• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    親子鑒定中D18S51基因座突變分析與應(yīng)對(duì)

    2018-09-12 10:42:00楊玉有張丹妍楊智曦李新生呂靜馬明福李練兵
    關(guān)鍵詞:突變親子鑒定

    楊玉有 張丹妍 楊智曦 李新生 呂靜 馬明福 李練兵

    【摘要】目的 對(duì)親子鑒定中STR基因座D18S51突變現(xiàn)象進(jìn)行觀察與分析,獲取該基因座在本地區(qū)人群中的突變數(shù)據(jù)和特征。方法 對(duì)二聯(lián)體親子鑒定使用Identifiler?和STRtyper-10G系統(tǒng)聯(lián)合檢測(cè),三聯(lián)體親子鑒定使用Goldeneye?20A系統(tǒng)檢測(cè)。如果檢測(cè)結(jié)果中有3個(gè)以下基因座不符合遺傳規(guī)律,則增加檢測(cè)AGCU21+1系統(tǒng),確認(rèn)是否存在突變。對(duì)D18S51的突變進(jìn)行分析,計(jì)算突變率,分析突變特征。結(jié)果 在856例認(rèn)定親子關(guān)系的鑒定中發(fā)現(xiàn)D18S51突變8例,突變率為0.7130%,均為父源的一步突變;其中5例為重復(fù)單位減少,2例為重復(fù)單位增加,另1例不能確定。結(jié)論 本研究發(fā)現(xiàn)的D18S51可疑突變經(jīng)驗(yàn)證確認(rèn)為突變,其突變步數(shù)、突變來源等突變特征與其他文獻(xiàn)報(bào)道基本一致;D18S51的突變率高于其他文獻(xiàn)的報(bào)道,可能系本次調(diào)查觀察的減數(shù)分裂次數(shù)有限導(dǎo)致,也可能與地區(qū)、種群差異有關(guān)。

    【關(guān)鍵詞】法醫(yī)遺傳學(xué);親子鑒定;STR基因座;突變

    【中圖分類號(hào)】R394.5 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】ISSN.2095.6681.2018.06.16..02

    短串聯(lián)重復(fù)序列(short tandem repeats,STR)是一類廣泛存在于人類基因組中具有遺傳多態(tài)性的DNA序列。STR基因座于20世紀(jì)90年代初期首次被作為一種重要的遺傳標(biāo)記應(yīng)用于人類親權(quán)鑒定。目前,STR已經(jīng)成為親權(quán)鑒定中應(yīng)用最廣泛的遺傳標(biāo)記。受誘變劑、放射線等許多因素影響,STR基因座可能會(huì)發(fā)生突變,導(dǎo)致親子鑒定中親代與子代的遺傳標(biāo)記不符合遺傳規(guī)律,從而可能影響親子鑒定結(jié)果的正確性。因此在親子鑒定中,應(yīng)調(diào)查各基因座的突變率,選取那些突變率低的遺傳標(biāo)記。

    D18S51基因座是位于18號(hào)染色體長(zhǎng)臂的簡(jiǎn)單四核苷酸重復(fù)序列,早期的STR擴(kuò)增分型系統(tǒng)如英國(guó)法庭科學(xué)服務(wù)部建立的第二代復(fù)合擴(kuò)增系統(tǒng)[1]和美國(guó)聯(lián)邦調(diào)查局發(fā)起建立的DNA聯(lián)合索引系統(tǒng)(Combined DNA Index System,CODIS)[2]均包含了該基因座。當(dāng)下國(guó)內(nèi)法醫(yī)DNA分型常用的Identifiler?試劑盒和Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)20A試劑盒等也均包含了該基因座。本文作者通過上述兩個(gè)試劑盒在親子鑒定檢測(cè)工作中的應(yīng)用,對(duì)STR基因座D18S51的突變現(xiàn)象進(jìn)行了觀察與分析,現(xiàn)報(bào)告如下。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 樣本

