紅棕油對蛋雞產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)及蛋黃著色效果的影響

董淑楠， 朱航櫸，2， 周海騰， 王少康， 孫桂菊*

（1.東南大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)系/環(huán)境醫(yī)學(xué)工程教育部重點實驗室，江蘇南京 210009；2.江蘇省腫瘤醫(yī)院，江蘇南京 210009；3.大馬棕櫚油技術(shù)研發(fā)（上海）有限公司，上海 201108）

蛋黃色澤是衡量蛋品質(zhì)的重要指標(biāo)之一，是消費者主觀評價蛋品質(zhì)優(yōu)劣的一項指標(biāo)（Fletcher，1999）。消費者普遍喜歡蛋黃顏色偏深的禽蛋（Karadas等，2006），多偏好金黃色或橙紅色的蛋黃。國內(nèi)外大量研究表明，蛋黃顏色與家禽飼料密切相關(guān)，其中類胡蘿卜素起著關(guān)鍵作用（Brulc等，2013；Hammershoj等，2010；Handelman 等，1999）。類胡蘿卜素不僅可以改善蛋黃顏色，還具有維持機(jī)體健康的作用，類胡蘿卜素具有抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、 抗癌等功效 （Vieira等，2016；Leoncini等，2015；Soares Nda 等，2015），同時部分類胡蘿卜素是維生素A的前體，可以在體內(nèi)轉(zhuǎn)換成維生素A（Islam 和 Schweigert，2015）。

紅棕油（RPO）由棕櫚果肉經(jīng)過壓榨得到，因其中含有豐富的類胡蘿卜素而呈紅色或者橙紅色，RPO大約含有500 mg/kg胡蘿卜素 （主要是α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素）和800 mg/kg維生素E （α-生育三烯酚，β-生育三烯酚和δ-生育三烯酚 ） （Mba 等 ，2015；Manorama，2014；Nagendran等，2000），除此之外，RPO中還含有輔酶Q和植物甾醇 （Nagendran等，2000）。RPO主要含棕櫚酸、油酸和亞油酸，飽和脂肪酸含量約為50%、單不飽和脂肪酸含量約為40%、多不飽和脂肪酸含量約為10%，其中單不飽和脂肪酸主要為油酸，多不飽和脂肪酸主要為亞油酸（馬舒舒，2015）。

早在20世紀(jì)30年代和40年代就已經(jīng)開始通過膳食干預(yù)來研究RPO對人群維生素A缺乏癥的預(yù) 防 和治療 （Raymond，1941；Aykroyd 等 ，1937）。但是，將RPO替代大豆油做成家禽飼糧卻鮮有報道。有動物試驗表明在飼糧中添加棕櫚油和RPO對雞肉的營養(yǎng)價值和脂肪酸的組成沒有負(fù)面影響，且RPO降低了雞血漿中的總膽固醇含量（Nyquist等，2013）。本試驗在蛋雞飼料中添加RPO，研究RPO對蛋雞產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)以及蛋黃著色效果的影響，評價RPO在改善蛋黃色澤方面的作用，以期為RPO在產(chǎn)蛋雞飼糧中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料與試劑 RPO由大馬棕櫚油技術(shù)研發(fā)（上海）有限公司（MPOB）提供，酸價，KOH 17.44 mg/g； 過氧化價，10.25 meq/kg； 碘價，53.7 gI2/100 g；熔點，40.7 ℃；維生素 E，2598.6 mg/kg；類胡蘿卜素，1257.3 mg/kg。

總膽固醇和甘油三酯測定試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 試驗設(shè)計及飼糧 選取產(chǎn)蛋率、體重相近，健康狀態(tài)良好的50周齡海蘭褐蛋雞80羽，隨機(jī)分為4組，每組5個重復(fù)，每個重復(fù)4羽雞。為使各組日糧的能值相同，并使RPO的添加量分別達(dá)到試驗要求，本試驗采用重量替代法，在各組的日糧中，用同樣重量的大豆油來替代等量的RPO，以使各組日糧的RPO添加量達(dá)到1%、2%、3%，具體添加量如下：

