5種生物殺蟲(chóng)劑對(duì)4種天敵昆蟲(chóng)的安全性評(píng)價(jià)

尹園園， 呂 兵， 林清彩， 陳 浩， 翟一凡， 于 毅， 鄭 禮山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所/山東省植物病毒學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天敵與授粉昆蟲(chóng)研究中心，山東 濟(jì)南 250100

隨著植保綠色防控技術(shù)的發(fā)展以及高端產(chǎn)品的要求，對(duì)生物殺蟲(chóng)劑和天敵昆蟲(chóng)的需求在增長(zhǎng)(楊普云和任彬元，2018)。用天敵昆蟲(chóng)防治害蟲(chóng)見(jiàn)效慢但持效期長(zhǎng)，生物殺蟲(chóng)劑見(jiàn)效快但持效期短。因此，使用生物殺蟲(chóng)劑與天敵昆蟲(chóng)結(jié)合的方式防治害蟲(chóng)，效果更好。

麗蚜小蜂EncarsiaformosaGahan、東亞小花蝽Oriussauteri(Poppius)、食蚜癭蚊Aphidoletesaphidimyza(Rond.)、巴氏新小綏螨NeoseiulusbarkeriHughes均是目前應(yīng)用比較廣泛的天敵昆蟲(chóng)。麗蚜小蜂對(duì)溫室粉虱有良好的防控效果，是全球傳統(tǒng)生物防治的成功典范之一(Liuetal.，2015; Thoemingetal.，2003)。東亞小花蝽是一種在我國(guó)北方分布極為廣泛的天敵昆蟲(chóng)，對(duì)薊馬類(lèi)有很強(qiáng)的控制能力(郭建英和萬(wàn)方浩，2001; 孫曉會(huì)等，2009； 張安盛等，2007)，在害蟲(chóng)綜合治理中具有較大的應(yīng)用價(jià)值(劉文靜等，2011a，2011b)。食蚜癭蚊是蚜蟲(chóng)的重要捕食性天敵，可以捕食60余種蚜蟲(chóng)(Harris，1973)。巴氏新小綏螨是害蟲(chóng)(螨)的捕食性天敵之一，已經(jīng)被美國(guó)和歐洲許多國(guó)家用于防治葉螨、薊馬等吸汁性害蟲(chóng)(螨)?？鄥A(matrine)、桉油精(cineole)、魚(yú)藤酮(rotenone)、除蟲(chóng)菊素(pyrethrin)、橄欖鯊(potassium laurate)為5種生物殺蟲(chóng)劑，用于防治蔬菜上的蚜蟲(chóng)、粉虱、薊馬、葉螨、斑潛蠅等害蟲(chóng)。

使用對(duì)害蟲(chóng)高效且對(duì)天敵昆蟲(chóng)安全的藥劑是害蟲(chóng)綜合治理的關(guān)鍵(Wright & Verkerk，1995)。研究表明，0.6%煙堿·苦參堿乳油對(duì)捕食性天敵瓢蟲(chóng)具有一定的安全性(王彥陽(yáng)，2017)；除蟲(chóng)菊素、苦參堿適宜在煙蚜Mgzuspersicae(Zulzer)防治中與異色瓢蟲(chóng)Harmoniaaxyridis(Pallas)交替或組合使用(潘悅等，2013)；但也有研究表明，生物殺蟲(chóng)劑會(huì)殺傷天敵昆蟲(chóng)(王慶森等，2014)。因此，在同時(shí)使用生物殺蟲(chóng)劑與天敵昆蟲(chóng)時(shí)，需明確生物殺蟲(chóng)劑對(duì)天敵昆蟲(chóng)的影響?？鄥A、桉油精、魚(yú)藤酮、除蟲(chóng)菊素和橄欖鯊這5種生物殺蟲(chóng)劑對(duì)麗蚜小蜂、東亞小花蝽、食蚜癭蚊和巴氏新小綏螨等4種天敵昆蟲(chóng)的安全性尚不明確，本實(shí)驗(yàn)對(duì)此進(jìn)行研究，以期為生物殺蟲(chóng)劑和天敵昆蟲(chóng)的聯(lián)合使用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試天敵昆蟲(chóng)