    1030例親子鑒定案件樣品來源于重慶市正鼎司法鑒定所檢案。檢驗(yàn)材料包括血樣、帶毛囊毛發(fā)等。

    1.1.2 試劑與儀器

    Identifiler?試劑盒、Veriti? Thermal Cycler PCR擴(kuò)增儀和3130 Genetic Analyzer購(gòu)自美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司(Applied Biosystems,Inc.,ABI),Goldeneye? DNA身份鑒定系統(tǒng)20A試劑盒購(gòu)自基點(diǎn)認(rèn)知技術(shù)(北京)有限公司,STRtyper-10G試劑盒購(gòu)自珠??频巧锕こ逃邢薰荆珹GCU 21+1 STR 熒光檢測(cè)試劑盒購(gòu)自無錫中德美聯(lián)生物技術(shù)有限公司。

    1.2 方法

    1.2.1 DNA的提取

    采用Chelex-100法提取樣本基因組DNA。

    1.2.2 PCR擴(kuò)增和電泳分型

    三聯(lián)體親子鑒定采用Goldeneye? 20A試劑盒檢測(cè),二聯(lián)體親子鑒定聯(lián)合采用Identifiler?試劑盒和STRtyper-10G試劑盒聯(lián)合檢測(cè)。如果出現(xiàn)可疑突變,則補(bǔ)充檢測(cè)AGCU 21+1 STR系統(tǒng)。擴(kuò)增產(chǎn)物通過3130 Genetic Analyzer進(jìn)行毛細(xì)管電泳,GeneMapper ID v3.2軟件進(jìn)行基因型分型。

    1.2.3 統(tǒng)計(jì)分析

    親權(quán)指數(shù)(paternity index,PI)、累計(jì)親權(quán)指數(shù)(cumulative paternity index,CPI)的計(jì)算按文獻(xiàn)報(bào)道的方法進(jìn)行[3-4]。計(jì)算所使用的相關(guān)等位基因分布頻率數(shù)據(jù)來自文獻(xiàn)[5]及試劑盒生產(chǎn)廠家所提供的頻率表。如果觀察到等位基因發(fā)生突變,則參考美國(guó)血庫(kù)協(xié)會(huì)(American Association of Blood Banks,AABB)和國(guó)際法醫(yī)遺傳學(xué)會(huì)(International Society for Forensic Genetics,ISFG)推薦的Brenner逐步突變模型計(jì)算PI值[3-4];STR基因座突變率μ值見參考文獻(xiàn)[6]。

    1.2.4 判定依據(jù)

    判定親生關(guān)系的理論依據(jù)是孟德爾遺傳定律和行業(yè)規(guī)范[7]及專家共識(shí)[8]。經(jīng)過累計(jì)非父排除概率(cumulative probability of exclusion,CPE)≥99.99%的遺傳標(biāo)記系統(tǒng)的檢測(cè),經(jīng)過計(jì)算,被檢測(cè)男子的CPI小于0.0001時(shí),排除被檢測(cè)男子是孩子的生物學(xué)父親;被檢測(cè)男子的CPI大于10000時(shí),支持被檢測(cè)男子是孩子的生物學(xué)父親[7]。在支持親權(quán)關(guān)系的鑒定中,出現(xiàn)不符合遺傳規(guī)律的分型結(jié)果則考慮發(fā)生突變,增加檢測(cè)AGCU21+1STR試劑盒確證。在三聯(lián)體親權(quán)鑒定中,當(dāng)考慮發(fā)生了突變時(shí),子代新等位基因的來源根據(jù)子代新等位基因與親代等位基因的差異大小來確定,親代等位基因與子代新等位基因差異最小的一方定為突變來源方。

    2 結(jié) 果

    對(duì)存在可疑突變的案例,增加檢測(cè)AGCU 21+1系統(tǒng),均未發(fā)現(xiàn)新的不符合遺傳規(guī)律的分型結(jié)果。

    1030例鑒定中有856例鑒定認(rèn)定親子關(guān)系,CPI均>10 000;其中二聯(lián)體鑒定590例、三聯(lián)體鑒定266例,減數(shù)分裂觀察次數(shù)為1122;共發(fā)現(xiàn)突變30例,其中D18S51基因座突變8例,突變率為0.7130%。

