血清FFA、GP73水平變化與慢性乙型肝炎患者病情程度的關(guān)聯(lián)性及臨床意義探討*

林 召 黨小軍 侯智輝 劉發(fā)全

(1. 東莞市大嶺山醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 東莞 523820； 2. 陜西省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西 西安 710068；3. 深圳市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 深圳 518033)

慢性乙型肝炎(CHB)為常見慢性傳染性疾病，其治療主要為對(duì)癥治療和抗病毒治療，臨床常用谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)等生化指標(biāo)以及肝組織穿刺活檢是評(píng)價(jià)患者病情和指導(dǎo)用藥，但肝功能生化指標(biāo)診斷CHB無法準(zhǔn)確反映肝臟損傷情況，也難以區(qū)別其他原因所致慢性肝炎；而肝組織穿刺活檢則具有創(chuàng)傷性，操作時(shí)風(fēng)險(xiǎn)較大且患者耐受性差，不利重復(fù)展開，故臨床急需一項(xiàng)準(zhǔn)確性和重復(fù)性較好的CHB評(píng)估指標(biāo)[1-2]。近年來研究發(fā)現(xiàn)，血清游離脂肪酸(FFA)和高爾基體蛋白73(GP73)在各種急、慢性肝臟病變中表達(dá)水平較高，且隨患者病情進(jìn)展變化明顯，在肝組織不同程度病理分級(jí)的患者中差異顯著[3-4]。本研究主要研究血清FFA、GP73水平變化與慢性乙型肝炎患者病情程度的關(guān)聯(lián)性及臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2013年8月—2017年8月我院和陜西省人民醫(yī)院CHB患者172例，其中男性126例，女性46例，年齡21～73歲，平均(54.29±8.73)歲，根據(jù)《慢性乙型肝炎防治指南(2015)》中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，按患者肝組織損傷程度，將所選病例分為輕度(63例)、中度(71例)和重度(38例)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所選病例均符合CHB以及HBV-C診斷標(biāo)準(zhǔn)；②血清HBV DNA>1.0x103copies/ml；③經(jīng)影像學(xué)檢查、血生化檢查以及肝組織活檢確診；④年齡18～80歲；⑤患者知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并感染其他類型肝炎病毒者；②合并其他原因所致肝組織損傷者；③合并其他嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病者；④妊娠或哺乳期女性；⑤此前6個(gè)月曾服用干擾素等免疫調(diào)節(jié)藥物者。

另選我院同期健康體檢者50例，男34例，女16例，年齡19～71歲，平均(52.74±9.05)歲；HBV攜帶者(HBV-C)50例，男性33例，女性17例，年齡22～70歲，平均(53.62±9.41)歲。

1.2檢測(cè)方法 分別于上午8點(diǎn)取受試者空腹外周靜脈血3 ml×2管，其中一管加入抗凝劑，室溫放置1 h后離心后取上清冷凍保存，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清GP73水平，所用酶標(biāo)儀為伯樂860型(美國(guó)BIO-RAD公司生產(chǎn))，試劑盒來自北京熱景生物技術(shù)有限公司；另一管室溫放置20 min后離心取上清，采用全自動(dòng)生化儀檢測(cè)血清ALT、AST、FFA水平，所用儀器為貝克曼AU680全自動(dòng)生化儀，試劑由寧波美康提供。

2 結(jié) 果

2.1各組ALT、AST、FFA和GP73水平比較 分析發(fā)現(xiàn)，CHB患者ALT、AST、FFA和GP73水平均明顯高于健康人群(P<0.05)，隨著病情加重，各項(xiàng)指標(biāo)變化明顯，各組之間差異顯著(P<0.05)。

表1 各組ALT、AST、FFA和GP73水平比較

注：a表示與健康者相比，P<0.05；b表示與HBV-C相比，P<0.05；c表示與輕度CHB相比，P<0.05；d表示與中度CHB相比，P<0.05。

2.2不同炎癥程度CHB患者FFA和GP73水平分析 FFA、GP73水平隨CHB患者炎癥活動(dòng)程度增高而升高，各分級(jí)之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；相關(guān)性分析結(jié)果顯示，CHB患者炎癥活動(dòng)分級(jí)與FFA(r=0.729，P<0.05)和GP73(r=0.743，P<0.05)均呈顯著正相關(guān)。

