QuEChERS EMR-Lipid結(jié)合LC-MS/MS測(cè)定雞蛋中磺胺類和喹諾酮類藥物殘留

劉紅，曾建勇，梁雪琪，鄧曉華，李震源

（1.中山市農(nóng)業(yè)科技推廣中心，廣東中山 528403）（2.中山市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所，廣東中山 528400）

磺胺類抗生素(sulfonamides，sAs)是人工合成的具有對(duì)氨基苯磺酰胺結(jié)構(gòu)的一類抗菌藥物[1]，喹諾酮類（4-quinolones）是一類含4-喹諾酮基本結(jié)構(gòu)的抗菌藥物[2]，兩類藥物都因具有化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、抗菌譜廣、高效、低毒、價(jià)格低和使用方便等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用到養(yǎng)殖業(yè)上，用來治療和預(yù)防動(dòng)物的疾病感染，并越來越受到養(yǎng)殖戶的重視。但由于生產(chǎn)者用藥不規(guī)范或不遵守正確的休藥期等因素，容易導(dǎo)致 sAs和 FQs（fluoroquinolones，氟喹諾酮類抗生素）在畜禽體內(nèi)過量積聚殘留，污染動(dòng)物性食品，間接對(duì)人體產(chǎn)生危害，如過敏反應(yīng)、泌尿系統(tǒng)損害等，嚴(yán)重的可導(dǎo)致休克甚至死亡。某些藥物還存在潛在的致癌性，對(duì)人體產(chǎn)生持久危害。為此，世界各國(guó)對(duì)食品中的sAs和FQs的殘留限量提出了嚴(yán)格要求，而且許多國(guó)家將sAs和FQs列入抗生素禁用清單。目前，歐盟、美國(guó)、日本和韓國(guó)等國(guó)家均將磺胺類藥物列為動(dòng)物飼養(yǎng)過程中限制使用的藥物，美國(guó)則禁止喹諾酮類藥物應(yīng)用于動(dòng)物源性食品[3]，我國(guó)農(nóng)業(yè)部《獸藥停藥期規(guī)定》中也指出多種喹諾酮藥物制劑在產(chǎn)蛋雞中禁用，農(nóng)業(yè)部公告第235號(hào)對(duì)動(dòng)物源性食品中使用磺胺類藥物的規(guī)定限量為總量不得大于100 μg/kg。

目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)磺胺類藥物和喹諾酮類藥物殘留檢測(cè)研究比較常見，報(bào)道過的文獻(xiàn)也較多，但多數(shù)都是針對(duì)其中一類藥物的檢測(cè)分析研究，兩類藥物一起進(jìn)行前處理檢測(cè)的并不多見。國(guó)內(nèi)外對(duì)sAs和FQs的分析檢測(cè)方法主要有微生物檢測(cè)法[4～6]、酶聯(lián)免疫吸附法[7,8]、毛細(xì)管電泳法(CE)[9,10]、高效液相色譜法（HPLC）[11～20]及高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)[21～29]等，其中，HPLC-MS/MS 法是檢測(cè)動(dòng)物源性食品中獸藥殘留的重要方法，這種方法結(jié)合液相保留時(shí)間，并采用多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式，對(duì)特征離子進(jìn)行定量和定性分析，適合于復(fù)雜基質(zhì)樣品的檢測(cè)。但目前檢測(cè)sAs和FQs的LC-MS/MS方法主要集中在水產(chǎn)品、雞肉、豬肉和牛奶等方面，未有文獻(xiàn)報(bào)道雞蛋中磺胺類藥物的液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法，可以同時(shí)檢測(cè)雞蛋中磺胺類藥物和喹諾酮類藥物的快捷方法更未見文獻(xiàn)報(bào)道。