    8例突變案例中突變來源均為父方,均為一步突變,其中5例表現(xiàn)為重復(fù)單位的減少,2例表現(xiàn)為重復(fù)單位的增加,另外1例尚不能確定突變的等位基因及重復(fù)單位的增減。8例發(fā)生突變的等位基因的重復(fù)單位重復(fù)次數(shù)均在14次以上,均發(fā)生于堿基結(jié)構(gòu)均一即重復(fù)次數(shù)為整數(shù)而不伴有不完全重復(fù)單位插入的等位基因,結(jié)果見表1。

    3 討 論

    3.1 突變模式與突變步數(shù)

    現(xiàn)有研究表明,STR基因座突變主要由復(fù)制滑動(dòng)造成,該類突變符合逐步突變模式,一步突變大約占突變的90%[8]。本研究所發(fā)現(xiàn)的8例突變均為一步突變,未發(fā)現(xiàn)多步突變。

    3.2 突變來源者民族

    依據(jù)AABB 2008年度數(shù)據(jù)分析,民族也是STR基因座突變率差異的原因之一[9],所以本調(diào)查標(biāo)明了突變來源者的來源地區(qū)及民族以便于與其他地區(qū)及民族比較。

    3.3 突變的來源

    由于精子細(xì)胞分化經(jīng)歷的細(xì)胞分裂次數(shù)比卵細(xì)胞多等原因,父源突變多于母源突變。本研究發(fā)現(xiàn)的8例突變均為父源突變。劉素娟等[10]對(duì)中國(guó)南方漢族10 000例肯定親子關(guān)系的三聯(lián)體親權(quán)鑒定案例進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)父源突變率與母源突變率的平均比值約為3.57:1,與Brenner[11]推薦的平均比值3.5較為接近。但AABB 2008年度的數(shù)據(jù)[9]也顯示這一比值在不同的基因座差異較大,最小為1.25倍,最大則達(dá)到18.466倍。

    3.4 突變的基因座與突變率

    STR基因座的突變率與等位基因中基序的堿基結(jié)構(gòu)和重復(fù)次數(shù)有關(guān)[8]。AABB 2008年[9]的統(tǒng)計(jì)結(jié)果及李成濤等[12]對(duì)中國(guó)多地區(qū)人群數(shù)據(jù)的大樣本統(tǒng)計(jì)中,D18S51均是所統(tǒng)計(jì)基因座中突變率第三高的基因座,平均突變率分別為0.1808%和0.1666%;嚴(yán)江偉等[6]報(bào)道的D18S51基因座平均突變率為0.060%;在劉素娟等[10]的統(tǒng)計(jì)結(jié)果中,D18S51則是突變率最高的基因座,平均突變率為0.23%。本調(diào)查所得到的D18S51突變率為0.7130%,高于上述文獻(xiàn)報(bào)道,可能與本次調(diào)查觀察的減數(shù)分裂次數(shù)有限有關(guān),也可能與地區(qū)、種群差異有關(guān)。

    3.5 突變的應(yīng)對(duì)

    李成濤等[12]研究表明,約100例單親親子鑒定或50例三聯(lián)體親子鑒定就可能遇上1~2例突變。因此,突變是親子鑒定檢案中一個(gè)不可回避的問題。

    當(dāng)檢測(cè)一定數(shù)量的STR基因座只有少數(shù)幾個(gè)基因座不符合遺傳規(guī)律時(shí),應(yīng)考慮突變的可能性。遇到此類情況后,建議首先用不同的試劑重復(fù)檢測(cè),保證分型正確。然后計(jì)算疑似突變位點(diǎn)的PI值,計(jì)算突變率時(shí)建議盡可能采取本地區(qū)同種族人群大樣本調(diào)查所得的參數(shù),在母源數(shù)據(jù)不充分的情況下,母源突變率可直接取值0.0005[7] 。經(jīng)過計(jì)算CPI,當(dāng)CPI大于0.0001而小于10000時(shí),應(yīng)通過增加檢測(cè)遺傳標(biāo)記來達(dá)到要求[7];當(dāng)CPI大于10000時(shí),應(yīng)慎重考慮,仍建議增加檢測(cè)新的遺傳標(biāo)記:如果不存在親權(quán)關(guān)系,則會(huì)發(fā)現(xiàn)更多的不符合遺傳規(guī)律的基因座。