麗蚜小蜂、食蚜癭蚊、東亞小花蝽由山東魯?？萍奸_(kāi)發(fā)有限公司提供，巴氏新小綏螨由首伯農(nóng)(北京)生物技術(shù)有限公司提供。

1.2 供試藥劑

0.5%苦參堿水劑(北京三浦百草綠色植物制劑有限公司)，5%桉油精可溶液劑(北京亞戈農(nóng)生物藥業(yè)有限公司)，5%魚(yú)藤酮可溶液劑(云南南寶科技有限責(zé)任公司)，1.52%除蟲(chóng)菊素水溶劑(云南南寶科技有限責(zé)任公司)，49%橄欖鯊軟皂水劑(深圳百樂(lè)寶生物農(nóng)業(yè)科技有限公司)。

1.3 方法

根據(jù)田間推薦使用濃度，確定各藥劑的實(shí)驗(yàn)濃度：1.8×103mg·L-10.5%苦參堿水劑，3.3×103mg·L-15%桉油精可溶液劑，6.7×103mg·L-15%魚(yú)藤酮可溶液劑，6.0×103mg·L-11.52%除蟲(chóng)菊素水溶劑，1.0×104mg·L-149%橄欖鯊軟皂水劑。將各藥劑按實(shí)驗(yàn)濃度用蒸餾水進(jìn)行稀釋?zhuān)鳛閭溆盟幰骸?/p>

本實(shí)驗(yàn)于溫度26 ℃、光周期16L∶8D、相對(duì)濕度(60±5)%的人工氣候箱內(nèi)進(jìn)行。

1.3.1 5種生物殺蟲(chóng)劑對(duì)麗蚜小蜂的影響 (1)對(duì)成蜂的影響。參照《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》(蔡道基，1991)，采用玻璃管藥膜法，在指形管內(nèi)(高10.5 cm、內(nèi)徑3 cm、內(nèi)表面102.3 cm2)加入1 mL經(jīng)稀釋的藥液，充分滾吸直至晾干制成藥膜管。將準(zhǔn)備好的24 h內(nèi)羽化的供試麗蚜小蜂成蜂放入藥膜管中爬行1 h后轉(zhuǎn)入無(wú)藥管中，并飼喂10%蜂蜜水，用黑布封緊管口。以蒸餾水處理作對(duì)照。每個(gè)處理5次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)(50±10)頭麗蚜小蜂。分別于24和48 h后檢查并記錄死亡(用小毛筆輕觸不動(dòng)即為死蜂)和存活蜂數(shù)。

(2)對(duì)蛹的影響。將收集的3日齡麗蚜小蜂蛹制成蜂卡。將備用藥液置于準(zhǔn)備好的燒杯中，將準(zhǔn)備好的蜂卡在藥液中浸漬10 s后取出，空氣中自然晾干，放于恒溫室中自然發(fā)育。以蒸餾水浸漬蜂卡為對(duì)照，每個(gè)處理約100個(gè)蜂蛹，每個(gè)處理重復(fù)5次。10～15 d后記錄蛹的羽化數(shù)量。

1.3.2 5種生物殺蟲(chóng)劑對(duì)東亞小花蝽成蟲(chóng)的影響 采用玻璃管藥膜法進(jìn)行測(cè)定，玻璃管藥膜的制備與1.3.1相同。接入10頭東亞小花蝽成蟲(chóng)，1 h后將其移入干凈的試管內(nèi)，每個(gè)處理重復(fù)5次。調(diào)查并記錄1、24 h后各處理東亞小花蝽的死亡數(shù)量。用毛筆輕觸東亞小花蝽身體，以蟲(chóng)體不動(dòng)為死亡標(biāo)準(zhǔn)。以蒸餾水處理為對(duì)照。

1.3.3 5種生物殺蟲(chóng)劑對(duì)食蚜癭蚊幼蟲(chóng)的影響 在直徑9 cm的培養(yǎng)皿內(nèi)放入直徑9 cm的濾紙，取1 mL藥液使其均勻分布于濾紙上，用勾線筆分別挑取個(gè)體大小一致、健康活潑的食蚜癭蚊2齡幼蟲(chóng)于濾紙上，每個(gè)處理接蟲(chóng)10頭，每個(gè)處理5次重復(fù)。分別于24和48 h后在雙目解剖鏡下檢查、記錄食蚜癭蚊幼蟲(chóng)死亡數(shù)。

1.3.4 5種生物殺蟲(chóng)劑對(duì)巴氏新小綏螨成螨的影響 方法同1.3.3，取健康活潑的巴氏新小綏螨于濾紙上，每個(gè)處理接蟲(chóng)10頭，每個(gè)處理4次重復(fù)。分別于24和48 h后在雙目解剖鏡下檢查、記錄巴氏新小綏螨成螨死亡數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 20.0數(shù)據(jù)處理軟件分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的差異顯著性，不同藥劑對(duì)幾種天敵昆蟲(chóng)的影響均采用單因素方差分析，多重比較采用Tukey法，顯著性水平為0.05。當(dāng)對(duì)照組死亡率大于5%時(shí)，對(duì)死亡率進(jìn)行校正。

