鹽度變化對(duì)黃斑籃子魚存活率、耗氧率和排氨率的影響

滕爽爽 ，宋呈鍇 ，林興管 ，柴雪良 ，方軍 ，肖國(guó)強(qiáng)

（1.浙江省海洋水產(chǎn)養(yǎng)殖研究所，浙江 溫州 325005；2.浙江省近岸水域生物資源開發(fā)與保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江 溫州 325005）

黃斑籃子魚（Siganus oramin），又名長(zhǎng)鰭籃子魚，隸屬于鱸形目（Perciformes），籃子魚科（Siganidae），籃子魚屬，是一種以植食性為主的近岸小型魚類，廣泛分布于非洲東岸至太平洋中部海域[1-2]。此魚具有肉質(zhì)細(xì)嫩，味道鮮美無(wú)肌間刺，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，種苗來(lái)源較廣，飼養(yǎng)周期較短，病害較少等優(yōu)點(diǎn)[3-5]。另外，黃斑籃子魚刮食固著藻類的能力強(qiáng)，在網(wǎng)箱養(yǎng)殖時(shí)可以起到清潔網(wǎng)衣的作用，因此有望成為國(guó)內(nèi)良好的海水養(yǎng)殖對(duì)象的選擇[6]。在我國(guó)，籃子魚類作為目前較為新興的植食性海水養(yǎng)殖魚類，其養(yǎng)殖規(guī)模還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不及其他肉食性海水魚類。

鹽度作為魚類生理學(xué)和生物學(xué)的重要參考指標(biāo)，是影響魚類新陳代謝等生理活動(dòng)的一個(gè)重要環(huán)境因素。當(dāng)外界的鹽度發(fā)生變化時(shí)，魚類會(huì)改變自身的生理活動(dòng)以維持穩(wěn)態(tài)來(lái)應(yīng)對(duì)這種變化[7-17]，從而導(dǎo)致其存活率、耗氧率、排氨率等一系列的生理指標(biāo)發(fā)生改變，根據(jù)邊平江[18]等人研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)外界的鹽度發(fā)生變化時(shí)，魚類機(jī)體就會(huì)進(jìn)入一種應(yīng)激狀態(tài)，在這種狀態(tài)下，魚類的生理活動(dòng)會(huì)加劇。因此在魚類養(yǎng)殖的過(guò)程中，控制適宜的養(yǎng)殖水體鹽度，采取合理的鹽度調(diào)節(jié)模式具有重要意義。

目前，鹽度對(duì)籃子魚生理、生化影響的報(bào)道尚不多見。該文研究了高鹽度向低鹽度驟變、高鹽度向低鹽度漸變、低鹽度向高鹽度驟變、低鹽度向高鹽度漸變等四種海水鹽度變化對(duì)黃斑籃子魚病死率和生理代謝的影響，為黃斑籃子魚養(yǎng)殖海水鹽度選擇或淡化馴養(yǎng)的提供重要參考和基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料及飼養(yǎng)方法

試驗(yàn)用魚來(lái)自浙江省海洋水產(chǎn)養(yǎng)殖研究所清江基地養(yǎng)殖的黃斑籃子魚。選擇無(wú)病無(wú)傷、行動(dòng)迅速、生命力強(qiáng)、大小體型相近的2 000尾作為試驗(yàn)用魚，規(guī)格為體長(zhǎng)（6.53±0.75）cm，體質(zhì)量（1.92±0.46）g。試驗(yàn)前于室內(nèi)水泥池（6 m×4 m×1.5 m）中暫養(yǎng)，24 h充氣，試驗(yàn)用水為砂濾海水，pH值為8.21±0.3，鹽度為 23.3±0.8，水溫為（26±1）℃。不同鹽度的海水配置利用砂濾海水添加曝氣自來(lái)水的方式獲得，利用鹽度計(jì)進(jìn)行鹽度校準(zhǔn)，每天早上換水1次，換水前調(diào)整鹽度。試驗(yàn)期間早晚兩次投喂相同的配合飼料，每次投喂的質(zhì)量為桶中魚體質(zhì)量的1%～3%。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 鹽度變化對(duì)黃斑籃子魚病死率的影響 該試驗(yàn)共設(shè)置4個(gè)試驗(yàn)組，分別為高鹽度海水向低鹽度海水驟變組、高鹽度海水向低鹽度海水漸變組、低鹽度海水向高鹽度海水驟變組、低鹽度海水向高鹽度海水漸變組。試驗(yàn)組籃子魚暫養(yǎng)鹽度分別為30±0.7和5± 0.7。