在樣品前處理過程中，本實(shí)驗(yàn)采用了創(chuàng)新型安捷倫增強(qiáng)型脂質(zhì)去除產(chǎn)品（QuEChERS EMR-Lipid）萃取技術(shù)凈化樣品。與傳統(tǒng)技術(shù)相比，它是一種能夠選擇性去除復(fù)雜基質(zhì)中脂質(zhì)并挑戰(zhàn)鱷梨等高脂肪含量樣品的獨(dú)特吸附劑，可針對(duì)任意樣品前處理產(chǎn)品實(shí)現(xiàn)最徹底的脂質(zhì)去除和分析物回收，因此您可以在不損失分析物的前提下去除脂質(zhì)。此技術(shù)不僅提高了方法的靈敏度、精密度和回收率，而且其操作步驟也比較簡(jiǎn)單，減少了操作過程中的各種誤差，樣品前處理的時(shí)間也大大縮短。

鑒于此，本文旨在建立一種新的高效液相色譜-三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法以檢測(cè)禽蛋中多種磺胺類藥物和多種氟喹諾酮類藥物的殘留含量，同時(shí)結(jié)合最新的 QuEChERS EMR-Lipid快速樣品提取技術(shù)進(jìn)行樣品前處理。此方法不僅在結(jié)果上大大提高了藥物的檢測(cè)靈敏度，在樣品前處理上也適應(yīng)了快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度高的優(yōu)點(diǎn)，適應(yīng)了食品安全檢測(cè)技術(shù)簡(jiǎn)便快捷和自動(dòng)化的發(fā)展趨勢(shì)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

PRIME-HLB 固相萃取柱（60 mg/3 cc），購(gòu)自Waters公司；QuEChERS EMR-Lipid快速萃取，Agilent公司；標(biāo)準(zhǔn)品磺胺噻唑(ST)、磺胺二甲異惡唑(SIZ)、磺胺多辛(SDM’)、磺胺甲基嘧啶（SM1）、磺胺(SN)、磺胺氯噠嗪(SCP)、磺胺吡啶(SPD)、磺胺甲噻二唑(SMT)、磺胺甲氧噠嗪(SMP)、磺胺嘧啶（SD）、磺胺間甲氧嘧啶(SMM)、磺胺地索辛(SDM)、磺胺甲惡唑(SMZ)、磺胺喹惡啉(SQ)、磺胺二甲嘧啶(SM2)、麻保沙星、洛美沙星、培氟沙星、恩諾沙星、沙拉沙星、氧氟沙星、二氟沙星、諾氟沙星、環(huán)丙沙星、達(dá)氟沙星、吡哌酸、惡喹酸（奧索利酸）、依諾沙星（氟啶酸）、萘啶酸、氟甲喹、西諾沙星均為 Dr出品；乙腈、甲醇、甲酸(均為HPLC純?cè)噭?，Merck公司；實(shí)驗(yàn)用水為Watsons蒸餾水；檸檬酸、磷酸二氫鉀、乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）等其余試劑均為分析純，廣州化學(xué)試劑廠；雞蛋樣品，中山市三鄉(xiāng)鎮(zhèn)白石雞場(chǎng)。

1.2 儀器與設(shè)備

高效液相色譜-三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀G6495A LC-MSD QQQ(配有電噴霧離子源(ESI)及Masshunter B07.01數(shù)據(jù)處理系統(tǒng))，美國(guó)Agilent公司；全自動(dòng)固相萃取儀，吉爾森公司；冷凍離心機(jī)3-30KS，德國(guó)Sigma公司；漩渦振蕩器，德國(guó)IKA公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品提取凈化

準(zhǔn)確稱取5.00 g（精確至0.01 g）雞蛋樣品，加入2%甲酸乙腈8 mL，漩渦震蕩1 min，再加入pH 7.0、0.1 mol/L的EDTA緩沖液0.5 mL，漩渦震蕩1 min，10000 r/min離心3 min，將上清液轉(zhuǎn)移至QuEChERS EMR-Lipid快速萃取提取管中（此管提前用pH 2.4、0.1 mol/L的乙酸銨溶液5 mL活化），劇烈震蕩1 min，10000 r/min離心3 min，將上清液轉(zhuǎn)移至QuEChERS EMR-Lipid反萃取管中，劇烈震蕩1 min，10000 r/min離心3 min，吸取1 mL上清液到樣品瓶中，50 ℃下氮?dú)獯抵两伞?/p>