校正死亡率/%=(處理組死亡率-對(duì)照組死亡率)/(1-對(duì)照組死亡率)×100。

根據(jù)國(guó)際生物防治組織(IOBC)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，將農(nóng)藥對(duì)昆蟲(chóng)的影響分為4個(gè)等級(jí)：一級(jí)(無(wú)害)，死亡率<30%；二級(jí)(輕微有害)，30%≤死亡率<79%；三級(jí)(中度有害)，79%≤死亡率≤99%；四級(jí)(極度有害)，死亡率>99%(Hassan，1992)。

2 結(jié)果與分析

2.1 5種生物殺蟲(chóng)劑對(duì)麗蚜小蜂的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果(表1)表明，5種生物殺蟲(chóng)劑在藥后24 h(F5，24=498.21，P<0.01)和48 h(F4，20=220.53，P<0.01)對(duì)麗蚜小蜂成蜂產(chǎn)生顯著影響。與對(duì)照相比，苦參堿、魚(yú)藤酮、除蟲(chóng)菊素這3種藥劑對(duì)麗蚜小蜂成蜂的影響較大，藥后24 h死亡率均在96.83%以上，48 h死亡率在98.65%以上；橄欖鯊對(duì)麗蚜小蜂成蜂的危害最小，藥后48 h校正死亡率僅為21.86%。根據(jù) IOBC 的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，橄欖鯊對(duì)麗蚜小蜂成蟲(chóng)無(wú)害，桉油精對(duì)麗蚜小蜂成蟲(chóng)輕微有害，魚(yú)藤酮對(duì)麗蚜小蜂成蟲(chóng)中度有害，苦參堿和除蟲(chóng)菊素對(duì)麗蚜小蜂成蟲(chóng)極度有害。

表1 5種生物殺蟲(chóng)劑對(duì)麗蚜小蜂成蜂、食蚜癭蚊幼蟲(chóng)和巴氏新小綏螨成螨的影響Table 1 Effects of five biological insecticides on adults of the parasitoid Encarsia formosa, the larvae of the predatory midge, Aphidoletes aphidimyza, and the adults of the predatory mite Neoseiulus barkeri

同列數(shù)據(jù)(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤)后附不同小寫(xiě)字母者表示差異顯著 (P<0.05, Tukey)。

The data (means±SE) in the same column with the different letters indicate significant differences (P<0.05, Tukey-test).

不同生物殺蟲(chóng)劑對(duì)麗蚜小蜂羽化率的影響顯著不同(F5，24=207.12，P<0.01，圖1)。蒸餾水處理麗蚜小蜂偽蛹的羽化率為91.89%；魚(yú)藤酮、除蟲(chóng)菊素對(duì)麗蚜小蜂偽蛹的殺傷力較強(qiáng)，羽化率均低于10%；苦參堿和橄欖鯊處理后的羽化率分別為58.69%和73.34%；桉油精對(duì)麗蚜小蜂蛹的殺傷力最小，羽化率為85.68%。

2.2 5種生物殺蟲(chóng)劑對(duì)東亞小花蝽成蟲(chóng)的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果(表2)表明，5種生物殺蟲(chóng)劑在藥后1 h(F5，24=441.16，P<0.01)和24 h(F4，20=43.21，P<0.01)對(duì)東亞小花蝽產(chǎn)生顯著影響。除蟲(chóng)菊素對(duì)東亞小花蝽的影響最大，藥后1 h的死亡率就達(dá)到100%；苦參堿影響次之，藥后24 h東亞小花蝽死亡率為40.91%；桉油精、魚(yú)藤酮、橄欖鯊對(duì)東亞小花蝽的影響較小，藥后24 h東亞小花蝽死亡率在2.27%～15.91%之間。 根據(jù) IOBC 的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，魚(yú)藤酮、橄欖鯊、桉油精對(duì)東亞小花蝽無(wú)害，苦參堿對(duì)東亞小花蝽輕微有害，除蟲(chóng)菊素對(duì)東亞小花蝽極度有害。

圖1 5種生物殺蟲(chóng)劑對(duì)麗蚜小蜂羽化率的影響Fig.1 Effects of five biological insecticides on the eclosion rate of the parasitoid Encarsia formosa柱上不同小寫(xiě)字母表示差異顯著 (P<0.05, Tukey)。Different letters on the column indicate significant differences (P<0.05, Tukey-test).