基礎(chǔ)飼糧：養(yǎng)殖場自產(chǎn)飼糧 （不額外添加油脂），用于配制試驗組用飼糧；

對照組（CG）：基礎(chǔ)飼糧+3%大豆油；

1% 紅棕油組（1%RPOG）：基礎(chǔ)飼糧+2%大豆油+1%RPO；

2% 紅棕油組（2%RPOG）：基礎(chǔ)飼糧+1%大豆油+2%RPO；

3% 紅棕油組（3%RPOG）：基礎(chǔ)飼糧+0%大豆油+3%RPO。

試驗期為10周，其中預(yù)試期2周，飼喂對照組飼糧。正式期8周，分別飼喂上述各組飼糧。

參照 NRC（1994）和我國《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 33-2004）配制玉米-豆粕型粉狀基礎(chǔ)飼糧，飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 測定指標(biāo)及方法

1.3.1 生產(chǎn)性能指標(biāo) 從正式試驗第1天開始，每天以重復(fù)為單位，記錄產(chǎn)蛋總數(shù)、總蛋重、采食量。每周末定時結(jié)料、稱重，記錄飼糧消耗量，所有飼糧用冰箱冷藏保存。根據(jù)采集的數(shù)據(jù)，以組為單位計算平均日采食量、料蛋比、產(chǎn)蛋率和平均蛋重。

蛋雞產(chǎn)蛋率、平均日采食量、料蛋比計算公式如下：

產(chǎn)蛋率/%＝統(tǒng)計期內(nèi)總產(chǎn)蛋數(shù)/（總雞數(shù)×統(tǒng)計期天數(shù)）×100；

采食量＝（日投料量-剩余料量）/雞數(shù)；

料蛋比/%＝統(tǒng)計期內(nèi)總耗料量/統(tǒng)計期內(nèi)總蛋重×100。

1.3.2 蛋品質(zhì) 在試驗期第1天和第56天，每個重復(fù)取2枚蛋，每組共取10枚蛋。先將蛋洗凈，擦干水分，稱取蛋的總重量，然后將蛋打入EMT-5200多功能蛋品分析儀的分析盤中測量蛋黃顏色、蛋白高度、哈氏單位等蛋品質(zhì)指標(biāo)，然后把蛋倒入分蛋器中，棄去蛋清，將蛋黃倒入一次性培養(yǎng)皿內(nèi)，不破壞卵黃膜，之后用鑷子幫助分離蛋殼上殘留的蛋清，用濾紙吸干蛋殼。分別使用分析天平稱量稱取蛋殼重和蛋黃重，精確至0.01g，蛋清重為蛋重減去蛋黃重和蛋殼重；蛋黃比例表示為（蛋黃重/全蛋重）×100%，即蛋黃占整個蛋重的百分比（劉璐等，2014）。蛋白比例表示為（蛋白重/全蛋重）×100%，即蛋白占整個蛋重的百分比。

1.3.3 樣品中類胡蘿卜素含量檢測 取適量樣品（蛋黃取 3 g，飼料取 3 g，RPO 取 1 g），以石油醚-丙酮（2∶l，V/V）為溶劑，室溫，料液比為 1∶5（m/V），浸提時間為60 min，提取3次，合并提取液，過濾，將其定容于50 mL的容量瓶中，在450 nm波長處用紫外分光光度計測定吸光度值，以β-胡蘿卜素作標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算蛋黃中總類胡蘿卜素含量。將上述蛋黃色素提取液用有機(jī)濾膜過濾，進(jìn)HPLC檢測。

表1 對照組飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

分別稱取1 mg葉黃素，用二氯甲烷溶解，分別配置成 1、3、4、6、10、20 μg/mL 和 30 μg/mL；1 mg玉米黃素，用二氯甲烷溶解，分別配置成1、2、3、4、5、10、15、20 μg/mL 和 50 μg/mL；1.08 mg β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品，用二氯甲烷溶解，分別配置成2.16、3.24、5.4、10.8、21.6、32.4、54 μg/mL 和108 μg/mL，0.22μm有機(jī)膜過濾，HPLC檢測，以濃度和峰面積做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

分別取上述各類胡蘿卜素溶液100μg/mL葉黃素 1 mL、100μg/mL玉米黃素 1 mL、600μg/mL β-胡蘿卜素1 mL于棕色容量瓶中，定容至10 mL，混合均勻，0.22μm有機(jī)膜過濾，上機(jī)檢測。