1.3.2 上機(jī)測(cè)定

濃縮液用0.2%甲酸水：乙腈（4：1）定容至1.0 mL，渦旋混勻，過0.22 μm過濾膜轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶中上機(jī)檢測(cè)。

1.3.3 儀器條件

色譜條件：色譜柱：Agilent poroshell EC-C18柱，2.1 mm×100 mm，2.7 μm。

流動(dòng)相：A相為0.2%甲酸溶液，B相為乙腈溶液；梯度洗脫程序見表1；進(jìn)樣量：5.0 μL。

表1 流動(dòng)相洗脫程序Table 1 Gradient elution program

質(zhì)譜條件：電噴霧離子源，正離子掃描，動(dòng)態(tài)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(dynamic MRM)，碰撞能量（Fragmentor）為380 V，霧化氣壓力（ion source gas 1，GS1）為50 psi，毛細(xì)管壓力（Capillary）為4000 V，干燥氣流速（Gas Flow）10 L/min，干燥氣溫度（Gas Temp）350 ℃，同時(shí)優(yōu)化各物質(zhì)的質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)（見表2）。

1.3.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)準(zhǔn)曲線、檢測(cè)限與定量限測(cè)定

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的實(shí)際含量換算標(biāo)準(zhǔn)品的實(shí)際稱重量，分別準(zhǔn)確稱取各標(biāo)準(zhǔn)品，置于相應(yīng)容量瓶中，以10 mL水溶解，并用0.1%甲酸乙腈定容至刻度（其中惡喹酸10 mL水加1.5 mL氨水溶解，再用0.1%甲酸乙腈定容），即成100.00 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，4 ℃冰箱中避光保存。臨用前可將其用流動(dòng)相稀釋至工作濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。

配制一系列濃度的混標(biāo)溶液，用處理好的空白樣品基質(zhì)，配制0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0 ng/mL標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，上機(jī)檢測(cè)獲得基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線，數(shù)據(jù)處理獲得線性相關(guān)系數(shù)。

按3倍信噪比計(jì)算方法檢測(cè)限，10倍信噪比計(jì)算方法定量限。

1.3.5 添加回收率、精密度測(cè)定

準(zhǔn)確稱取5.00 g（精確至0.01 g）雞蛋樣品，分別添加標(biāo)準(zhǔn)溶液混合溶液8、16、32 μg/kg濃度，每個(gè)添加濃度做6個(gè)平行樣品，按上述方法進(jìn)行處理分析，計(jì)算回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜柱選擇

圖1 不同色譜柱的選擇性離子流圖Fig.1 Selective ion flow diagrams of different chromatographic columns

注：X軸為生成時(shí)間（m），Y軸為峰高。a.Agilent poroshell SB-C18; b.Agilent poroshell EC-C18; c.Agilent poroshell Phenyl Hexyl

配制 0.1 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液混合溶液，分別使用Agilent poroshell EC-C18柱(2.1 mm×100 mm，2.7μm)、Agilent poroshell SB-C18(2.1 mm×100 mm，2.7μm)和 Agilent poroshell Phenyl Hexyl(2.1 mm×100 mm，2.7 μm)柱檢測(cè)，相同色譜質(zhì)譜條件下，Agilent poroshell EC-C18柱的響應(yīng)值和多種藥物成分的分離度都比Agilent poroshell SB-C18和Agilent poroshell Phenyl Hexyl的表現(xiàn)好(見圖1)，所以在以后的試驗(yàn)中，我們選擇Agilent poroshell EC -C18柱。