    為了更全面地了解中國(guó)人群中親權(quán)鑒定常用STR基因座的突變規(guī)律,建議各地區(qū)學(xué)者加強(qiáng)對(duì)突變現(xiàn)象的觀察與報(bào)道,分析突變來源和類型,了解突變來源者的民族和年齡等更多、更加全面的信息,以實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)共享和比較分析。

    參考文獻(xiàn)

    [1] Kimpton CP,Oldroyd NJ,Watson SK,et al.Validation of highly discriminating multiplex short tandem repeat amplification systems for individual identification[J].Electrophoresis,1996,17(8):1283-1293.

    [2] Budowle B,Moretti TR,Niezgoda SJ,et al.CODIS and PCR-based short tandem repeat loci:law enforcement tools[C].Second European Symposium on Human Identification.Promega Corporation,Madison,Wisconsin,1998:73-88.

    [3] AABB.Guidance for standards for relationship testing laboratories [M].7th ed,Maryland:AABB,2006:154-157.

    [4] Gjertson DW,Brenner CH,Baur MP,et al.ISFG:recommendations on biostatistics in paternity testing[J].Forensic Sci Int:Genet,2007,1(3-4):223-231.

    [5] 黃 霞,王 芳,王蓉感,等.重慶地區(qū)漢族人群15個(gè)STR基因座遺傳多態(tài)性研究[J].重慶醫(yī)學(xué),2008,(1):58-60.

    [6] Yan J,Liu Y,Tang H,et al.Mutations at 17 STR loci in Chinese population[J].Forensic Sci Int,2006:162(1-3):53-54.

    [7] 司法部司法鑒定科學(xué)技術(shù)研究所.SF/Z JD0105001-2016親權(quán)鑒定技術(shù)規(guī)范[S].

    [8] 侯一平.法醫(yī)物證學(xué):第4版[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2016:181-182.

    [9] American Association of Blood Banks (AABB).Annual report for testing in 2008[EB/OL].

    [10] 劉素娟,李成濤,陳文靜,等.常染色體STR突變率的研究[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版),2013,34(3):326-330.

    [11] Brenner CH.Mutations in Paternity[EB/OL].

    [12] 李成濤,趙書民,柳燕.DNA鑒定前沿[M].北京:科學(xué)出版社,2011:19-26.

