酵母多糖對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、免疫功能和腸道菌群的影響

張金寶，銀 花，舍 旺

（扎蘭屯職業(yè)學(xué)院，內(nèi)蒙古呼倫貝爾 162650）

斷奶仔豬的飼養(yǎng)是養(yǎng)豬生產(chǎn)中的關(guān)鍵階段。如今集約化養(yǎng)殖過(guò)程中，一般會(huì)對(duì)仔豬進(jìn)行早期斷奶，以提高母豬繁殖效率，進(jìn)而改善企業(yè)經(jīng)濟(jì)效益。但由于仔豬各方面發(fā)育都還不完善，過(guò)早斷奶會(huì)帶來(lái)一系列應(yīng)激反應(yīng)，引起仔豬持續(xù)性腹瀉、食欲減退，造成其生長(zhǎng)緩慢，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)導(dǎo)致其死亡，給企業(yè)帶來(lái)很大的經(jīng)濟(jì)損失（鄭文金，2017）。抗生素可以抑制病原菌生長(zhǎng)，具有顯著的抗菌效果，在畜禽飼料中添加抗生素可以起到預(yù)防疾病、促進(jìn)生長(zhǎng)等功效，在畜牧生產(chǎn)中具有廣泛應(yīng)用（曹麗萍等，2009）。但在畜牧生產(chǎn)中，對(duì)抗生素添加劑的應(yīng)用很不規(guī)范，長(zhǎng)期過(guò)量使用抗生素帶來(lái)嚴(yán)重問(wèn)題，包括抗生素在畜產(chǎn)品和環(huán)境中的殘留，細(xì)菌多重耐藥性的產(chǎn)生、環(huán)境污染等（鞏霞等，2007；趙青等，2005）。歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家已陸續(xù)禁止飼用抗生素的使用，我國(guó)農(nóng)業(yè)部也規(guī)定從2016年11月1日起禁止硫酸粘桿菌素作為飼料添加劑的使用，尋找合適的抗生素替代品是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。

酵母多糖是一類功能性多糖復(fù)合物，主要成分是β-葡聚糖和甘露寡糖，由酵母細(xì)胞發(fā)酵培養(yǎng)的菌體經(jīng)自溶、酶解等生物破壁技術(shù)分離制得（崔藝燕等，2018）。已有許多研究表明，寡糖類物質(zhì)作為飼料添加劑使用，有調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道菌群的作用，并能提高機(jī)體免疫功能（黃鑫瑋等，2015；李夢(mèng)云等，2015；郭芳等，2009）。酵母多糖作為一種天然高效的生物活性物質(zhì)，在畜牧生產(chǎn)中應(yīng)用得到研究者的極大關(guān)注。本試驗(yàn)旨在研究酵母多糖在日糧中的添加效果，重點(diǎn)關(guān)注其對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能、免疫功能和腸道菌群的影響，探討酵母多糖替代抗生素的應(yīng)用效果，為尋找可靠的替抗產(chǎn)品提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 酵母多糖：主要成分為β-葡聚糖（39%）和甘露寡糖（23%），購(gòu)自拓普生物科技有限公司；抗生素（金霉素）為獸用藥，試驗(yàn)豬場(chǎng)自備。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選取胎次、體重、健康狀況相近，21日齡斷奶的斷奶仔豬（杜×長(zhǎng)×大）72頭，隨機(jī)分為3組，每組24頭仔豬，分4個(gè)豬圈飼養(yǎng)，每個(gè)豬圈6頭。對(duì)照組（CT）仔豬只飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)1組（抗生素組，AT）在基礎(chǔ)日糧中添加100 mg/kg的金霉素，試驗(yàn)2組（酵母多糖組，YT）在基礎(chǔ)日糧中添加0.3%的酵母多糖。整個(gè)試驗(yàn)為期28 d。

1.3 試驗(yàn)日糧 參照美國(guó)NRC（2012）豬的營(yíng)養(yǎng)需要配制斷奶仔豬基礎(chǔ)日糧，采用玉米-豆粕型日糧，其原料組成和營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.4 飼養(yǎng)管理 仔豬飼養(yǎng)在保育舍內(nèi)，豬圈配有乳頭式飲水器、采用半漏縫地板。試驗(yàn)過(guò)程中采用少喂勤添的策略，每天上午和下午各飼喂2次，保證仔豬自由采食和飲水。仔豬圈舍的清潔、免疫接種程序等按照試驗(yàn)所在豬場(chǎng)的常規(guī)管理進(jìn)行。

1.5 測(cè)定指標(biāo)和方法

1.5.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定 試驗(yàn)開始后認(rèn)真觀察仔豬每天的采食、活動(dòng)及腹瀉情況。仔豬腹瀉情況根據(jù)以下公式進(jìn)行計(jì)算：