2.2 質(zhì)譜條件選擇

圖2 30種抗生素的TIC圖Fig.2 Total ion chromatograms of 30 antibiotics

磺胺類藥物是人工合成的氨苯磺胺衍生物，基本化學(xué)結(jié)構(gòu)為對(duì)氨基苯磺酰胺，喹諾酮類藥物則都是具有吡啶酮酸共同結(jié)構(gòu)的一組藥物，根據(jù)兩類藥物的分子結(jié)構(gòu)性質(zhì)，我們選擇ESI（+）作為電離模式。采用直接進(jìn)樣方式，0.1 mg/L單標(biāo)溶液進(jìn)樣5.0 μL，正離子掃描模式對(duì)各藥物進(jìn)行全掃描，選擇響應(yīng)最佳的準(zhǔn)分子離子峰為母離子（parent ion，PI），再對(duì)母離子進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜掃描，得到各個(gè)化合物響應(yīng)值最佳的碎片子離子（daughter ions，DI）。最后再對(duì)得到的每種藥物的二級(jí)質(zhì)譜的碰撞能量（CE）、電噴霧電壓（IS）、霧化氣、噴霧壓力、毛細(xì)管溫度和電壓等質(zhì)譜參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，從而使每種藥物的分子離子與特征離子碎片產(chǎn)生的離子強(qiáng)度達(dá)到最大時(shí)為最佳，使化合物的響應(yīng)最高（見表2）。在此條件下，各種藥物可以得到有效的分離（見圖2）。

2.3 色譜條件選擇

磺胺類藥物和喹諾酮類藥物的結(jié)構(gòu)對(duì)pH值都有嚴(yán)格的要求。實(shí)驗(yàn)比較了 0.2%甲酸-乙腈溶液、0.1%甲酸-乙腈溶液、0.1%甲酸-2 mmoL乙酸銨緩沖液-乙腈溶液、0.1%甲酸-0.05%氨水溶液-乙腈溶液對(duì)離子化的影響。結(jié)果表明，0.2%甲酸-乙腈溶液體系能使磺胺類藥物和喹諾酮類藥物在質(zhì)譜中有更好的響應(yīng)值，這是由于甲酸可以為陽離子的形成提供必需的質(zhì)子來源，從而提高其離子化效率。而乙酸銨緩沖液、0.1%甲酸乙腈溶液有明顯的拖尾現(xiàn)象，而且響應(yīng)值低，因此選用 0.2%甲酸-乙腈溶液作為流動(dòng)相體系。此外，由于柱溫太低時(shí)流動(dòng)相粘度大、色譜柱的理論塔板數(shù)低、目標(biāo)物質(zhì)出峰慢，因此柱溫選為40 ℃。

2.4 樣品前處理的優(yōu)化

磺胺類藥物和喹諾酮類藥物都含有較穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，微溶于水和甲醇等有機(jī)溶液，尤其是在酸性環(huán)境下穩(wěn)定。本實(shí)驗(yàn)比較了乙腈、0.1%甲酸乙腈溶液、0.2%甲酸乙腈溶液、0.5%甲酸乙腈溶液、1%甲酸乙腈溶液、2%甲酸乙腈溶液作為提取液提取樣品，發(fā)現(xiàn)用2%甲酸乙腈溶液提取樣品所得的提取液最清，蛋白除去效果最好，磺胺藥物的提取效果也較好，所以選擇 2%甲酸乙腈溶液作為提取液。喹諾酮類含有吡啶酮酸基本結(jié)構(gòu)，其羧基和酮基極易和金屬離子形成絡(luò)合物，所以單純 2%甲酸乙腈溶液提取時(shí)，喹諾酮類藥物的回收率幾乎沒有，所有我們?cè)跇悠诽崛∵^程中加入乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)去絡(luò)合提取管中的金屬離子，從而提高喹諾酮類藥物的回收率。比較了pH 7.0的0.1 mol/L EDTA、0.2 mol/L EDTA、0.5 mol/L EDTA、1 mol/L EDTA的絡(luò)合作用，最終發(fā)現(xiàn)0.1 mol/L EDTA作為絡(luò)合劑時(shí)喹諾酮類藥物的回收率最好。因此在提取過程中，選擇2%甲酸乙腈溶液和0.1 mol/L EDTA共同提取樣品。