    本文編輯:王雨辰

    猜你喜歡
    突變親子鑒定
    拒做親子鑒定,承擔(dān)不利后果
    公民與法治(2023年2期)2023-03-31 03:18:44
    親子鑒定在法律訴訟中的應(yīng)用
    法制博覽(2018年34期)2018-01-22 18:21:33
    日本做親子鑒定的夫妻增多
    解讀你不知道的親子鑒定
    今日文摘(2017年13期)2017-07-19 08:13:14
    黔西南州日照時(shí)數(shù)變化分析
    例析應(yīng)對(duì)體育教學(xué)環(huán)境突變的教學(xué)策略
    關(guān)于分析皮帶傳送中的摩擦力突變問題
    考試周刊(2016年76期)2016-10-09 09:47:35
    抑癌基因p16在燃煤型砷中毒患者中突變及甲基化的情況與意義
    北約防長(zhǎng)開會(huì)應(yīng)對(duì)東歐“突變”
    遼寧朝陽地區(qū)氣溫變化特征分析
    亚洲成人免费电影在线观看| 淫秽高清视频在线观看| 免费搜索国产男女视频| 狂野欧美激情性xxxx| 一级毛片高清免费大全| 欧美日韩亚洲高清精品| 99国产精品免费福利视频| 精品福利永久在线观看| 国产单亲对白刺激| 精品久久久精品久久久| 免费看a级黄色片| 国产精品久久久人人做人人爽| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 国产色视频综合| svipshipincom国产片| 亚洲午夜理论影院| 热re99久久精品国产66热6| 美女午夜性视频免费| 中文字幕人妻丝袜制服| 国产成人欧美在线观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 乱人伦中国视频| 国产午夜精品久久久久久| 在线观看免费日韩欧美大片| 久久久久久久久免费视频了| 妹子高潮喷水视频| 欧美黄色片欧美黄色片| 亚洲精华国产精华精| 久久草成人影院| 咕卡用的链子| 波多野结衣av一区二区av| 淫秽高清视频在线观看| 国产成人欧美在线观看| 亚洲av五月六月丁香网| 丰满的人妻完整版| 超色免费av| 搡老乐熟女国产| av免费在线观看网站| 国产又色又爽无遮挡免费看| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 精品福利观看| 宅男免费午夜| 免费搜索国产男女视频| 欧美久久黑人一区二区| 少妇粗大呻吟视频| 午夜福利在线免费观看网站| 亚洲一区高清亚洲精品| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 欧美在线黄色| 1024视频免费在线观看| 亚洲情色 制服丝袜| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 午夜免费观看网址| 国产精品成人在线| 黄片播放在线免费| 丝袜在线中文字幕| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 18美女黄网站色大片免费观看| 欧美中文综合在线视频| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 国产欧美日韩一区二区三| 狠狠狠狠99中文字幕| bbb黄色大片| 亚洲精品av麻豆狂野| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 国产成人精品在线电影| 成熟少妇高潮喷水视频| 超碰成人久久| 黄色女人牲交| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 精品国内亚洲2022精品成人| 老汉色∧v一级毛片| 成年人免费黄色播放视频| 欧美乱妇无乱码| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 久久中文字幕一级| 久久草成人影院| 热99国产精品久久久久久7| 国产精品久久久av美女十八| 中亚洲国语对白在线视频| 国产激情久久老熟女| 曰老女人黄片| 久热这里只有精品99| 一级片免费观看大全| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲,欧美精品.| 青草久久国产| 丁香六月欧美| 亚洲自拍偷在线| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲国产中文字幕在线视频| 999精品在线视频| 99在线人妻在线中文字幕| 欧美日韩福利视频一区二区| 精品国产国语对白av| 色在线成人网| 母亲3免费完整高清在线观看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲中文字幕日韩| 色综合站精品国产| 亚洲国产中文字幕在线视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 级片在线观看| 亚洲精品中文字幕在线视频| 色综合站精品国产| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 成人av一区二区三区在线看| 99精国产麻豆久久婷婷| 伦理电影免费视频| 午夜精品国产一区二区电影| 最近最新中文字幕大全免费视频| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产99白浆流出| 日韩三级视频一区二区三区| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 午夜福利一区二区在线看| 日韩高清综合在线| 咕卡用的链子| 亚洲精品一二三| 久久午夜亚洲精品久久| 国产成+人综合+亚洲专区| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 啪啪无遮挡十八禁网站| 99国产精品99久久久久| 亚洲国产精品sss在线观看 | 女性被躁到高潮视频| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 