黃芪建中湯聯(lián)合質(zhì)子泵抑制劑四聯(lián)序貫療法防治 胃潰瘍的療效及對金屬蛋白酶-3、Ghrelin表達(dá)的影響

王昆,張瑩

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安貞醫(yī)院,北京 100029)

胃潰瘍是常見的消化性系統(tǒng)疾病之一，其臨床特點通常為反復(fù)發(fā)作和節(jié)律性腹痛，由于胃酸分泌過多導(dǎo)致胃黏膜表層潰爛而發(fā)生，患者經(jīng)常伴隨有反酸、灼熱、噯氣、嘈雜等生理感覺，嚴(yán)重時易出現(xiàn)便血、惡心、嘔吐甚至嘔血等現(xiàn)象[1-3]。一般引起胃潰瘍的原因有不規(guī)律的生活節(jié)奏，長期吸煙喝酒，飲食上多為暴飲暴食，以及精神壓力較大等[4-6]。出現(xiàn)胃潰瘍的患者如果不及時進(jìn)行治療，嚴(yán)重時容易出現(xiàn)胃穿孔、胃出血等并發(fā)癥，對患者生命健康造成較大的威脅[7]。為了進(jìn)一步探索臨床上對胃潰瘍的有效治療方法，本研究對比質(zhì)子泵抑制劑四聯(lián)序貫療法單用和黃芪建中湯與質(zhì)子泵抑制劑四聯(lián)序貫療法聯(lián)用的療效差異及其可能的作用機制，現(xiàn)報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取本院2016年1月—2017年5月收入92例胃潰瘍患者，隨機分為治療組和對照組，每組46例。對照組中男26例，女20例；年齡27～61(40.29±3.18)歲；病程7～15(4.25±1.26)d；胃潰瘍直徑(6.78±3.18)mm。治療組中男27例，女19例；年齡26～63(40.78±4.35)歲；病程6～17(4.94±1.19)d；胃潰瘍直徑(6.28±3.79)mm。以上92例患者均有胃脹、泛酸、惡心嘔吐、腹痛的臨床癥狀，均進(jìn)行了胃鏡檢查，確診為胃潰瘍，所有患者已排除心、肝、腎等器官損傷，以及全身性疾病。兩組患者年齡、性別、病程、臨床癥狀、身體狀況等情況，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 治療方法

1.2.1 對照組

采用四聯(lián)序貫療法進(jìn)行治療。前45天口服蘭索拉唑膠囊(國藥準(zhǔn)字H20066197，湖北華世通潛龍藥業(yè)有限公司，30 mg/粒)，每次1粒，每日1次;口服阿莫西林膠囊(國藥準(zhǔn)字H19993034，山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司，0.25 g/粒)，每次2粒，每日2次。后45天口服蘭索拉唑膠囊30 mg，每日1次;口服膠體果膠鉍膠囊(國藥準(zhǔn)字H20023399，廣州白云山光華制藥股份有限公司，50 mg/粒)，每次3粒，每日3次;口服呋喃唑酮片(國藥準(zhǔn)字H14023937，山西云鵬制藥有限公司，0.1 g/片)，每日1片，每日3次。

1.2.2 治療組

治療組在對照組所采用治療方法上，口服黃芪建中湯(黃芪15 g，白芍15 g，桂枝、生姜、甘草各10 g，大棗10個，飴糖50 g)，每日1劑，連續(xù)服用30天作為1個療程。兩組患者均進(jìn)行治療3個月。

1.3 檢測指標(biāo)

1.3.1 胃鏡檢查

治療結(jié)束后，兩組患者均進(jìn)行胃鏡下黏膜愈合質(zhì)量的檢查。完全治愈：胃黏膜上潰瘍消失，無炎癥；基本治愈：潰瘍愈合面積≥75%，周圍炎癥較輕；部分治愈：潰瘍數(shù)目減少，潰瘍愈合面積≥50%，<75%；無效：潰瘍愈合面積<50%，炎癥未減輕，或潰瘍無變化甚至加重。有效治愈為完全治愈、基本治愈和部分治愈之和。

1.3.2 熒光定量PCR檢測基質(zhì)金屬蛋白酶-3、ghrelin表達(dá)量

1)試劑：Trizol試劑(南京奧青公司)；逆轉(zhuǎn)錄、qRT-PCR試劑盒(南京百世金公司)；兔抗人基質(zhì)金屬蛋白酶-3、兔抗人ghrelin單克隆抗體、枸櫞酸抗原修復(fù)液、DAB顯色液(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)。