腹瀉率/%=腹瀉仔豬頭次/試驗(yàn)仔豬總頭次×100。

試驗(yàn)開始（第1天）和結(jié)束時(shí)（第28天）對(duì)仔豬稱重，并記錄飼料消耗情況。分別計(jì)算斷奶仔豬的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.5.2 免疫功能指標(biāo)測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)（第28天），每個(gè)豬圈隨機(jī)選取2頭仔豬，保定后經(jīng)前腔靜脈采血，制得血清后進(jìn)行免疫指標(biāo)測(cè)定。血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）用相應(yīng)的檢測(cè)試劑盒測(cè)定，免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）和免疫球蛋白A（IgA）均采用雙抗體夾心法，用豬的ELISA試劑盒測(cè)定。

1.5.3 腸道菌群計(jì)數(shù) 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)挑取1頭健康仔豬屠宰，取盲腸內(nèi)容物樣品冷凍保存。稱取1 g盲腸內(nèi)容物，加入9 mL滅菌后預(yù)冷的生理鹽水，混合均勻，配成10-1稀釋液；之后，再吸取1 mL 10-1的稀釋液，加入9 mL滅菌后預(yù)冷的生理鹽水均勻混合，配成10-2稀釋液；據(jù)此依次進(jìn)行10-3～10-7稀釋液的配制。

將配置好的梯度稀釋液（10-1～10-7）按照需要檢測(cè)的菌種分別接種于相應(yīng)培養(yǎng)基中，進(jìn)行腸道菌群計(jì)數(shù)。（大腸桿菌用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基，乳酸桿菌用MRS培養(yǎng)基，沙門氏菌用HE培養(yǎng)基，雙歧桿菌用BBL培養(yǎng)基）。大腸桿菌和沙門氏菌的培養(yǎng)條件是37℃有氧培養(yǎng)24 h；乳酸桿菌和雙歧桿菌的培養(yǎng)條件是37℃厭氧培養(yǎng)48 h（王繼成等，2006）。每個(gè)梯度稀釋液進(jìn)行3次細(xì)菌培養(yǎng)試驗(yàn)，結(jié)果取3次計(jì)數(shù)的平均值，用每克腸道內(nèi)容中所含菌落總數(shù)的對(duì)數(shù)表示（張旭暉等，2012）。1.6 數(shù)據(jù)處理與分析 試驗(yàn)所得結(jié)果用Excel軟件進(jìn)行初步整理，采用SPSS軟件的 One-way ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，多重比較采用Duncan’s檢驗(yàn)，P＜0.05為差異顯著，P＜0.10被認(rèn)為有顯著性趨勢(shì)。

2 結(jié)果

2.1 酵母多糖對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知，日糧中添加抗生素和酵母多糖顯著提高了斷奶仔豬試驗(yàn)?zāi)┢诘捏w重（P＜0.05）。相應(yīng)的，抗生素和酵母多糖組斷奶仔豬的平均日增重和平均日采食量也顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），但抗生素和酵母多糖兩個(gè)處理組間差異不顯著（P＞0.05）。料重比在3個(gè)試驗(yàn)組間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；與對(duì)照組相比，抗生素組斷奶仔豬腹瀉率降低了49.9%，酵母多糖組斷奶仔豬腹瀉率降低了74.9%，兩者都具有降低仔豬腹瀉率的趨勢(shì)（P=0.062），但未達(dá)到差異顯著性水平（P＞ 0.05）。

表2 酵母多糖對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 酵母多糖對(duì)斷奶仔豬免疫功能的影響 由表3可知，對(duì)照組、抗生素和酵母多糖組斷奶仔豬血清中總蛋白、白蛋白水平間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。各試驗(yàn)組斷奶仔豬血清中IgA和IgG水平也無(wú)明顯變化（P＞0.05），但與對(duì)照組和抗生素組相比，日糧中添加酵母多糖顯著提高了斷奶仔豬血清中IgM水平（P＜0.05）。

表3 酵母多糖對(duì)斷奶仔豬血清免疫指標(biāo)的影響???????????????????????????????????g/L

2.3 酵母多糖對(duì)斷奶仔豬盲腸微生物菌群的影響 由表4可知，日糧中添加抗生素和酵母多糖顯著降低了斷奶仔豬盲腸中大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量（P＜0.05）；與對(duì)照組相比，日糧中添加抗生素顯著降低了盲腸中雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量（P＜0.05），但添加酵母多糖與對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05）。