HPLC檢測條件，色譜柱：YMCTM Carotenoid色譜柱 （250 mm×4.6 mm，5μm），柱溫，20 ℃；檢測波長，450 nm；流動相 A 甲醇：乙腈＝25：75；流動相B甲基叔丁基醚；流動相C水，波長450 nm，進(jìn)樣量20μL，流速為1 mL/min，梯度洗脫為 0～15 min：A 98% ～ 70%，B 0～ 28%，C 2%；15 ～20 min：A 70% ～18%，B 28% ～80%，C 2%；20～22 min：A 18% ，B 80% ，C 2% ；22 ～ 23 min：A 18% ～0，B 80% ～100%，C 2% ～ 0；23～ 25 min：A 0～98%，B 100% ～0，C 0～2%。

1.4 統(tǒng)計分析 結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。試驗數(shù)據(jù)組間差異采用SPSS 19.0軟件中的oneway ANOVA進(jìn)行方差分析，差異顯著者采用SN-K法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 RPO和飼料中類胡蘿卜素的含量 各組飼料和RPO中類胡蘿卜素含量見表2。各RPO組飼料中的總類胡蘿卜素含量明顯高于對照組飼料（增長率為195% ～612%），RPO中的類胡蘿卜素主要為β-胡蘿卜素，含有少量的葉黃素，因此隨著RPO含量的增加，各組飼料中類胡蘿卜素含量也有所增加。

2.2 RPO對蛋雞生產(chǎn)性能的影響 各試驗組蛋雞生產(chǎn)性能見表3。RPO干預(yù)前各組產(chǎn)蛋率、平均日采食量、料蛋比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。RPO干預(yù)8周后RPO組料蛋比和采食量與對照組相比無差異（P＞0.05），但是3%RPO組蛋雞的產(chǎn)蛋率較1%RPO組的產(chǎn)蛋率降低4.77%（P ＜ 0.05）。

2.3 RPO對蛋品質(zhì)的影響 由表4可知，RPO干預(yù)前各組蛋重、蛋白高度、蛋黃顏色、哈氏單位、蛋黃比例、蛋白比例差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

RPO干預(yù)8周后，蛋黃比例、蛋白比例、蛋白高度差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），而蛋黃顏色和哈氏單位這兩項指標(biāo)則差異顯著（P＜0.05）。其中蛋黃顏色隨著飼糧中RPO比例的增加而加深，呈劑量依賴性。3%RPO組蛋黃顏色最深，比對照組蛋黃顏色增加了兩個等級。哈氏單位隨著飼糧中RPO的增加呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢，與對照組相比，1%RPO組的哈氏單位顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），而2%、3%RPO組的哈氏單位雖然高于對照組，但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞ 0.05）。

表2 RPO和各組飼料中類胡蘿卜素含量μg/g yolk

表3 紅棕油干預(yù)前后對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

表4 紅棕油干預(yù)前后對各組蛋品質(zhì)的影響

2.4 RPO對蛋黃類胡蘿卜素含量的影響 由表5可知，RPO干預(yù)前各組蛋黃中葉黃素、玉米黃素、β-胡蘿卜素和總類胡羅卜素含量無差異（P>0.05）。

經(jīng)過8周干預(yù)，RPO組蛋黃葉黃素和玉米黃素水平高于對照組（P<0.05），并且隨著RPO含量的增加，蛋黃中葉黃素和玉米黃素含量也增加（P<0.05）（分別較對照組提高18% ～60%、23% ～84%）。與對照組相比，1%RPO組蛋黃β-胡蘿卜素含量與對照組無差異 （P>0.05），2%、3%RPO組蛋黃β-胡蘿卜素含量高于對照組 （P<0.05），較對照組提高1.7%～2.2%。經(jīng)過8周干預(yù)，RPO組蛋黃總類胡蘿卜素水平高于對照組 （P<0.05），其中隨著RPO含量的增加，蛋黃中總類胡蘿卜素含量也增加 （P<0.05），3%RPO組蛋黃總類胡蘿卜素含量達(dá)到最大，是對照組蛋黃總類胡蘿卜素含量的1.95倍。