表2 不同炎癥程度CHB患者FFA和GP73水平分析

注：a表示與G1相比，P<0.05；b表示與G2相比，P<0.05；c表示與G3相比，P<0.05。

2.3不同肝纖維化分期CHB患者FFA和GP73水平分析 血清FFA、GP73水平隨CHB患者肝纖維化分期增加而升高，各分期之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；相關(guān)性分析結(jié)果顯示，CHB患者肝纖維化分期與FFA(r=0.695，P<0.05)和GP73(r=0.704，P<0.05)均呈顯著正相關(guān)。

表3 不同肝纖維化分期CHB患者FFA和GP73水平分析

注：a表示與G1相比，P<0.05；b表示與G2相比，P<0.05；c表示與G3相比，P<0.05。

3 討 論

FFA又稱為非酯化脂肪酸，主要由脂肪組織中性脂肪分解而來，生理情況下多見于肝糖原耗盡時(shí)，是參與機(jī)體能量代謝的重要物質(zhì)[6]。FFA主要與白蛋白結(jié)合而進(jìn)行運(yùn)輸，在肝臟氧化分解從而維持動(dòng)態(tài)平衡，因此肝臟病變導(dǎo)致其對(duì)FFA氧化和酯化減少，可引起血液中FFA濃度明顯升高[7]。楊蕊旭等[8]研究發(fā)現(xiàn)，CHB患者血清FFA水平明顯高于健康人群，且隨病情加重顯著升高。

GP73是一種由高爾基體合成釋放的具有Ⅱ型拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的跨膜蛋白，在正常人群血液中含量較低，但在各種原因引起的肝臟病變中表達(dá)水平顯著升高，研究表明，血清GP73水平與肝臟中GP73含量密切相關(guān)，因此通過簡(jiǎn)單安全的檢測(cè)外周血中GP73水平即可較好的反映肝臟病損情況[9]。張文昭等[10]研究乙肝患者血清中GP73水平發(fā)現(xiàn)，在HBV感染階段，干細(xì)胞發(fā)生炎癥反應(yīng)，可導(dǎo)致血清GP73水平上升，因此GP73對(duì)HBV-C和各期CHB患者均具有一定診斷價(jià)值。

本研究發(fā)現(xiàn)，健康人群、HBV-C和CHB患者血清FFA、GP73表達(dá)水平均具有顯著差異，且隨著CHB患者肝臟損傷程度加重明顯升高，但兩者升高原因有所不同，其中FFA是因肝臟炎癥反應(yīng)導(dǎo)致其對(duì)FFA代謝能力下降，從而引起血清FFA升高，而FFA具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，可作用于肝細(xì)胞導(dǎo)致細(xì)胞膜穩(wěn)定性下降和功能異常，從而使肝細(xì)胞變性死亡，加重肝臟損傷，進(jìn)一步減弱肝臟對(duì)FFA氧化分解能力[4]；而GP73是一種病毒反應(yīng)性蛋白，表達(dá)水平升高主要是因?yàn)槭懿《靖腥敬碳ず蠛铣珊歪尫旁黾?，另外肝炎可?dǎo)致肝臟細(xì)胞膜通透性增加[11]，從而使GP73入血量增多也可導(dǎo)致血清GP73水平上升，因此血清FFA主要反映肝細(xì)胞發(fā)生損傷而GP73則提示病毒感染發(fā)生。

經(jīng)肝組織穿刺活檢證實(shí)，CHB患者血清FFA和GP73水平與患者肝組織炎癥反應(yīng)和肺纖維化程度加重而升高，采用炎癥獲得分級(jí)和纖維化分期量化后進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)FA和GP73水平均與患者肝組織炎癥分級(jí)呈正相關(guān)，與患者肝纖維化分期呈正相關(guān)，表明FFA和GP73水平均可用來評(píng)估患者病情進(jìn)展、指導(dǎo)臨床用藥和監(jiān)測(cè)治療效果。若能進(jìn)一步研究明確其作用機(jī)制，F(xiàn)FA和GP73水平將可獲得更廣泛的臨床使用價(jià)值。

綜上所述，CHB患者血清FFA和GP73表達(dá)水平顯著升高，且隨病情加重變化明顯，與肝炎活動(dòng)分級(jí)和纖維化分期呈明顯正相關(guān)，因而可用于評(píng)估患者病情、指導(dǎo)臨床用藥和監(jiān)測(cè)治療效果。