亚洲人成电影观看| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 久久人妻av系列| ponron亚洲| 黄色视频,在线免费观看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 97人妻天天添夜夜摸| 亚洲第一青青草原| 久久香蕉激情| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 国产亚洲av高清不卡| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 99在线视频只有这里精品首页| 日韩大尺度精品在线看网址 | 黑丝袜美女国产一区| 中出人妻视频一区二区| 久久精品91蜜桃| 久久久久久久午夜电影 | 午夜a级毛片| 在线观看午夜福利视频| 久久 成人 亚洲| 亚洲成人免费av在线播放| 人成视频在线观看免费观看| 一级毛片女人18水好多| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 热99re8久久精品国产| 91在线观看av| 国产高清激情床上av| 真人一进一出gif抽搐免费| 真人做人爱边吃奶动态| 亚洲片人在线观看| 波多野结衣一区麻豆| 午夜日韩欧美国产| 亚洲精品一二三| 国产成人av教育| 亚洲一区中文字幕在线| 91精品三级在线观看| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产乱人伦免费视频| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国产精品久久久人人做人人爽| 精品熟女少妇八av免费久了| 在线观看66精品国产| 美女高潮到喷水免费观看| 欧美中文日本在线观看视频| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 一级片免费观看大全| 窝窝影院91人妻| 无遮挡黄片免费观看| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产成+人综合+亚洲专区| 亚洲精品一二三| 亚洲人成伊人成综合网2020| 一二三四在线观看免费中文在| 欧美日本中文国产一区发布| 女人被狂操c到高潮| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产精品九九99| 国产精品亚洲av一区麻豆| 亚洲成人免费电影在线观看| 精品免费久久久久久久清纯| 丁香六月欧美| 黄片小视频在线播放| x7x7x7水蜜桃| 欧美亚洲日本最大视频资源| 天堂中文最新版在线下载| 人人澡人人妻人| 亚洲自拍偷在线| 青草久久国产| 热99国产精品久久久久久7| 男女床上黄色一级片免费看| 精品久久久久久成人av| 午夜视频精品福利| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 电影成人av| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 免费少妇av软件| 电影成人av| 国产成人精品久久二区二区免费| 亚洲精品一二三| 女人精品久久久久毛片| 国产亚洲av高清不卡| 黄色视频,在线免费观看| 国产精品一区二区在线不卡| 亚洲伊人色综图| 久久久久九九精品影院| 高清欧美精品videossex| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 久久久久亚洲av毛片大全| av超薄肉色丝袜交足视频| 麻豆一二三区av精品| avwww免费| av福利片在线| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲av第一区精品v没综合| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产真人三级小视频在线观看| 真人一进一出gif抽搐免费| 色老头精品视频在线观看| 视频区欧美日本亚洲| 级片在线观看| 久久亚洲精品不卡| 精品久久蜜臀av无| 久久欧美精品欧美久久欧美| 一级作爱视频免费观看| 一边摸一边做爽爽视频免费| 亚洲性夜色夜夜综合| 91老司机精品| 日韩精品免费视频一区二区三区| 色婷婷av一区二区三区视频| 18禁观看日本| 成年人黄色毛片网站| 日韩精品中文字幕看吧| 极品教师在线免费播放| 久久 成人 亚洲| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 久久这里只有精品19| 欧美精品亚洲一区二区| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 男男h啪啪无遮挡| 午夜视频精品福利| 91国产中文字幕| 中文字幕精品免费在线观看视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| e午夜精品久久久久久久| 动漫黄色视频在线观看| 亚洲五月天丁香| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 国产精品日韩av在线免费观看 | 黄色成人免费大全| 一夜夜www| 看黄色毛片网站| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲avbb在线观看| 美女午夜性视频免费| 精品久久久久久电影网| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 天天添夜夜摸| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产一卡二卡三卡精品| 精品久久久久久电影网| 日韩精品青青久久久久久| 成人手机av| www日本在线高清视频| 99在线人妻在线中文字幕| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 成人三级黄色视频| 首页视频小说图片口味搜索| 男女午夜视频在线观看| 免费不卡黄色视频| 国产精品综合久久久久久久免费 | 国产成人一区二区三区免费视频网站| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产精品 国内视频| 国产精品久久久久成人av| 久久久水蜜桃国产精品网| 国产精品永久免费网站| www.