2)總RNA提?。喊凑誘rizol試劑說明書，采用一步法提取胃黏膜組織RNA，采用紫外分光光度計法對提取的總RNA質(zhì)量進(jìn)行定量，并相應(yīng)調(diào)整RNA濃度。本研究所制備組織總RNA的質(zhì)量及濃度經(jīng)調(diào)整后均達(dá)到可以進(jìn)行PCR反應(yīng)的條件，將提取后的RNA進(jìn)行分裝，貼上標(biāo)簽保存于-80℃超低溫冰箱，或立即將其進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。

3)qPCR：根據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，實驗方法采用兩步法，反應(yīng)條件如下：70℃ 10 min，冰浴2 min，42℃ 16 min，70℃ 10 min，逆轉(zhuǎn)錄后得到的cDNA于-80℃條件下暫時保存。qPCR采用Tapman探針法，反應(yīng)體系參照試劑盒說明書進(jìn)行，反應(yīng)條件如下：42℃預(yù)變性30 s；95℃變性10 s；60℃退火20 s；70℃延伸10 s；共重復(fù)進(jìn)行40個同樣的循環(huán)。使用定量PCR儀平臺進(jìn)行檢測，內(nèi)參為RNU6B，計算方法為相對定量法，用2-△△Ct表示基質(zhì)金屬蛋白酶-3、ghrelin的相對表達(dá)量，每個實驗進(jìn)行3次重復(fù)取平均值。

1.3.3 中醫(yī)證候積分

對兩組患者治療前后的中醫(yī)證候積分進(jìn)行對比，主要觀察癥狀為胃脘脹痛，噯氣，反酸，嘔吐共4項，按照無(0分)，輕(1分)，中(3分)，重(5分)進(jìn)行評分，次要觀察癥狀為大便秘結(jié)，口干苦，舌質(zhì)紅絳或黃膩苔，脈弦滑等，按照無(0分)、有(1分)進(jìn)行評分。最后將所有評分項進(jìn)行相加，分值越高，表明患者癥狀越嚴(yán)重。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩組患者胃鏡下黏膜愈合質(zhì)量比較

如表1所示，治療后，對照組和治療組患者的總有效治愈率分別為76.1%(35/46)和97.8%(45/46)，治療組的治愈率明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表1 兩組患者胃鏡下黏膜愈合質(zhì)量比較[例(%)]

注:與對照組相比,*P<0.05

2.2 兩組患者基質(zhì)金屬蛋白酶-3、ghrelin表達(dá)量的比較

如表2所示，兩組患者治療前，對照組患者的基質(zhì)金屬蛋白酶-3(MMP-3)基因表達(dá)量是(1.21±0.33)，治療組為(1.20±0.51)，兩者不具有顯著性差異(P>0.05)。治療后，兩組患者胃黏膜基質(zhì)金屬蛋白酶-3的基因表達(dá)量均顯著升高，且治療組顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。治療前，對照組患者的ghrelin基因表達(dá)量是(1.81±0.27)，治療組為(1.82±0.29),兩者不具有顯著性差異(P>0.05)；治療后兩組患者ghrelin表達(dá)量均顯著下降，且治療組顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表2 兩組患者基質(zhì)金屬蛋白酶-3、ghrelin表達(dá)量的比較

2.3 兩組患者中醫(yī)證候積分比較

如表3所示，兩組患者治療前，對照組患者的中醫(yī)證候積分為(15.18±4.29)，治療組為(15.21±4.61)，兩者不具有顯著性差異(P>0.05)；治療后，兩組患者中醫(yī)證候積分均顯著減少，且治療組顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表3 兩組患者中醫(yī)證候積分的比較

3 討論

胃潰瘍是非常常見的消化系統(tǒng)疾病之一，主要癥狀為上腹部疼痛，嚴(yán)重時易出現(xiàn)胃穿孔或胃潰瘍出血等并發(fā)癥[8]。引起胃潰瘍的原因有很多，比如幽門螺桿菌感染，阿司匹林或皮質(zhì)類固醇等藥物的長期服用史，長期吸煙、飲酒或經(jīng)常飲用濃茶及咖啡，生活作息紊亂，飲食不規(guī)律，精神長期處于緊張、焦慮狀態(tài)等[9]。胃潰瘍發(fā)生的最終決定性因素是胃酸，所以有效治療胃潰瘍的方法就是抑制胃酸分泌過多，同時保護(hù)患者的胃黏膜，防止其受到損傷，另外還需要有效殺滅體內(nèi)的幽門螺桿菌[10]。

