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    輕鏈表達(dá)缺失的IgD 型多發(fā)性骨髓瘤免疫表型分析

    2018-07-06 02:17:56王金行姜繁明劉柏新宋鑒清劉宇思
    關(guān)鍵詞:泳道輕鏈骨髓瘤

    王金行,姜繁明,劉柏新,宋鑒清,劉宇思

    (中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科,沈陽(yáng) 110001)

    多發(fā)性骨髓瘤 (multiple myeloma,MM) 是漿細(xì)胞惡性克隆增殖性疾病,占血液系統(tǒng)惡性腫瘤的10%[1]。IgD型MM是一種少見(jiàn)的骨髓瘤亞型,占所有MM的1.0%~2.5%[2-3],國(guó)內(nèi)報(bào)道為4%~8%[4-5]。輕鏈表達(dá)缺失的IgD型MM國(guó)內(nèi)外罕見(jiàn)報(bào)道。本研究回顧性分析了我院收治的5例輕鏈表達(dá)缺失IgD型MM的臨床特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)檢查、診斷分型,以期發(fā)現(xiàn)其特點(diǎn),避免臨床上漏診及誤診。

    1 材料與方法

    1.1 臨床資料

    2015年6月至2017年5月期間我院門(mén)診及住院患者中, 通過(guò)免疫固定電泳 (immunofixation electrophoresis,IFE) 共檢出MM患者1 355例,其中男708例,女647例,年齡13~94歲,平均 (54.97±15.46) 歲。IgD型MM患者55例,男31例,女24例,年齡23~81歲,平均 (54.05±15.31) 歲;其中5例輕鏈表達(dá)缺失,其臨床表現(xiàn)包括骨痛 (1例) 、貧血 (2例) 、消瘦 (1例) 、浮腫 (4例) 等。所有患者均參照2017年修訂的《中國(guó)多發(fā)性骨髓瘤診治指南》[6]進(jìn)行診治和療效評(píng)價(jià),按Durie-Salmon (DS) 分期和國(guó)際分期系統(tǒng) (ISS) 分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分期。

    1.2 檢測(cè)方法

    1.2.1 血清免疫球蛋白測(cè)定:采用美國(guó)Heckman公司IMMAGE免疫化學(xué)分析儀及配套試劑,采用散射比濁法進(jìn)行自動(dòng)定量測(cè)定IgG、IgA、IgM和κ、λ輕鏈的含量。

    1.2.2 血清蛋白電泳:采用英國(guó)海倫娜公司V-8全自動(dòng)臨床毛細(xì)管電泳儀及配套試劑,進(jìn)行血清蛋白電泳 (serum protein electrophoresis,SPE) 測(cè)定;采用美國(guó)Helena公司的Spife4000電泳儀及配套試劑,進(jìn)行尿本周蛋白 (urinary Bence Jones protein,U-BJP) 測(cè)定。

    1.2.3 免疫固定電泳:采用美國(guó)Helena公司的Spife3000電泳儀及配套試劑進(jìn)行測(cè)定,取患者血清用0.9%生理鹽水分別按1︰3、1︰5稀釋。特別注意加IgD泳道。具體操作包括瓊脂糖凝膠電泳、免疫沉淀及顯色3個(gè)部分。免疫沉淀即應(yīng)用固定劑和各型免疫球蛋白及輕鏈抗血清,加于凝膠表面的泳道上,經(jīng)孵育使固定劑和抗血清在凝膠內(nèi)滲透并擴(kuò)散,若泳道有對(duì)應(yīng)的抗原存在,則在適當(dāng)位置可形成抗原抗體復(fù)合物并沉淀下來(lái)。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

    采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料的組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P< 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 血清IFE特征及輕鏈所占比例

    IFE檢測(cè)結(jié)果顯示,1 355例各類型MM患者中IgD型55例,陽(yáng)性檢出率約占同期MM患者的4.1%(55/1 355) ,且λ型輕鏈所占比例均高于同期其他類型MM,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P< 0.05) ;55例IgD 型MM患者中,λ型49例 (89.1%) ,κ型1例 (1.8%) ,輕鏈缺失5例 (9.1%) 。見(jiàn)表1。

    表1 血清免疫固定電泳分型及所占比例 [n (%) ]Tab.1 Serum immunofixation electrophoresis Ig typing and proportion [n (%) ]

    2.2 血清免疫球蛋白定量

    55例IgD型MM患者血清免疫球蛋白IgG、IgA和IgM含量均降低或正常。50例完整、5例輕鏈表達(dá)缺失的IgD型MM患者實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果見(jiàn)表2。

    2.3 血清蛋白電泳M帶及U-BJP檢出率

    血清蛋白電泳、U-BJP檢測(cè)結(jié)果顯示,55例IgD型MM患者中,5例輕鏈表達(dá)缺失的IgD型MM患者血清蛋白電泳無(wú)M峰,U-BJP陽(yáng)性2例。見(jiàn)圖1和表3。