表4 酵母多糖對(duì)斷奶仔豬盲腸微生物的影響???????????????????????????????lg?CFU/g

3 討論

由于母乳富含的免疫球蛋白、抗體及其他生長(zhǎng)因子等成分，可以補(bǔ)充哺乳階段仔豬自身免疫力的不足，有效抑制病原微生物的生長(zhǎng)，因而，哺乳仔豬的發(fā)病率相對(duì)較低。仔豬斷奶以后，腸道發(fā)育尚未完善，難以有效消化飼料中的各種養(yǎng)分，此外，仔豬的免疫系統(tǒng)也不完善，缺乏對(duì)疾病和不良環(huán)境的抵抗力（陳云等，2015）。此外，飼料原料中常常含有一些抗原物質(zhì)，容易損傷仔豬腸道，引起嚴(yán)重的過(guò)敏反應(yīng)；某些病毒（流行性腹瀉病毒、輪狀病毒等）還會(huì)引起繼發(fā)性感染，損害腸道組織結(jié)構(gòu)的完整性，降低對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力，造成仔豬持續(xù)性的腹瀉，從而嚴(yán)重影響仔豬生長(zhǎng)（吳錫愛(ài)，2017）。抗生素可以有效殺滅腸道病原菌，在仔豬飼料中添加抗生素可以有效改善仔豬腹瀉狀況，提高飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)（尹富貴等，2007）。

已有大量的研究證實(shí)，在豬日糧中添加酵母多糖可以減少仔豬腹瀉、降低發(fā)病率、提高生長(zhǎng)性能。游金明等（2010）研究表明，斷奶仔豬日糧中添加甘露寡糖可以顯著提高平均日增重和平均日采食量，降低料重比；許龍飛等（2016）研究表明，日糧中添加0.1%酵母細(xì)胞壁多糖可以提高斷奶仔豬的日增重，并降低試驗(yàn)期間仔豬的死亡率；劉寧等（2017）研究表明，霉變飼料中添加0.1%酵母細(xì)胞壁可以顯著提高仔豬飼料消化率、腸道淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶的活性。在本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，斷奶仔豬飼料中添加抗生素和酵母多糖顯著提高了平均日增重和平均日采食量，并降低仔豬的腹瀉率，這與賀琴等（2016）的研究結(jié)果一致，表明酵母多糖具有與抗生素類似的促生長(zhǎng)效果，顯示出良好的替抗前景。

在本試驗(yàn)中，添加酵母多糖對(duì)斷奶仔豬免疫性能指標(biāo)的影響并不明顯，但可以觀察到血清IgM水平的顯著提高，這與徐杰等（2018）的結(jié)果比較相似。血清免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）是動(dòng)物體內(nèi)體液免疫應(yīng)答的主要信號(hào)分子，其濃度可以反映機(jī)體體液免疫功能。本試驗(yàn)結(jié)果表明，酵母多糖有提高仔豬免疫功能的作用，但效果不理想，這可能與試驗(yàn)條件、添加劑量及仔豬狀況有關(guān)，有待于進(jìn)一步研究。

仔豬早期斷奶時(shí)，腸道發(fā)育還未完善，面臨眾多應(yīng)激，不僅會(huì)對(duì)腸道物理結(jié)構(gòu)造成損失，還會(huì)引起腸道微生物紊亂，從而影響仔豬健康生長(zhǎng)（董曉麗等，2013）。酵母多糖的主要成分包括甘露寡糖和β-葡聚糖，它們作為生物活性物質(zhì)是酵母多糖功能的體現(xiàn)。有研究表明，甘露寡糖抑制大腸桿菌、沙門氏菌等病原菌的增殖，主要是通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性吸附作用，但同時(shí)還可以促進(jìn)乳酸桿菌、雙歧桿菌等有益菌的增殖（黃鑫等，2014）。在本試驗(yàn)中，日糧添加抗生素和酵母多糖均可以顯著降低斷奶仔豬盲腸中有害菌大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量，但抗生素還顯著降低了有益菌雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量，而酵母多糖則不影響這兩種有益菌的生長(zhǎng)，這表明酵母多糖在調(diào)節(jié)腸道微生物菌群方面具有一定優(yōu)勢(shì)。

4 小結(jié)

日糧中添加酵母多糖可以顯著提高斷奶仔豬的平均日增重和平均日采食量，降低仔豬腹瀉率，并能在一定程度上改善仔豬免疫功能；與抗生素相比，酵母多糖可以抑制腸道中有害菌大腸桿菌、沙門氏菌的增殖，卻不會(huì)影響有益菌雙歧桿菌、乳酸桿菌的生長(zhǎng)，具有更好的調(diào)節(jié)腸道微生物菌群的作用，是一類具有較大潛力的抗生素替代品。