高鹽度海水向低鹽度海水驟變的試驗(yàn)組鹽度梯度設(shè)置為 0、5、10、15、20，低鹽度海水向高鹽度海水驟變鹽度梯度為10、15、20、30。每組均設(shè)3個(gè)平行，每個(gè)平行組放入30尾取自暫養(yǎng)池的黃斑籃子魚，在1、3、5、7 d分別統(tǒng)計(jì)各試驗(yàn)組的累計(jì)病死率。

高鹽度海水向低鹽度海水漸變?cè)囼?yàn)組初始水體的鹽度為30，每2 d下降一次鹽度，分別下降至20、15、10、5、0；低鹽度海水向高鹽度海水漸變?cè)囼?yàn)組初始水體的鹽度為5，每2 d上升一次鹽度，分別上升至 10、15、20、30。試驗(yàn)設(shè)置 3 個(gè)平行組，每個(gè)平行組放入30尾取自暫養(yǎng)池的黃斑籃子魚，試驗(yàn)結(jié)束后計(jì)算病死率。

1.2.2 不同鹽度對(duì)黃斑籃子魚耗氧率、排氨率的影響 試驗(yàn)用黃斑籃子魚暫養(yǎng)在500 L玻璃缸中，鹽度為 30 ± 0.8。試驗(yàn)設(shè)置 5、10、15、20、30 五個(gè)鹽度梯度，試驗(yàn)開始前饑餓處理24 h，7：00和19：00兩個(gè)時(shí)間段各做一次，結(jié)果取平均值。

采用靜水密閉式呼吸試驗(yàn)方法[20]，以5 L玻璃瓶為試驗(yàn)容器，每個(gè)試驗(yàn)組設(shè)3個(gè)平行，試驗(yàn)組每個(gè)瓶中放3尾魚，并設(shè)置對(duì)照組，試驗(yàn)開始1.5 h后，測(cè)定對(duì)照組和試驗(yàn)組中溶解氧和氨氮的含量，溶解氧的測(cè)定采用數(shù)字化多參數(shù)分析儀（Muliti 3410，WTW，德國(guó)）。溶解氧計(jì)算公式為：

式中：RO為單位體質(zhì)量耗率mg/（g·h）；CDO0和CDOt分別為起始溶氧質(zhì)量濃度和t時(shí)間后質(zhì)量濃度溶氧（mg/L）；SDO為對(duì)照組溶解氧變化系數(shù)C0，C0和Ct分別為對(duì)照組試驗(yàn)開始和t時(shí)間后的溶氧質(zhì)量濃度；V為代謝瓶容積（L）；m為魚體質(zhì)量（g）；t為試驗(yàn)時(shí)間。

排氨率測(cè)定采用次溴酸氧化法和重氮—偶氮法測(cè)定氨氮的濃度。根據(jù)試驗(yàn)始末氨氮濃度的變化，排氨率計(jì)算公式為：

式中：RN為單位排氨率和CNt分別為起始氨氮質(zhì)量濃度和t時(shí)間后氨氮質(zhì)量濃度（mg·L-1）；SN 為對(duì)照組氨氮變化系數(shù)和 St分別為對(duì)照組試驗(yàn)開始和t時(shí)間后的氨氮質(zhì)量濃度；V 為代謝瓶容積（L）；m 為魚體質(zhì)量（g）；t為試驗(yàn)時(shí)間。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)用Microsoft Excel 2007統(tǒng)計(jì)處理，數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。采用SPSS 17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（ANOVA）和Tukey多重比較法分析，P值統(tǒng)計(jì)學(xué)意義臨界水平為0.05。

2 結(jié)果

2.1 鹽度變化對(duì)黃斑籃子魚病死率的影響

2.1.1 鹽度下降對(duì)黃斑籃子魚病死率的影響 由圖1可見，高鹽度海水向低鹽度海水驟變0鹽度第1天驟變組的病死率為100%，其他試驗(yàn)組的病死率隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而升高，驟變7 d后黃斑籃子魚成活率仍保持80%以上。

圖1 高鹽度海水向低鹽度海水驟變（7 d）黃斑籃子魚累積病死率

圖2 高鹽度海水向低鹽度海水驟變及漸變黃斑籃子魚累積病死率

由圖2可見，高鹽度海水向低鹽度海水驟變和漸變時(shí)，各試驗(yàn)組黃斑籃子魚的成活率變化趨勢(shì)相同，鹽度為0的驟變組與漸變組黃斑籃子魚的病死率均為100%，其他各試驗(yàn)組黃斑籃子魚的7 d累計(jì)病死率都隨著鹽度的下降而上升。