3 討論

3.1 RPO對蛋雞生產(chǎn)性能的影響 RPO干預(yù)8周后RPO組料蛋比和采食量與對照組相比無差異（P>0.05），但是3%RPO組蛋雞的產(chǎn)蛋率明顯低于1%RPO組的產(chǎn)蛋率（P<0.05），提示與大豆油相比，短期飼喂RPO對產(chǎn)蛋雞的生產(chǎn)性能無影響（P>0.05），但是與低劑量RPO的干預(yù)效果相比，高劑量RPO可降低蛋雞的產(chǎn)蛋率（P<0.05）。這可能是因為RPO本身具有一種特殊的氣味和顏色，低劑量添加在飼料中時氣味和顏色改變不明顯，反而增加了飼料中的類胡蘿卜素和維生素E等營養(yǎng)素的含量，從而提高了產(chǎn)蛋率，當(dāng)添加比例增大時會明顯改變飼糧的氣味和顏色，從而影響產(chǎn)蛋雞對飼料的采食和消化利用，也可能是因為RPO與大豆油相比脂肪酸種類和含量不同，從而影響了蛋雞的產(chǎn)蛋率。

3.2 RPO對蛋品質(zhì)和蛋黃類胡蘿卜素含量的影響 哈氏單位和蛋白高度是評價蛋新鮮程度的指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)，各試驗組蛋白高度、哈氏單位和蛋黃顏色與對照組相比，在數(shù)值上均呈現(xiàn)出增高的趨勢，其中1%RPO組的哈氏單位以及1%、2%和3%RPO組的蛋黃顏色顯著高于對照組（P<0.05）。哈氏單位的大小與蛋白高度呈正相關(guān)，蛋白的分泌主要在輸卵管膨大部，分泌腺依次分泌內(nèi)稀蛋白、濃蛋白和外稀蛋白包裹在卵黃外（盧建等，2013）。由于分泌部細(xì)胞需要攝取大量養(yǎng)分來供給蛋白的分泌，因此，飼糧中的油脂代謝產(chǎn)物很可能能夠到達(dá)分泌部，說明RPO對分泌部細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)及分泌功能是有益的。

消費者普遍喜歡蛋黃顏色紅亮的禽蛋（蛋黃顏色在 10 級左右）（Kijparkorn 等，2010），而規(guī)?；B(yǎng)殖的禽蛋蛋黃顏色等級則通常在7左右。有研究表明蛋禽本身不能合成色素，蛋黃的顏色與飼糧中的類胡蘿卜素和其他色素的數(shù)量和種類有關(guān)（沈曼曼和王瑩，2014；Brulc 等，2013；劉曉輝等，2009），主要是親脂性的含氧類胡蘿卜素（張巍等，2015）和核黃素（石天虹等，2010）。這些色素溶于卵黃中的脂肪小滴中，因此蛋黃的顏色主要取決于類胡蘿卜素含量的多少 （趙國剛，2008）。本試驗結(jié)果表明在日糧中添加RPO能顯著提高蛋黃的顏色，且隨著日糧中RPO添加量的增加呈顯著上升趨勢，3%RPO組蛋黃顏色與對照組蛋黃顏色相比增加了兩個等級。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，RPO可以顯著提高蛋黃中葉黃素、玉米黃素和總類胡蘿卜素的含量（P<0.05），并且隨著RPO含量的增加而增加；在飼料中分別添加2%和3%RPO可以提高蛋黃中β-胡蘿卜素的水平 （P<0.05）。本研究結(jié)果提示RPO中的類胡蘿卜素可以被蛋雞有效的吸收并轉(zhuǎn)化沉積到蛋黃中，改善蛋黃顏色，且RPO中的脂肪酸可以促進(jìn)RPO和飼糧中的類胡蘿卜素和核黃素的吸收。

表5 紅棕油對蛋黃各類胡蘿卜素和總類胡蘿卜素含量的影響 μg/g蛋黃

4 結(jié)論

油脂是蛋雞生長過程中的重要營養(yǎng)物質(zhì)，在飼糧中添加油脂可以促進(jìn)蛋雞對脂溶性營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，并具有調(diào)節(jié)免疫機(jī)能的作用（岳洪源，2011）。從本試驗結(jié)果可以得出：（1）RPO對產(chǎn)蛋率、料蛋比和采食量無影響，而3%RPO則會降低產(chǎn)蛋率；（2）1%RPO組的哈氏單位以及 1%、2%和3%RPO組的蛋黃顏色顯著高于對照組；（3）RPO可以顯著提高蛋黃中葉黃素、玉米黃素、β-胡蘿卜素以及總類胡蘿卜的含量，且飼料中添加2%的RPO較為合適。