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    重癥腺病毒肺炎患兒T細(xì)胞亞群變化及其臨床意義的研究

    2018-09-10 11:47:58鄭麗麗許航燕應(yīng)旦紅
    浙江醫(yī)學(xué) 2018年15期
    關(guān)鍵詞:腺病毒亞群比值

    鄭麗麗 許航燕 應(yīng)旦紅

    肺炎是兒童常見病,也是發(fā)展中國家5歲以內(nèi)兒童疾病死因之首[1-2]?;純耗挲g越小其自身免疫功能越低,所以重癥肺炎多見于未滿1歲的嬰兒[3]。腺病毒(Adenovirus,Adv)是導(dǎo)致嬰幼兒致死性肺炎的主要病原之一,它是一種DNA病毒,在1953年由Rowe等[4]首次從人腺樣體細(xì)胞分離到。已知人Adv有42個(gè)血清型,命名為腺病毒H1~H42,其中H7和H3二型是引起腺病毒性肺炎的主要病原體,所引起的肺炎常較嚴(yán)重,可以致死[5]。關(guān)于腺病毒性肺炎的免疫損害機(jī)制、重癥時(shí)機(jī)體細(xì)胞免疫功能異常的研究國內(nèi)外均較少。本研究通過測

    定腺病毒性肺炎患兒的T細(xì)胞亞群CD3、CD4、CD8、CD4/CD8比值,分析重癥與非重癥患兒以及重癥患兒中急性期與恢復(fù)期上述指標(biāo)的變化,希望能有助于早期識(shí)別重癥肺炎,及時(shí)干預(yù),減輕疾病對(duì)人體的損害,避免嚴(yán)重的并發(fā)癥及后遺癥。

    1 對(duì)象和方法

    1.1 對(duì)象 選取2013年12月至2017年12月我院按照《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》急性支氣管肺炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)并進(jìn)行咽拭子熒光PCR檢測Adv核酸陽性者、診斷為肺炎的60例住院患兒作為觀察對(duì)象。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)伴有支氣管哮喘、肺結(jié)核等其他呼吸系統(tǒng)疾病;(2)伴有免疫系統(tǒng)疾病;(3)近期服用過糖皮質(zhì)激素或者免疫抑制劑、抗生素等;(4)營養(yǎng)不良。其中重癥肺炎32例(符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》7版重癥肺炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]:嚴(yán)重的缺氧及毒血癥,有呼吸衰竭,或發(fā)生心血管、神經(jīng)和消化等系統(tǒng)功能障礙),男18例,女14例,年齡2個(gè)月~12歲,平均(25.1±17.6)個(gè)月;非重癥肺炎 28例,男13例,女 15例,年齡 1個(gè)月~9歲,平均(27.2±11.5)個(gè)月。兩組患兒性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P >0.05)。

    1.2 方法 兩組患兒均于入院時(shí)抽取靜脈血2ml送檢測定血清T細(xì)胞亞群水平,重癥肺炎組再于恢復(fù)期(住院治療1周)進(jìn)行第2次檢查;同時(shí)行胸部X線、腹部B超、心電圖等檢查。兩組患兒的治療按照支氣管肺炎臨床路徑設(shè)定處理,重癥肺炎患兒供氧,部分予糖皮質(zhì)激素治療。兩組患兒均未使用丙種球蛋白,無死亡病例。

    1.3 T細(xì)胞亞群檢測 采用流式細(xì)胞術(shù)測定,使用美國BD公司提供的MultiTEST試劑盒,嚴(yán)格按照要求進(jìn)行操作。將100μl抗凝血加20μl熒光單克隆抗體,同時(shí)作陰性對(duì)照。避光室溫作用20min,溶去紅細(xì)胞后,固定劑固定。通過MultiSET軟件分析得到上流式細(xì)胞儀測定,以陰性對(duì)照測出本底參數(shù),調(diào)節(jié)熒光補(bǔ)償,設(shè)定陽性參數(shù)值,軟件將計(jì)算出陽性表達(dá)細(xì)胞比例,從而得出CD3、CD4、CD8各淋巴細(xì)胞亞群比例及計(jì)算出CD4/CD8比值。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)量資料用表示,組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),組內(nèi)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 兩組患兒T細(xì)胞亞群水平的比較 重癥肺炎組CD3、CD4、CD8及CD4/CD8比值均低于非重癥肺炎組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或0.01),見表1。

