二氫鈉（2∶3）溶液中含0.02 MCTA，用磷酸調(diào)pH為3.0，紫外檢測器，波長選擇245 nm。和高效液相色譜-紫外檢測法（HPLC-UV）比較，重現(xiàn)性好的HPLC-FLD法，準確度更高。

2.2食品防腐劑的檢測

防腐劑在食品中十分常用，主要有苯甲酸與山梨酸和其鈉鹽，其應(yīng)用范圍與限量要根據(jù)GB2760-2011食品安全國家規(guī)范食品添加劑應(yīng)用規(guī)范中的規(guī)定實施。食品中苯甲酸、山梨酸與糖精鈉的含量運用高效液相色譜法測定，使用C 18色譜柱，以甲醇-乙酸銨混合溶液為流動相，紫外檢測波長230 nm處，對不同的樣品使用不同的前處理方法，定容后用高效液相色譜儀實施分析定量，可獲得良好的分離效果，苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的檢出限分別為1.8、1.2、3.0 mg/kg。用乙酸鋅溶液與亞鐵氰化鉀溶液作為沉淀劑實施樣品的預(yù)處理，為流動相的甲醇-乙酸銨混合溶液，C 18色譜柱，于波長290 nm處紫外檢驗，簡化了樣品前處理過程，分離度高，有相對好的回收率。

2.3食品色素的檢測

對2015年食品安全的檢驗規(guī)范分析，食用色素屬于被國家嚴格管控食品安全范圍的人工合成的。但因價格低且效果好，許多超國家規(guī)范的人工合成食用色素大量產(chǎn)生，所以需要注重對這類色素的檢驗。HPLC法可測定食品中含有違禁或過量的人工合成色素，使用樣本的合理粉碎方式和層次清洗方式。聚酰胺吸附純化LichrospherC 18柱，結(jié)果與含量的大小并沒有直接的對應(yīng)影響。甲醇-乙酸銨為流動相梯度洗脫，依照對照品的相應(yīng)出峰時間和積分面積得出樣品中是否含有相應(yīng)色素或含量的多少。

三、高效液相色譜技術(shù)在食品營養(yǎng)成分中的運用

3.1糖類的檢測

食品中糖類是最廣泛的組成成分，通常情況下，糖的測定過程會影響其提取、測定結(jié)果的準確性，而高效液相色譜法的高靈敏度能彌補這一缺陷。樣本中水溶性單糖與寡糖組分的類型與含量通過高效液相色譜-蒸發(fā)光散射進行測定，使用hypersilnh柱，選擇流動性的發(fā)散光放射方式的檢驗。該方式對與糖類的檢驗有直接的判定表現(xiàn)。分離鑒定其碳水化合物中的焦糖等糖分所處在的變化系數(shù)區(qū)域。并對色譜中顯示的波動范圍進行堆成線性的直接視覺表現(xiàn)，得到檢驗樣本參照的安全規(guī)范系數(shù)。

3.2氨基酸的檢測

生物體生存與發(fā)展的關(guān)鍵基礎(chǔ)性物質(zhì)是氨基酸，它是酶和蛋白質(zhì)的主要組成成分，這2種物質(zhì)自身的易變性能需要在檢驗的過程中使用新技術(shù)、新方法進行判斷。高效液相色譜法因其自身具有高度靈敏性、流動相色譜范圍大的特征，對這些物質(zhì)有著可靠的提取效果，受到人們的高度注重。

3.3維生素的檢測

維生素是一類保持人體生命活動必要的有機物質(zhì)，也是維持人體健康的關(guān)鍵活性物質(zhì)，假如一直缺少某種維生素，就會出現(xiàn)生理機能障礙而產(chǎn)生某種疾病。用高效液相色譜法同時測定維生素B 1與維生素B 2，使用uBondpak C 18柱，色譜條件：甲醇∶水=40∶60（V/V）為流動相，0.8 mL/min的流速，使用熒光檢驗器，結(jié)果顯示平均回收率分別為95.50%和95.82%。該方法簡單、省時、干擾小并有相對較高的靈敏度、準確性及較寬的應(yīng)用范圍。

四、高效液相色譜技術(shù)在有毒有害物質(zhì)中的應(yīng)用

作為食品安全重要課題的殘留監(jiān)測，需要應(yīng)用各類樣品實施解決和分析。近年來，HPLC和液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)通過不斷的發(fā)展，使其在不同種類的農(nóng)藥、獸藥和毒素等有害物質(zhì)的檢驗中更加廣泛地運用。在動物性食品中，殘留獸藥指的是在喂養(yǎng)動物的過程中服用藥物的殘留和其代謝物；殘留農(nóng)藥指的是在種植植物的過程中噴灑的農(nóng)藥殘留和降解產(chǎn)物的殘留。食品中農(nóng)藥殘留問題至關(guān)重要，尤其是蔬菜水果中的農(nóng)藥殘留含量分析最為重點，它不僅和人民生活息息有關(guān)，而且直接威脅到人民的健康。HPLC是分離分析熱不穩(wěn)定和難揮發(fā)性化合物的最為直接有效的方法。HPLC對于分析易揮發(fā)、吸附力強不易清除的物質(zhì)十分有效。

五、結(jié)語

在經(jīng)濟文化繁榮發(fā)展的信息時代下，科學(xué)技術(shù)得到了快速的更新，高效液相色譜技術(shù)逐漸應(yīng)用于各領(lǐng)域中。近年來，為了提高食品安全的質(zhì)量，該技術(shù)被充分應(yīng)用于食品檢測中，并取得了顯著的成果。本文主要以該技術(shù)的應(yīng)用為主，分析其在食品營養(yǎng)成分、食品添加劑和有毒物質(zhì)中的檢測情況。希望通過本文關(guān)于高效液相色譜技術(shù)相關(guān)應(yīng)用的研究，為日后促進高效液相色譜技術(shù)在食品檢測中的發(fā)展提供寶貴的建議。

參考文獻：

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[2]單羽.高效液相色譜技術(shù)在食品檢測中的應(yīng)用[J].科技創(chuàng)新與應(yīng)用，2014，6（8）：82.

（作者單位：濱海縣綜合檢驗檢測中心）