老年胃癌患者EGFR、MMP-9、STC2蛋白表達及與臨床病理的關(guān)系

呂士紅 劉 磊 李美姍 史春靜

(牡丹江醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，黑龍江 牡丹江 157000)

胃癌的發(fā)病較為隱匿，早期癥狀類似于胃部炎癥，易被忽視，目前尚未發(fā)現(xiàn)有效的臨床早期診斷技術(shù)〔1〕。相關(guān)研究提出生物標志物具有極其重要的作用〔2〕。在胃癌細胞中表皮生長因子受體(EGFR)相互作用，同時能促進侵襲轉(zhuǎn)移?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9作為腫瘤細胞穿透基底膜所必需的蛋白水解酶，能影響腫瘤遷移擴散調(diào)節(jié)〔3〕。斯鈣素(STC)作為糖蛋白激素，能促使腎對磷酸鹽的吸收，防止血鈣過高，有利于鈣磷動態(tài)平衡的維持，相關(guān)研究提出STC的表達和人類腫瘤發(fā)生發(fā)展過程密切相關(guān)〔4〕。本文擬分析老年胃癌患者EGFR、MMP-9、STC2蛋白表達及與臨床病理的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選取2015年3月至2016年2月牡丹江醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院收治的88例胃癌術(shù)后胃癌組織標本，均通過病理證實為胃癌，在術(shù)前未經(jīng)過放化療等治療，均為首次手術(shù)治療。患者年齡63～85〔平均(72.14±2.76)〕歲；女31例，男57例；浸潤深度：T1～T2 16例，T3～T4 72例；23例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，65例伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；68例低度分化，20例中/高度分化；34例Ⅰ、Ⅱ期，54例Ⅲ期。另選擇同期行胃鏡檢查室內(nèi)活檢，提示為正常胃組織的64例視為對照組，無重度不典型增生者。其中女11例，男53例；年齡61～83〔平均(71.65±2.68)〕歲。兩組年齡、性別等方面差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

1.2方法 德國Leiac公司提供sT501o自動染色機和RM2245病理切片機，由北京市中山生物制品技術(shù)公司提供鼠抗人EGFR單克隆抗體、鼠抗人MMP-9單克隆抗體、鼠抗人STC2單克隆抗體，濃縮性二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色試劑盒由烏海博士德生物公司提供。樣本切片3張，采取免疫組化方法予以染色，并檢測樣本中EGFR、MMP-9、STC2表達。選取5個不同視野的切片，觀察及記錄視野中100個細胞的陽性細胞數(shù)，細胞核或細胞質(zhì)染成黃色或棕黃色為陽性，5次陽性細胞個數(shù)的平均值作為最終數(shù)目，然后算出平均陽性細胞率。僅細胞質(zhì)著色或不存在陽性著色細胞，同時陽性細胞率<5%為陰性。

1.3統(tǒng)計學處理 應(yīng)用SPSS11.5軟件進行t檢驗、χ2檢驗及Pearson相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組EGFR、MMP-9、STC2陽性表達分析 胃癌組EGFR、MMP-9、STC2陽性表達率顯著高于對照組(P<0.001)，見表1。

2.2胃癌組EGFR、MMP-9、STC2蛋白表達和臨床病理的關(guān)系 不同性別EGFR、MMP-9、STC2表達差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，但不同腫瘤直徑、浸潤程度、淋巴轉(zhuǎn)移、分化程度、臨床分期患者EGFR、MMP-9、STC2表達差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表2。

表1 兩組EGFR、MMP-9、STC2陽性表達對比〔n(%)〕

表2 胃癌組EGFR、MMP-9、STC2蛋白陽性表達和臨床病理的關(guān)系(n)

2.3胃癌組EGFR、MMP-9、STC2蛋白表達相關(guān)性 EGFR和MMP-9、EGFR和STC2、MMP-9和STC2表達均呈正相關(guān)性(r=0.674、0.724、0.582，均P<0.05)。

3 討 論

胃癌發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及遷徙和多節(jié)段、多因素、多基因的參與有關(guān)，涉及多種抑癌基因失活、腫瘤基因激活及多種因子調(diào)節(jié)〔5〕。當前在診斷和治療胃癌的難點主要是因為早期癥狀不明顯，診斷時間較晚，腫瘤易從胃部經(jīng)過血管、淋巴等向人體內(nèi)其他器官、組織內(nèi)擴散和遷移，抗腫瘤效果不明顯。

近年來，已發(fā)現(xiàn)較多的腫瘤影響基因、因子，主要包括EGFR、MMP-9、STC-2〔6〕。MMP-9被稱為明膠原或Ⅳ型膠原酶，作為MMPs的一員，是機體內(nèi)參與降解細胞外基質(zhì)(ECM)眾多酶中的關(guān)鍵酶〔7〕。ECM降解作為腫瘤細胞向正常組織侵襲擴散的前提，此過程依賴多種酶的共同參與，MMP-9作為腫瘤細胞穿透基底膜所需的蛋白水解酶〔8〕，不但有降解作用，同時能促進腫瘤血管的生成，能上調(diào)腫瘤血管化的程度。相關(guān)研究表明，食管癌、胃癌、大腸癌等上皮細胞來源的惡性腫瘤均伴有EGFR蛋白表達乃至過表達情況，從中促使癌細胞的血管生成、增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移，阻礙癌細胞的凋亡〔9〕。相關(guān)研究使用DNA甲基化檢測發(fā)現(xiàn)EGFR啟動子甲基化可能為胃癌發(fā)生、發(fā)展的表觀遺傳學生物標志〔10〕。相關(guān)研究提出多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及演進過程和STC家族密切相關(guān)〔11〕。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)在乳腺癌細胞系中STC2作為視黃酸信號通路和雌激素的下游靶標，持續(xù)的STC2表達會阻礙細胞的生長及活力〔12〕。相關(guān)研究顯示，神經(jīng)母細胞瘤細胞通過STC2轉(zhuǎn)染后，會提高浸潤能力，同時增強MMP-2的活性，加大腫瘤細胞出血和轉(zhuǎn)移的風險〔13〕。STC2在腎癌中的表達上升，同時和腎癌侵襲力有關(guān)，縮短患者總生存期。相關(guān)研究在mRNA水平通過檢測癌旁和胃癌組織，得到相似的STC2表達結(jié)果〔14〕，提示STC2表達增強作為胃癌侵襲轉(zhuǎn)移過程的重要分子事件，有可能會加大胃癌的惡性程度。

相關(guān)研究顯示，EGFR、MMP-9、STC2在子宮癌、食道癌、乳腺癌等惡性腫瘤中的表達上調(diào)〔15〕。本研究結(jié)果EGFR、MMP-9、STC2三者之間的表達可能和胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。另外EGFR、MMP-9、STC2表達水平和腫瘤的擴散程度呈正相關(guān)，EGFR的過度激活對胃癌組織中惡性細胞的演進過程及胃黏膜正常細胞的轉(zhuǎn)化過程發(fā)揮極其重要的作用。

綜上，EGFR、MMP-9、STC2蛋白在胃癌組織中的表達上升，其表達和臨床病理特征密切相關(guān)，通過檢測三者的表達對診治胃癌有一定指導價值。