熟女人妻精品国产| 亚洲国产精品999在线| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 三上悠亚av全集在线观看| 久久精品亚洲av国产电影网| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 中文字幕高清在线视频| 五月开心婷婷网| 国产成人av激情在线播放| 国产又色又爽无遮挡免费看| 国产区一区二久久| 欧美日本亚洲视频在线播放| 老司机午夜十八禁免费视频| 婷婷精品国产亚洲av在线| 成人黄色视频免费在线看| 女同久久另类99精品国产91| 日韩大码丰满熟妇| 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲性夜色夜夜综合| 欧美大码av| 亚洲欧美日韩无卡精品| 夜夜夜夜夜久久久久| 97碰自拍视频| 欧美日韩福利视频一区二区| 亚洲成人久久性| 亚洲人成电影观看| 一区二区三区激情视频| 成年人黄色毛片网站| 一级a爱视频在线免费观看| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 一级毛片高清免费大全| 国产一区二区激情短视频| 成人18禁在线播放| 久久天堂一区二区三区四区| www.精华液| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 欧美黄色淫秽网站| 国产精品久久久av美女十八| 精品日产1卡2卡| 国产成人系列免费观看| 精品日产1卡2卡| 丁香欧美五月| 成人国语在线视频| 精品久久久久久,| 精品久久久久久电影网| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 国产精品秋霞免费鲁丝片| 不卡一级毛片| 高清毛片免费观看视频网站 | 最近最新中文字幕大全免费视频| 欧美激情久久久久久爽电影 | 欧美成人免费av一区二区三区| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 一进一出抽搐动态| 99国产极品粉嫩在线观看| 99热国产这里只有精品6| 欧美亚洲日本最大视频资源| 欧美日韩一级在线毛片| 三上悠亚av全集在线观看| 久久香蕉激情| 成人国产一区最新在线观看| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 亚洲 国产 在线| 久久香蕉激情| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 精品国产一区二区久久| 91成人精品电影| 国产97色在线日韩免费| 日本欧美视频一区| 亚洲精品国产一区二区精华液| 一级a爱片免费观看的视频| 久久草成人影院| 国产又爽黄色视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 无遮挡黄片免费观看| 在线av久久热| av在线播放免费不卡| 欧美一级毛片孕妇| 一a级毛片在线观看| 美女扒开内裤让男人捅视频| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 久久伊人香网站| 他把我摸到了高潮在线观看| 久久久久久久久免费视频了| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 一级毛片精品| 91成年电影在线观看| 精品国产国语对白av| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 国产精品久久久久成人av| 精品免费久久久久久久清纯| 97人妻天天添夜夜摸| 麻豆av在线久日| 亚洲欧美激情在线| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 纯流量卡能插随身wifi吗| 午夜精品久久久久久毛片777| 午夜精品国产一区二区电影| 麻豆国产av国片精品| 亚洲欧美激情在线| 午夜精品久久久久久毛片777| 三上悠亚av全集在线观看| 三级毛片av免费| 国产av在哪里看| 国产单亲对白刺激| av欧美777| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 99热只有精品国产| 国产1区2区3区精品| 亚洲人成77777在线视频| av电影中文网址| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 免费高清在线观看日韩| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 精品福利永久在线观看| 成人特级黄色片久久久久久久| 久久精品亚洲av国产电影网| 亚洲专区中文字幕在线| 国产精品亚洲av一区麻豆| 欧美在线黄色| 国产精品一区二区在线不卡| 日韩三级视频一区二区三区| 国产熟女xx| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 日韩国内少妇激情av| 高清黄色对白视频在线免费看| 欧美精品亚洲一区二区| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲精品在线观看二区| 国产亚洲欧美精品永久| 黄片小视频在线播放| 亚洲色图综合在线观看| 91成年电影在线观看| 中文字幕精品免费在线观看视频| a级毛片在线看网站| 国产亚洲av高清不卡| 欧美日韩视频精品一区| 久久久久亚洲av毛片大全| 亚洲免费av在线视频| 在线观看一区二区三区激情| 黑人猛操日本美女一级片| 午夜免费观看网址| 黄色毛片三级朝国网站| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 国产精品98久久久久久宅男小说| tocl精华| 国产亚洲精品第一综合不卡| 国产精品 欧美亚洲| 18禁国产床啪视频网站| 窝窝影院91人妻| 99国产综合亚洲精品| av电影中文网址| av网站免费在线观看视频| 