2.1.2 鹽度上升對(duì)黃斑籃子魚病死率的影響 低鹽度海水向高鹽度海水驟變時(shí)，7 d內(nèi)黃斑籃子魚的病死率由圖3可見。黃斑籃子魚的病死率隨著鹽度的升高和時(shí)間的延長(zhǎng)而升高，相較于高鹽度海水向低鹽度海水驟變?cè)囼?yàn)，低鹽度海水向高鹽度海水驟變時(shí)，黃斑籃子魚的病死率有所上升，但是依舊維持在50%以內(nèi)。

圖3 低鹽度海水向高鹽度海水驟變（7 d）黃斑籃子魚病死率

低鹽度海水向高鹽度海水驟變和漸變時(shí)，黃斑籃子魚最終的病死率都隨著鹽度的上升不斷上升（圖4）。與驟變組相比，漸變組黃斑籃子魚的病死率均有所下降，下降幅度為16.67%～26.67%。

圖4 低鹽度海水向高鹽度海水驟變及漸變最終黃斑籃子魚病死率

2.2 鹽度對(duì)黃斑籃子魚耗氧率和排氨率的影響

圖5表示鹽度對(duì)黃斑籃子魚耗氧率和排氨率的影響。耗氧率隨鹽度的上升不斷下降（圖5），其中耗氧率在鹽度為5、10、15組別之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但與其余兩組存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）

圖5 鹽度對(duì)黃斑籃子魚耗氧率的影響

圖6顯示在5到30的鹽度區(qū)間內(nèi)，隨著鹽度的上升黃斑籃子魚的排氨率呈上升的趨勢(shì)，在鹽度15達(dá)到峰值，隨后逐漸下降。鹽度為30的試驗(yàn)組與其他各試驗(yàn)組差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

圖6 鹽度對(duì)黃斑籃子魚排氨率的影響

3 討論

3.1 鹽度對(duì)黃斑籃子魚病死率的影響

魚類能否適應(yīng)鹽度的變化同魚自身有關(guān)，籃子魚屬于廣鹽性魚類，據(jù)Lam[19]報(bào)道，籃子魚能在鹽度為5的海水中生存，在巴林沿海鹽度達(dá)41～47的水域也能正常生長(zhǎng)繁殖，在該試驗(yàn)中黃斑籃子魚在各個(gè)鹽度水平都有較高的存活，病死率均維持在50%以內(nèi)。該試驗(yàn)結(jié)果顯示，鹽度驟變比鹽度漸變更易造成黃斑籃子魚病死。鹽度下降試驗(yàn)，驟變時(shí)的最終病死率為16%，漸變的病死率為20%，鹽度上升試驗(yàn)中，驟變和漸變的最終病死率分別為46%和20%，兩組試驗(yàn)驟變的最終病死率均大于漸變時(shí)的病死率；而當(dāng)鹽度由5上升至30的過(guò)程中，病死率分別為：16.67%、33.33%、40%、46.67%，病死率均隨著鹽度變化的幅度增大而升高。這說(shuō)明鹽度變化的速度是影響黃斑籃子魚存活率的一個(gè)關(guān)鍵因素，鹽度變化的速度越大，病死率越高，雖然黃斑籃子魚對(duì)鹽度變化適應(yīng)性較高，但其需要一定的時(shí)間去適應(yīng)外界環(huán)境的變化。由高鹽度向低鹽度變化的試驗(yàn)中，驟變與漸變的試驗(yàn)結(jié)果均顯示鹽度由30下降至5的過(guò)程中病死率較低（＜20%），但當(dāng)鹽度下降至0時(shí)，病死率達(dá)到了100%，這與陳凱的研究結(jié)果籃子魚具有廣鹽性特點(diǎn)[20]，但10～20的培育鹽度似乎更適合籃子魚的生長(zhǎng)相一致。說(shuō)明黃斑籃子魚對(duì)高鹽度向低鹽度環(huán)境變化適應(yīng)性佳，但具有一定限度，低于5鹽度的海水適應(yīng)性差，淡水環(huán)境易造成其大批量死亡。