表2 5種生物殺蟲(chóng)劑對(duì)東亞小花蝽成蟲(chóng)的影響Table 2 Effects of five biological insecticides on adults of the predatory heteropteran, Orius sauteri

同列數(shù)據(jù)(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤)后附不同小寫(xiě)字母者表示差異顯著 (P<0.05, Tukey)。

The data (means±SE) in the same column with the different letters indicate significant differences (P<0.05, Tukey-test).

2.3 5種生物殺蟲(chóng)劑對(duì)食蚜癭蚊幼蟲(chóng)的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果(表1)表明，5種生物殺蟲(chóng)劑在藥后24 h(F5，24=364.31，P<0.01)和48 h(F4，20=66.15，P<0.01)對(duì)食蚜癭蚊產(chǎn)生顯著影響。魚(yú)藤酮對(duì)食蚜癭蚊幼蟲(chóng)的影響最大，藥后24 h食蚜癭蚊幼蟲(chóng)死亡率就達(dá)到100%；苦參堿、桉油精、除蟲(chóng)菊素、橄欖鯊對(duì)食蚜癭蚊的影響均較小，藥后48 h食蚜癭蚊幼蟲(chóng)死亡率在4.44%～15.56%之間。根據(jù) IOBC 的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，魚(yú)藤酮對(duì)食蚜癭蚊幼蟲(chóng)極度有害，苦參堿、桉油精、除蟲(chóng)菊素、橄欖鯊對(duì)食蚜癭蚊幼蟲(chóng)無(wú)害。

2.4 5種生物殺蟲(chóng)劑對(duì)巴氏新小綏螨成螨的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果(表1)表明，5種生物殺蟲(chóng)劑在藥后24 h(F5,24=82.88，P<0.01)和48 h(F4,20=49.68，P<0.01)對(duì)巴氏新小綏螨產(chǎn)生顯著影響。桉油精、魚(yú)藤酮、除蟲(chóng)菊素對(duì)巴氏新小綏螨的影響較大，藥后48 h死亡率均達(dá)到100%；苦參堿對(duì)巴氏新小綏螨的影響最小，藥后48 h死亡率為15.91%。 根據(jù) IOBC 的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，桉油精、魚(yú)藤酮、除蟲(chóng)菊素對(duì)巴氏新小綏螨極度有害，橄欖鯊對(duì)巴氏新小綏螨輕微有害，苦參堿對(duì)巴氏新小綏螨無(wú)害。

3 結(jié)論

肖達(dá)等(2014)研究表明，噻嗪酮可與捕食性天敵昆蟲(chóng)異色瓢蟲(chóng)、東亞小花蝽、智利小植綏螨PhytoseiuluspersimilisAthias-Henriot和寄生性天敵松毛蟲(chóng)赤眼蜂TrichogrammadendrolimiMatsumura、麗蚜小蜂、中紅側(cè)溝繭蜂MicroplitismediatorHaliday聯(lián)合使用；甲氧蟲(chóng)酰肼和茚蟲(chóng)威可與天敵昆蟲(chóng)蚜繭蜂AphidiuscolemaniViereck、食蚜癭蚊、胡瓜鈍綏螨Neoseiuluscucumeris(Oudemans)聯(lián)合使用(Staraetal.，2011)；生物殺蟲(chóng)劑印楝素可與赤眼蜂聯(lián)合使用(Lingathuraietal.，2015)。本研究結(jié)果表明，橄欖鯊可與麗蚜小蜂、東亞小花蝽、食蚜癭蚊一起使用，桉油精可與東亞小花蝽、食蚜癭蚊一起使用，苦參堿可與食蚜癭蚊、巴氏新小綏螨一起使用，魚(yú)藤酮可與東亞小花蝽一起使用，除蟲(chóng)菊素可與食蚜癭蚊一起使用。

本研究在實(shí)驗(yàn)室條件下進(jìn)行，而在田間的實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中可能會(huì)由于環(huán)境條件的不同或藥劑實(shí)際用量的不同導(dǎo)致對(duì)天敵昆蟲(chóng)殺傷力的變化。因此，為了全面評(píng)價(jià)農(nóng)藥對(duì)天敵昆蟲(chóng)的安全性，應(yīng)當(dāng)開(kāi)展相關(guān)的田間試驗(yàn)。

郭建英, 萬(wàn)方浩, 2001. 一種適于繁殖東亞小花蝽的產(chǎn)卵植物——壽星花. 中國(guó)生物防治, 7(2): 53-56.