午夜激情av网站| 国产黄a三级三级三级人| 淫妇啪啪啪对白视频| 美女高潮到喷水免费观看| 一级毛片高清免费大全| 性色av乱码一区二区三区2| 日韩国内少妇激情av| 亚洲av熟女| 黄色成人免费大全| av福利片在线| 天天影视国产精品| 国产高清国产精品国产三级| 黄色视频不卡| 无限看片的www在线观看| 日本a在线网址| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 制服诱惑二区| 色在线成人网| 男女高潮啪啪啪动态图| 欧美日本中文国产一区发布| 又黄又粗又硬又大视频| 高清毛片免费观看视频网站 | a在线观看视频网站| 丝袜在线中文字幕| 欧美中文日本在线观看视频| 亚洲成人国产一区在线观看| 亚洲av片天天在线观看| 老鸭窝网址在线观看| 精品国产亚洲在线| x7x7x7水蜜桃| 精品人妻在线不人妻| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 18美女黄网站色大片免费观看| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 狂野欧美激情性xxxx| 亚洲激情在线av| 日日夜夜操网爽| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 热re99久久国产66热| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产亚洲av高清不卡| 三级毛片av免费| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 一级毛片女人18水好多| 亚洲av电影在线进入| 亚洲色图av天堂| 久9热在线精品视频| 亚洲欧美日韩无卡精品| 黑人欧美特级aaaaaa片| 丝袜美腿诱惑在线| 亚洲三区欧美一区| 国产亚洲欧美98| 国产欧美日韩一区二区三| 美女福利国产在线| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 91麻豆av在线| 久久精品国产清高在天天线| 午夜91福利影院| 夜夜爽天天搞| 久久人人97超碰香蕉20202| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲av成人av| 一本大道久久a久久精品| 亚洲人成电影观看| 成人av一区二区三区在线看| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产精品一区二区三区四区久久 | 精品午夜福利视频在线观看一区| 99国产精品免费福利视频| 亚洲专区字幕在线| 高清毛片免费观看视频网站 | 欧美日韩一级在线毛片| 在线观看一区二区三区| 国产99久久九九免费精品| 午夜亚洲福利在线播放| 色哟哟哟哟哟哟| 成人国语在线视频| 国产精品二区激情视频| 一本大道久久a久久精品| 在线观看免费日韩欧美大片| 无遮挡黄片免费观看| 国产精品一区二区免费欧美| 黄频高清免费视频| 国产成人欧美| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 久久久水蜜桃国产精品网| 又黄又爽又免费观看的视频| 久99久视频精品免费| av欧美777| 一级毛片高清免费大全| 亚洲一区二区三区欧美精品| 午夜免费成人在线视频| 久久久久精品国产欧美久久久| videosex国产| 国产视频一区二区在线看| 日本wwww免费看| 国产av一区二区精品久久| 色播在线永久视频| 视频在线观看一区二区三区| 新久久久久国产一级毛片| 亚洲精品国产色婷婷电影| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲三区欧美一区| 中文字幕色久视频| 成年人免费黄色播放视频| 亚洲色图av天堂| 日本wwww免费看| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 日韩高清综合在线| 久久人人精品亚洲av| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 亚洲av熟女| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产av精品麻豆| 热re99久久精品国产66热6| 大码成人一级视频| av有码第一页| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| e午夜精品久久久久久久| 国产成年人精品一区二区 | 成年人黄色毛片网站| 国产xxxxx性猛交| 真人做人爱边吃奶动态| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 亚洲人成电影免费在线| 一区二区日韩欧美中文字幕| 韩国av一区二区三区四区| 午夜精品在线福利| 国产又色又爽无遮挡免费看| 国产成人精品久久二区二区免费| 男人的好看免费观看在线视频 | 国产精品一区二区在线不卡| 中文字幕人妻丝袜制服| 久久久久久人人人人人| 午夜成年电影在线免费观看| av在线天堂中文字幕 | 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产深夜福利视频在线观看| 成人影院久久| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 这个男人来自地球电影免费观看| 亚洲成人免费av在线播放| 脱女人内裤的视频| 久久亚洲真实| 婷婷精品国产亚洲av在线| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 男女下面插进去视频免费观看| 波多野结衣高清无吗| 精品一区二区三区av网在线观看| 欧美成人性av电影在线观看| 日韩免费av在线播放| 久久影院123| 精品免费久久久久久久清纯| 亚洲 国产 在线| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 满18在线观看网站| 99国产极品粉嫩在线观看| 日韩大尺度精品在线看网址 | 国产精品一区二区在线不卡| 日本a在线网址|