3.2 鹽度對(duì)黃斑籃子魚耗氧率和排氨率的影響

鹽度是海水養(yǎng)殖中最重要的環(huán)境因子，對(duì)魚類的生理代謝有著顯著的影響[21]。該試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)黃斑籃子魚的耗氧率隨著鹽度的下降而升高，與丁彥文等[22]、王廣軍等[23]的研究結(jié)果相同。根據(jù)Jobling等[24]的闡述，魚類標(biāo)準(zhǔn)代謝可分為組織的修復(fù)與更新所耗費(fèi)的能量以及維持內(nèi)穩(wěn)態(tài)所耗費(fèi)的能量?jī)深?。?dāng)外界的鹽度環(huán)境發(fā)生變化時(shí)，魚體勢(shì)必會(huì)消耗一定的能量去維持自身的內(nèi)穩(wěn)態(tài)，發(fā)生的變化越劇烈，維持穩(wěn)態(tài)所耗費(fèi)的能量也就相應(yīng)的越多。該研究中，當(dāng)鹽度由30降至20時(shí)，鹽度的變化未能對(duì)黃斑籃子魚產(chǎn)生明顯的影響，所以耗氧量未表現(xiàn)出明顯差異。隨著鹽度不斷下降至15以下，黃斑籃子魚的呼吸代謝加強(qiáng)，耗氧率顯著升高。說(shuō)明了外界鹽度的變化較大時(shí)對(duì)黃斑籃子魚正常生理代謝產(chǎn)生一定影響，因此需耗費(fèi)較多能量維持內(nèi)穩(wěn)態(tài)，從而導(dǎo)致耗氧率的顯著增高。

在耗氧率發(fā)生變化的同時(shí)，排氨率也會(huì)隨著鹽度的變化發(fā)生改變，由于水產(chǎn)動(dòng)物主要靠蛋白質(zhì)的代謝提供能量，所以排氨率反映了蛋白質(zhì)的代謝情況[13]。在試驗(yàn)中黃斑籃子魚的排氨率在5～30的鹽度范圍內(nèi)，先隨著鹽度的上升而上升，隨后隨著鹽度的上升反而下降，這與呂富、唐賢明、閆茂倉(cāng)、郭念崗等人研究結(jié)果相符合[14-17]。按照滲透調(diào)節(jié)的原理，魚類體液與外界環(huán)境等滲時(shí)，其用來(lái)維持穩(wěn)態(tài)的所需能量越低，當(dāng)鹽度遠(yuǎn)離等滲點(diǎn)時(shí)，魚類就需要更多地能量損耗來(lái)維持穩(wěn)態(tài)，其代謝活動(dòng)就會(huì)加劇，代謝率越高[12]。在養(yǎng)殖過(guò)程中，選擇合適的鹽度的水體，采用合理的鹽度調(diào)控方案，魚類用于調(diào)節(jié)滲透壓的能量消耗將會(huì)降低，用于生長(zhǎng)的能量將會(huì)增多，對(duì)魚生長(zhǎng)發(fā)育起到促進(jìn)作用。從耗氧率與排氨率結(jié)果來(lái)看，該試驗(yàn)黃斑籃子魚鹽度最適宜范圍為20～30之間，這可能與試驗(yàn)所用黃斑籃子魚自然生活環(huán)境鹽度擇有一定關(guān)系。

3.3 關(guān)于黃斑籃子魚淡化馴養(yǎng)的合理方式

該研究發(fā)現(xiàn)，黃斑籃子魚對(duì)鹽度的適應(yīng)性較廣，5～30的鹽度范圍內(nèi)均能大量存活，且鹽度對(duì)其生理代謝沒(méi)有造成強(qiáng)烈影響，是優(yōu)良的淡化馴養(yǎng)對(duì)象，在廣東湛江的珠江入?？谘匕?，籃子魚甚至已被引入淡水池塘養(yǎng)殖[25]。開展黃斑籃子魚的淡化培養(yǎng)技術(shù)，可以拓寬養(yǎng)殖空間，減少養(yǎng)殖成本，具有巨大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益，廣闊的產(chǎn)業(yè)化前景。并且有研究發(fā)現(xiàn)，低鹽度養(yǎng)殖的籃子魚必需氨基酸營(yíng)養(yǎng)組成合理，鮮味氨基酸含量豐富，肌肉營(yíng)養(yǎng)成分優(yōu)于野生籃子魚及多種野生魚類[7]。該試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，鹽度驟變比鹽度漸變更易造成黃斑籃子魚死亡，且鹽度跨度過(guò)大也不利于籃子魚存活，因此其淡化馴養(yǎng)速度不宜過(guò)快。該研究中每次鹽度梯度變化為5，鹽度變化時(shí)間為3 d的培育方法取得初步的良好效果，病死率控制在20%以內(nèi)，但具體技術(shù)細(xì)節(jié)及實(shí)施方案還有待進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)。值得注意的是，從鹽度為5到0的變化導(dǎo)致黃斑籃子魚大批量死亡，可能是由于其低鹽度的耐受力較強(qiáng)，但對(duì)淡水的耐受力較差，因此在對(duì)其進(jìn)行淡化過(guò)程中，從海水至鹽度5的馴養(yǎng)時(shí)間可適當(dāng)縮短，而從5至淡水的馴養(yǎng)時(shí)間適當(dāng)延長(zhǎng)，降低損失，提高培育效率和收益[8]。