傳統(tǒng)的質(zhì)子泵抑制劑四聯(lián)序貫療法中幾種藥物可以有效抑制胃酸的分泌，另外還具有殺滅幽門螺桿菌的功能，可以在一定程度上起到對胃潰瘍的防治作用，但是對于患者來說，長期服用西藥進(jìn)行治療對身體會有一定影響[11]。一方面，四聯(lián)序貫療法中的幾種藥物都會引起不同程度的副作用，并且長期服用以上幾種藥物會引發(fā)機體正常菌群的紊亂，從而引發(fā)嚴(yán)重的不良反應(yīng)，對患者的身心造成不可逆轉(zhuǎn)的損傷[12]。另一方面，序貫療法的理念是僅僅根據(jù)胃潰瘍的發(fā)病機制來進(jìn)行針對性的治療，但是僅依據(jù)發(fā)病機制來抑制疾病的發(fā)生、發(fā)展并不等于從根本上解決問題，因為導(dǎo)致患者患病的因素非常多，并非單單兩個方面就可以解決，這樣的治療方式很容易造成日后復(fù)發(fā)[13]。

在中醫(yī)學(xué)中，胃潰瘍的發(fā)病原因可以歸結(jié)為飲食所傷，情志不遂或外感邪氣等多種因素，導(dǎo)致脾胃受傷，橫逆犯胃，胃氣陽滯。中醫(yī)上對胃潰瘍的治療，常考慮從加強機體抵抗力和免疫力入手，增加胃黏膜血流量，從而加快潰瘍的愈合[14]。本研究中所采用的黃芪建中湯中，黃芪具有補氣固表、斂瘡生肌的功效，常用于食少便溏、中氣下陷、久潰不斂等，其含有的有效成分具有抗?jié)兊淖饔?，可減輕潰瘍損傷面積，并且還具有抗炎、增強免疫功能的作用，有利于有害菌群的抑制及潰瘍的愈合；白芍具有抗菌、抗炎、抑制潰瘍的作用；桂枝可用于脘腹冷痛，具有抗菌、抗炎的作用；生姜可用于治脹滿、腹痛；甘草可用于脾胃虛弱、脘腹疼痛等；大棗能健脾益胃，中和藥性。在傳統(tǒng)的四聯(lián)序貫療法基礎(chǔ)上，再服用此中藥方劑既能殺滅幽門螺桿菌，抑制胃酸分泌，又能健脾開胃，增強機體免疫功能，有利于潰瘍的愈合，有效防治胃潰瘍。本研究的結(jié)果顯示，治療后治療組患者(黃芪建中湯聯(lián)合四聯(lián)序貫療法)與對照組患者(四聯(lián)序貫療法)相比，治療組黏膜潰瘍愈合有效率顯著高于對照組(P<0.05)，且治療組的中醫(yī)證候積分明顯低于對照組(P<0.05)，說明聯(lián)合使用比四聯(lián)序貫療法單用更能有效防治胃潰瘍,改善臨床癥狀。

基質(zhì)金屬蛋白酶-3(MMP-3)在機體多種組織和細(xì)胞中都廣泛存在，屬于基質(zhì)溶解素，具有激活其他MMPs的作用[15]。潰瘍的治療過程一般會經(jīng)歷4個階段：凝血期、炎癥期、移行增殖期和重建期。在這個過程中，基質(zhì)金屬蛋白酶是降解細(xì)胞外基質(zhì)以及基底膜的關(guān)鍵酶之一，對黏膜血管的再生和胃黏膜受損上皮細(xì)胞的修復(fù)有重要作用，所以對胃潰瘍的治療有密切關(guān)系，起著十分關(guān)鍵的作用[16]。ghrelin是機體內(nèi)生長激素促分泌素針對其受體的一個內(nèi)源性配體，具有調(diào)節(jié)生長激素或者一些胃腸肽類成分的釋放的作用，在生物學(xué)功能上，扮演著促進(jìn)胃腸蠕動以及調(diào)節(jié)胃酸分泌的角色[17-20]。本研究發(fā)現(xiàn)，胃潰瘍患者的黏膜ghrelin基因表達(dá)量升高，即分泌量增多，經(jīng)過治療后，患者ghrelin表達(dá)量下降，說明ghrelin的表達(dá)與機體胃酸的分泌過程有一定關(guān)系，參與潰瘍的發(fā)生發(fā)展過程。本研究結(jié)果顯示，治療后兩組患者的基質(zhì)金屬蛋白酶-3升高，ghrelin下降，并且治療組患者的基質(zhì)金屬蛋白酶-3表達(dá)量顯著高于對照組(P<0.05)，而ghrelin表達(dá)量顯著低于對照組(P<0.05)。

綜上所述，相比于傳統(tǒng)的四聯(lián)序貫療法單用的方法，黃芪建中湯聯(lián)合四聯(lián)序貫療法可以有效提高胃鏡下黏膜愈合質(zhì)量，升高基質(zhì)金屬蛋白酶-3表達(dá)量，降低ghrelin表達(dá)量，從而降低患者中醫(yī)證候積分，提高胃潰瘍患者的治愈率，對胃潰瘍的防治具有較好的臨床療效，值得推廣和應(yīng)用。