    表1 兩組患兒T細(xì)胞亞群水平的比較

    2.2 重癥肺炎患兒急性期與恢復(fù)期T細(xì)胞亞群水平的比較 重癥肺炎患兒恢復(fù)期 CD3、CD4、CD8及 CD4/CD8比值均高于急性期,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或 0.01),見表 2。

    3 討論

    AdV為DNA病毒,在感染機(jī)體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的周期中,可引起細(xì)胞的溶解和死亡。在引起壞死的過程中,中性粒細(xì)胞、炎性介質(zhì)也起著重要作用[6]。當(dāng)AdV感染機(jī)體時(shí),首先會(huì)激發(fā)炎癥反應(yīng),這是人體進(jìn)行抵御的首要反應(yīng),會(huì)引起細(xì)胞因子和淋巴細(xì)胞亞群發(fā)生紊亂,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致全身炎癥反應(yīng)綜合征[7]。

    表2 重癥肺炎患兒急性期與恢復(fù)期T細(xì)胞亞群水平的比較

    T淋巴細(xì)胞來源于骨髓,在胸腺內(nèi)分化發(fā)育成熟后,移行至外周淋巴組織的T細(xì)胞區(qū),執(zhí)行特異性免疫應(yīng)答,參與機(jī)體中重要的細(xì)胞免疫功能。CD4是協(xié)助發(fā)揮免疫功能的細(xì)胞,CD3為成熟的T細(xì)胞,CD8則是免疫抑制細(xì)胞,而CD4/CD8的比值則是綜合反映了機(jī)體整體的免疫狀態(tài)。當(dāng)機(jī)體受感染時(shí),淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量或功能發(fā)生改變,機(jī)體就會(huì)出現(xiàn)免疫功能紊亂,從而引起疾病的發(fā)生與發(fā)展。當(dāng)CD3、CD4 T淋巴細(xì)胞受刺激后,大量增值分化成Th1、Th2淋巴細(xì)胞,具有廣泛的免疫應(yīng)答正調(diào)節(jié)作用,反映機(jī)體免疫調(diào)控情況[8]。Th1介導(dǎo)細(xì)胞免疫過程,Th2參與體液免疫過程。CD3、CD8 T淋巴細(xì)胞為抑制/殺傷性T淋巴細(xì)胞,多表達(dá)在Ts淋巴細(xì)胞和細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(Tc細(xì)胞)上,Ts淋巴細(xì)胞對(duì)免疫應(yīng)答起負(fù)調(diào)節(jié)作用,具有抑制機(jī)體免疫應(yīng)答或細(xì)胞毒的功能。正常情況下CD4 T淋巴細(xì)胞與CD8 T淋巴細(xì)胞相互制約,產(chǎn)生適度的免疫應(yīng)答,既能清除異物,又不損傷機(jī)體自身組織,使機(jī)體免疫功能處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)[9]。

    本研究發(fā)現(xiàn),腺病毒肺炎重癥組患兒外周血CD3 T淋巴細(xì)胞、CD4輔助性T細(xì)胞和CD8 T淋巴細(xì)胞的比例較非重癥時(shí)降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示AdV感染患兒機(jī)體的細(xì)胞免疫功能下降,與既往相關(guān)研究結(jié)論相符[10-12]。CD4/CD8的比值是反應(yīng)輔助性T細(xì)胞與抑制性T細(xì)胞之間平衡的重要指標(biāo),正常情況下,兩者互相制約達(dá)到平衡。本研究中AdV感染時(shí)重癥組較非重癥組患兒外周血CD4/CD8的比值均顯著降低,提示AdV感染后機(jī)體存在細(xì)胞免疫功能的紊亂。在恢復(fù)期外周血CD3 T淋巴細(xì)胞、CD4/CD8 T淋巴細(xì)胞的比例較急性期有明顯回升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示免疫紊亂重新達(dá)到平衡。

    綜上所述,AdV所致重癥肺炎發(fā)生時(shí),患兒外周血CD3 T淋巴細(xì)胞、CD4輔助性T細(xì)胞、CD8 T淋巴細(xì)胞的比例及CD4/CD8的比值均降低,提示AdV感染患兒機(jī)體的細(xì)胞免疫功能下降,經(jīng)治療后,恢復(fù)期這些指標(biāo)不同程度回升,提示檢測這些指標(biāo),可能有利于重癥肺炎的治療效果判斷,為腺病毒肺炎的嚴(yán)重程度和療效判斷提供客觀監(jiān)測依據(jù)。

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