2.5 樣品凈化

在本實(shí)驗(yàn)中，選用PRIME-HLB固相萃取柱、安捷倫QuEChERS快速提取和QuEChERS EMR-Lipid快速提取對(duì)樣品進(jìn)行凈化。結(jié)果表明PRIME-HLB固相萃取柱只對(duì)其中的一部分藥物有提取，其余藥物的提取率低，所以我們選擇了安捷倫QuEChERS快速提取進(jìn)行樣品進(jìn)化。雞蛋中的蛋白質(zhì)含量特別高，而脂質(zhì)干擾是測(cè)定食品或生物基質(zhì)中痕量殘留物面臨著重要難題，不僅導(dǎo)致分析物靈敏度下降，還會(huì)導(dǎo)致 MS維護(hù)的需求增加從而縮短儀器和色譜柱壽命，所以去除脂質(zhì)在痕量檢測(cè)中尤為重要。我們比較了安捷倫傳統(tǒng) QuEChERS和增強(qiáng)型脂質(zhì)去除產(chǎn)品（QuEChERS EMR-Lipid）對(duì)樣品進(jìn)行凈化處理的效果，發(fā)現(xiàn)QuEChERS EMR-Lipid對(duì)脂質(zhì)的去除率較好，而且分析物的回收率也較高。所以我們選擇 QuEChERS EMR-Lipid進(jìn)行樣品凈化過程。

在使用 QuEChERS EMR-Lipid萃取管進(jìn)行樣品凈化時(shí)，QuEChERS EMR-Lipid快速萃取提取管的活化效果直接影響了檢測(cè)結(jié)果的好壞。本實(shí)驗(yàn)比較了純水、pH 2.4、0.1 mol/L乙酸銨、pH 2.4、0.1 mol/L EDTA、pH 4.0、0.1 mol/L EDTA、pH 7.0、0.1 mol/L EDTA活化提取管，但發(fā)現(xiàn)純水活化時(shí)，只有磺胺類藥物有回收；pH 4.0、0.1 mol/L EDTA活化時(shí)喹諾酮類藥物開始有回收，但較低；pH 7.0、0.1 mol/L EDTA活化時(shí)喹諾酮類藥物回收較好，但磺胺類藥物又沒有了回收；而pH 2.4、0.1 mol/L EDTA活化時(shí)，由于溶液太酸，EDTA有析出現(xiàn)象；而用pH 2.4、0.1 mol/L乙酸銨活化萃取管中，磺胺類藥物和喹諾酮類藥物均有回收，而且回收率較好，最終選擇pH 2.4、0.1 mol/L乙酸銨作為萃取管的活化液進(jìn)行活化。

2.6 檢測(cè)方法的線性關(guān)系、檢測(cè)限（LOD）與定量限（LOQ）的確定

配制一系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，做基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量分析，其線性范圍(Linear ranges)和相關(guān)系數(shù)(Correlation coeficiants)見表1。按3倍信噪比計(jì)算定為檢測(cè)限（LOD），10倍信噪比定為定量限（LOQ），結(jié)果見表2。

2.7 檢測(cè)方法回收率和精密度確定

準(zhǔn)確稱取空白樣品，分別添加高、中、低三個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個(gè)添加濃度平行測(cè)定6次，按1.2所述方法進(jìn)行處理分析，進(jìn)行樣品分析。藥物的回收率較好，回收率范圍為50.09%～102.11%之間，精密度也較好，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于20%，方法滿足質(zhì)量控制要求[30]，結(jié)果見表3。

表2 目標(biāo)分析物的質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)、工作曲線線性范圍、相關(guān)系數(shù)、檢測(cè)限和定量限Table 2 Tandem mass parameters, linear ranges, correlation coef fi cients, LOD and LOQ of target analyte drugs

表3 空白樣品中30種獸藥的加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差Table 3 Recovery and relative standard deviation for 30 antibiotics in eggs(%, n=6)