劉文靜, 張安盛, 李麗莉, 門(mén)興元, 張思聰, 周仙紅, 于毅, 徐洪富, 2011a. 二種活體飼料對(duì)東亞小花蝽生長(zhǎng)發(fā)育和生殖的影響. 應(yīng)用昆蟲(chóng)學(xué)報(bào), 48(3): 566-568.

劉文靜, 張安盛, 門(mén)興元, 周仙紅, 李麗莉, 張思聰, 于毅, 徐洪富, 2011b. 兩種獵物飼養(yǎng)對(duì)東亞小花蝽捕食作用的影響. 中國(guó)生物防治學(xué)報(bào), 27(3): 302-307.

潘悅, 曾凡海, 張有偉, 張曉龍, 孫永華, 鄧國(guó)賓, 2013. 4種植物源殺蟲(chóng)劑對(duì)煙蚜的藥效及其對(duì)異色瓢蟲(chóng)的毒力測(cè)定. 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)), 28(3): 302-305.

孫曉會(huì), 徐學(xué)農(nóng), 王恩東, 2009. 東亞小花蝽對(duì)西方花薊馬和二斑葉螨的捕食選擇性. 生態(tài)學(xué)報(bào), 29(11): 6285-6291.

王慶森, 鞠曉蕾, 黃建， 2014. 七星瓢蟲(chóng)對(duì)茶蚜的捕食功能反應(yīng)及生物農(nóng)藥的安全性評(píng)價(jià). 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 36(6): 1247-1252.

王彥陽(yáng), 2017. 0.6%煙堿·苦參堿乳油對(duì)柑橘矢尖蚧的防治效果及其對(duì)天敵的安全性評(píng)價(jià). 農(nóng)藥, 56(6): 457-458.

肖達(dá), 郭曉軍, 王甦, 張君明, 張帆, 2014. 三種殺蟲(chóng)劑對(duì)幾種昆蟲(chóng)天敵的毒力測(cè)定. 環(huán)境昆蟲(chóng)學(xué)報(bào), 36(6): 951-958.

楊普云, 任彬元， 2018. 促進(jìn)農(nóng)作物病蟲(chóng)害綠色防控技術(shù)推廣應(yīng)用——2011至2017年全國(guó)農(nóng)作物重大病蟲(chóng)害防控技術(shù)方案要點(diǎn)評(píng)述. 植物保護(hù), 44(1): 6-8.

張安盛, 于毅, 李麗莉, 張思聰, 2007. 東亞小花蝽(Oriussauteri)成蟲(chóng)對(duì)入侵害蟲(chóng)西花薊馬(Frankliniellaoccidentalis)成蟲(chóng)的捕食作用. 生態(tài)學(xué)報(bào), 27(5): 1903-1909.

HARRIS K M, 1973.Aphidophagouscecidomyiidae(Diptera): taxonomy, biology and assessments of field populations.BulletinofEntomologicalResearch, 63(2): 305-325.

HASSAN S A, 1992. Guidelines for testing the effects of pesticides on beneficial organisms.IOBC/WPRSBulletin， 15: 18-39.

LINGATHURAI S, PUSHPALATHA M, RAVEEN R, PRIYATHARSINI P V, SATHIKUMARAN R, NARAYANAN P C S, 2015. Ecotoxicological performances and biochemical effect of selected pesticides onTrichogrammachilonisishii(Hymenoptera: Trichogrammatidae).JournalofEntomologyandZoologyStudies, 3(1): 109-114.

LIU T X, STANSLY P A, GERLING D, 2015. Whitefly parasitoids: distribution, life history, bionomics,and utilization.AnnualReviewofEntomology, 60: 273-292.

STARA J, OUREDNICKOVA J, KOCOUREK F, 2011. Laboratory evaluation of the side effects of insecticides onAphidiuscolemani(Hymenoptera: Aphidiidae),Aphidoletesaphidimyza(Diptera: Cecidomyiidae), andNeoseiuluscucumeris(Acari: Phytoseidae).JournalofPestScience, 84(1): 25-31.

THOEMING G, BORGEMEISTER C, SETAMOU M, POEHLING H M, 2003. Systemic effects of neem on western flower thrips,Frankliniellaoccidentalis(Thysanoptera: Thripidae).JournalofEconomicEntomology, 96(3): 817-825.

WRIGHT D J, VERKERK R H J, 1995. Integration of chemical and biological control systems for arthropods: evaluation in a multitrophic context.PesticideScience, 44: 207-218.