    2.4 免疫固定電泳分型

    IFE結(jié)果顯示,55例IgD型MM患者在IgD泳道均呈現(xiàn)異常濃集區(qū)帶,即特異性的抗原抗體沉淀帶。5例輕鏈表達(dá)缺失的IgD型MM患者κ、λ泳道均無(wú)抗原抗體沉淀帶,即輕鏈表達(dá)缺失。見(jiàn)圖2。

    表2 55例IgD型MM的免疫球蛋白定量Tab.2 Immunoglobulin quantitative analysis of 55 patients with IgD MM

    圖1 IgD 型MM 患者血清蛋白電泳結(jié)果Fig.1 Serum protein electrophoresis of the patients with IgD MM

    表3 5例輕鏈缺失IgD型MM患者血清蛋白電泳及尿本周氏蛋白檢查結(jié)果 (%)Tab.3 Serum protein electrophoresis and urinary Bence Jones protein levels in five IgD MM patients with loss of light chain (%)

    圖2 IgD 型MM 患者免疫固定電泳結(jié)果Fig.2 Immunofixation electrophoresis of IgD MM patients

    3 討論

    MM患者的實(shí)驗(yàn)室檢查中以M蛋白鑒定最有診斷價(jià)值。所謂M蛋白帶即單一的免疫球蛋白增殖在血清蛋白電泳時(shí)表現(xiàn)為1條狹窄濃集的異常區(qū)帶。根據(jù)增生的漿細(xì)胞分泌的免疫球蛋白重鏈的不同,可將MM分為IgG型、IgA型、IgM型、IgD型和IgE型。其中IgG型、IgA型、IgM型較為常見(jiàn),IgD型少見(jiàn),而IgE型非常罕見(jiàn)[2,7]。本研究結(jié)果表明,我院門(mén)診及住院的MM 患者中IgD型占所有類型MM的4.1%,遠(yuǎn)低于IgG的比例 (45.3%) 。IgD型是一種比較罕見(jiàn)類型的MM,且很多醫(yī)療單位只有IgG、IgA、IgM的免疫固定電泳,而沒(méi)有開(kāi)展IgD的免疫固定電泳,因此,IgD型極容易被漏診或誤診為輕鏈型MM。本研究發(fā)現(xiàn)IgD型MM患者的IgG、IgA和IgM免疫球蛋白含量多為正?;驕p低,但由于試劑限制,無(wú)法進(jìn)行IgD定量。然而,當(dāng)某種免疫球蛋白特異性升高時(shí),其他正常成分的免疫球蛋白就會(huì)相應(yīng)地減少[8],因此推斷IgD免疫球蛋白含量應(yīng)升高。

    本研究中,SPE在5例輕鏈缺失IgD型MM患者M(jìn)峰不明顯或無(wú)M峰時(shí)未檢出M帶,診斷率不高。考慮其原因可能有: (1) SPE方法檢測(cè)單克隆蛋白的最低濃度是0.13 g/L,敏感度較血清免疫固定電泳低,而IgD在人體內(nèi)含量極低,平均0.03 g/L[9],IgD型MM患者即使血清中IgD水平較正常明顯升高也不一定能夠達(dá)到出現(xiàn)M峰的蛋白濃度要求,故血清蛋白未能見(jiàn)到M峰;因此不能通過(guò)SPE診斷IgD型MM,或換言之,僅通過(guò)SPE檢查會(huì)導(dǎo)致IgD型MM的漏診和誤診;(2) IgD型MM患者即使血清中IgD水平較正常明顯升高,但血清免疫球蛋白仍可在正常范圍內(nèi),甚至可以低于正常,本研究中大多數(shù)患者血清球蛋白是正常或偏低的,這是因?yàn)檠逯蠭gD含量非常低,在其單克隆增生時(shí),即使IgD成倍增加,其增加的量也遠(yuǎn)遠(yuǎn)比不上由于IgD單克隆增生所致的對(duì)其他類型免疫球蛋白的抑制作用,所以有些患者血清免疫球蛋白總量可以正常甚至低于正常。

    本研究中,免疫固定電泳分型結(jié)果發(fā)現(xiàn)IgA型MM輕鏈表達(dá)缺失13例。IgA型MM較常見(jiàn)且免疫球蛋白IgA含量比較高,不容易發(fā)生漏診和誤診。55例IgD型MM患者IgD泳道均呈現(xiàn)異常濃集區(qū)帶,即特異性的抗原抗體沉淀帶,但其中5例輕鏈表達(dá)缺失IgD型MM,其κ、λ泳道均無(wú)抗原抗體沉淀帶,即輕鏈表達(dá)缺失,血清IFE時(shí)加IgD泳道可以避免漏診或誤診為游離輕鏈型MM,提高了IgD型MM的診斷率。

    對(duì)于臨床初診疑似MM及復(fù)診的IgD型患者,實(shí)驗(yàn)室檢查如發(fā)現(xiàn)免疫球蛋白IgG、IgA和IgM含量均正?;驕p低,血清蛋白電泳M峰不明顯或無(wú)M峰時(shí),在進(jìn)行免疫固定電泳時(shí)務(wù)必加IgD泳道,以避免IgD型MM誤診為游離輕鏈型MM或?qū)⑤p鏈表達(dá)缺失IgD型MM的患者漏診。

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