3 結(jié)論

食品中抗生素殘留檢測(cè)屬于較為復(fù)雜的痕量組分分析技術(shù)，最顯著的特點(diǎn)是需要嚴(yán)格的樣本前處理步驟，因?yàn)榍疤幚淼牟僮髦苯佑绊憴z測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性[31]，所以能集采樣、萃取、凈化、濃縮、預(yù)分離、進(jìn)樣于一身的聯(lián)用和自動(dòng)化分析等將是未來發(fā)展的趨勢(shì)。而本實(shí)驗(yàn)中的檢測(cè)樣品禽蛋中的蛋白質(zhì)含量較高，在前處理過程中去除脂肪的步驟也非常關(guān)鍵，其脂肪去除的干凈程度直接影響了實(shí)驗(yàn)的最終結(jié)果。但目前報(bào)道所用的多數(shù)方法通常都會(huì)在去除脂質(zhì)的損失一部分目標(biāo)物，從而使目標(biāo)物的回收率受到的影響。所以本實(shí)驗(yàn)在樣品前處理過程中，采用了創(chuàng)新型安捷倫增強(qiáng)型脂質(zhì)去除產(chǎn)品（QuEChERS EMR-Lipid）萃取技術(shù)凈化樣品，此技術(shù)可針對(duì)任意樣品前處理產(chǎn)品實(shí)現(xiàn)最徹底的脂質(zhì)去除和分析物回收，不僅提高了方法的靈敏度，還提高了樣品的回收率和精密度。而且其操作步驟也比較簡(jiǎn)單，樣品前處理時(shí)間也較短，不僅減少了操作過程中的各種誤差，而且其還大大節(jié)省了樣品前處理的時(shí)間，適用于大批量產(chǎn)品的快速檢測(cè)。本試驗(yàn)利用高效液相色譜-三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測(cè)禽蛋中磺胺類藥物和喹諾酮類藥物的多殘留含量，不僅具有液相色譜對(duì)藥物的高效分離特點(diǎn)，也具有質(zhì)譜對(duì)分析物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)的定性分析特性，同時(shí)達(dá)到了定性和定量的檢測(cè)目的，特別適用于獸藥痕量殘留的確證性分析檢測(cè)，而且在檢測(cè)結(jié)果上大大提高了方法的靈敏度和精確度，所得檢測(cè)限也比較低，磺胺類藥物 檢 測(cè) 限 為 0.0013～0.0166 μg/kg， 定 量 限0.0044～0.0552 μg/kg；喹諾酮類藥物檢測(cè)限為0.0018～0.0972 μg/kg，定量限 0.0060～0.3239 μg/kg，遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于歐美國(guó)家和我國(guó)農(nóng)業(yè)部制定的最高殘留限量。與其他液質(zhì)聯(lián)用法相比，檢測(cè)限也有所降低，如王浩[25]等用液相色譜-串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜對(duì)牛奶中10種磺胺類藥物殘留，檢出限可達(dá)到0.5～1.0 μg/L；郭黎明[26]等采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜在正離子模式下通過多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)方式同時(shí)測(cè)定了雞肝臟組織中3種四環(huán)素類藥物、10種磺胺類藥物以及8種喹諾酮類藥物的殘留，該方法對(duì)測(cè)定的21種藥物的檢出限均為2 μg/kg，定量限均為5 μg/kg。張萍[11]等建立雞蛋粉中12種磺胺類藥物殘留量的測(cè)定方法，最小檢出限在0.002～0.045 μg/g。Schneiderd等使用LC/MC測(cè)定了牛和雞的肝組織中的 sAs，檢測(cè)限為 0.8～1.7 μg/kg。所以本文建立的QuEChERS EMR-Lipid結(jié)合LC-MS/MS檢測(cè)雞蛋中多種磺胺類藥物和喹諾酮類藥物殘留含量的檢測(cè)方法具有高靈敏度、高精密度、前處理操作簡(jiǎn)便、快速省時(shí)等優(yōu)點(diǎn)，測(cè)定的30種獸藥殘留的含量結(jié)果均能滿足雞蛋中多種藥物殘留檢測(cè)的限量要求及相應(yīng)的檢測(cè)水平，并適用于市場(chǎng)禽蛋中多類獸藥的監(jiān)督抽查工作，在理論和生產(chǎn)實(shí)踐上都具有重要意義。