呼吸道九項病原體檢測在兒童呼吸道感染中的應(yīng)用價值

謝愛香

(濮陽市中醫(yī)院檢驗科，河南 濮陽 457003)

兒童呼吸道感染是兒童常見病和多發(fā)病，細菌、真菌、病毒、支原體、衣原體等均可引起兒童呼吸道感染[1]。由于感染種類繁多，且每一種感染病原體在不同條件下會有多種臨床表現(xiàn)，而同一種臨床表現(xiàn)也可能由多種病原體導(dǎo)致[2]。因此，為了盡快明確病原體，指導(dǎo)臨床用藥，本研究應(yīng)用九項病原體聯(lián)合檢測，取得了良好效果，現(xiàn)報告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年1月－2016年12月來河南省濮陽市中醫(yī)院住院治療的兒童呼吸道感染患者 1260 例，男 776 例，年齡 0～14 歲，平均（2.89±2.84）歲，女 484 例，年齡 0～14 歲，平均（3.51±3.27）歲。 其中嬰兒期（0～1歲）患兒 133例，幼兒期（1～3歲）患兒 555例，學(xué)齡前期（3～7歲）患兒 403例，學(xué)齡期（7～14歲）患兒169例。所有患兒均符合《內(nèi)科學(xué)》（人民衛(wèi)生出版社，2013年，第8版）中兒童呼吸道感染相關(guān)診斷標準，無自身免疫性疾病或其他基礎(chǔ)疾病，無在外院治療史或口服抗菌藥物史。

1.2 檢測方法 采集患兒外周靜脈血3ml，分離血清，應(yīng)用間接免疫熒光法檢測呼吸道九項病原體IgM抗體，檢測試劑盒由西班牙VIRCELL.S.L提供，檢測由專人嚴格按照試劑盒說明書要求操作。

1.3 檢測標準 腺病毒（Adenovirus，ADV）、呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial vi-rus，RSV）、副流感病毒 1、2、3 型（Parainfluenza virus，PIVs）、乙型流感病毒（Influenza B virus，INFB）、甲型流感病毒（Influenza A virus，INFA） 對陽性血清 1%～15%細胞的細胞核、胞漿或胞膜出現(xiàn)蘋果綠色熒光，如ADV、INFA、INFB、RSV的細胞呈紅色則為陰性；嗜肺軍團菌血清 1 型（Legionella pneumophila，LP1）、肺炎衣原體（Chlamydia pneumon-iae，CPn）、Q 熱立克次體（Q fever Coxiella burnetii，COX）中所有的細菌均呈蘋果綠熒光，如無熒光則為陰性；肺炎支原體（Mycoplasma pneumoniae，MP）對陽性血清在細胞外圍呈蘋果綠熒光，如呈紅色則為陰性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 14.0統(tǒng)計學(xué)軟件對計數(shù)資料行χ2值檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各種病原體陽性率比較 1260例患兒總感染人數(shù)為631例，單一感染465例，混合感染166例，總陽性率感染為50.08%，其中肺炎支原體（MP）陽性率最高 22.38%，甲型流感病毒（INFA）最低（0.00%），各病原體IgM抗體陽性率之間差異顯著，比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表 1。

2.2 不同性別患兒九項病原體檢測陽性率比較，見表2。

表1 各種病原體陽性率比較（n，%）

表2 不同性別患兒九項病原體檢測感染陽性率比較（n，%）

2.3 不同年齡段患兒九項病原體檢測陽性率比較在不同年齡段患兒中，幼兒期和學(xué)齡前期患兒病原體IgM抗體陽性檢出率最高，MP和INFB陽性檢出率分別為 22.70%。 28.29 和 7.57%、16.63%，和其他年齡段患者病原體檢出率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表 3。

3 討論

兒童免疫力低下，極易引發(fā)呼吸道感染，由于呼吸道感染的非典型病原體引起的臨床表現(xiàn)不典型，給臨床診斷和治療造成困難。Johnstone J[3]等研究報道，90%以上的兒童呼吸道感染由非細菌性病原菌引起，其中以肺炎支原體、腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒等呼吸道病毒最為常見，并常?；旌铣霈F(xiàn)，病原學(xué)表現(xiàn)較為復(fù)雜。以往對于兒童呼吸道感染病毒，主要是采取病原體培養(yǎng)的方式來進行鑒別，但兒童呼吸道感染的非細菌性病原體實驗室培養(yǎng)，技術(shù)條件要求嚴格，其檢測通量也無法滿足日益增多的臨床標本數(shù)量。隨著免疫標記抗體技術(shù)的完善，特別是間接免疫熒光法對呼吸道九項病原體IgM抗體檢測技術(shù)，給兒童呼吸道感染臨床診治提供了更多的病原學(xué)參考依據(jù)。

本結(jié)果中，1260例患兒共檢出呼吸道病原體IgM抗體陽性631例，陽性率50.08%，高于鄭輝[4]（杭州患兒檢測陽性率33.9%）和廖兵[5]等（重慶患兒檢測陽性率38.42%）的報道，低于何成祿[6]等（昆明患兒檢測陽性率55.2%）的報道，說明不同地區(qū)兒童呼吸道病原體IgM抗體陽性率存在差異，這主要于各地區(qū)不同的地理環(huán)境和氣候特點有關(guān)。本研究中單一病原體感染多于混合感染，與秦茵茵[7]等的報道結(jié)果存在差異，差異的原因可能與病例所在的地區(qū)環(huán)境不同，Gilmour MI[8]等報道，環(huán)境污染可導(dǎo)致人群免疫力受損，不同地區(qū)和氣候環(huán)境的流行病學(xué)特征存在差異。

表3 不同年齡段患兒九項病原體檢測陽性率比較（n，%）

肺炎支原體 （MP）在本檢測中總陽性率22.38%，單一感染中陽性率 50.32%，混合感染中陽性率28.92%，和其他各類病原體比較，具有明顯差異，比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。 主要是因為 MP對呼吸道上皮細胞有特殊的親和力，又能通過飛沫傳染，在單一感染中傳播速度較快，患兒感染MP后，正常免疫系統(tǒng)紊亂，造成機體遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)，容易受到其他病原體入侵。

薛白[9，10]等研究證實，不同性別和年齡段患兒對呼吸道病原體的易感性存在差異。本結(jié)果中，女性患兒的MP和INFB的感染陽性率明顯高于男性患兒，導(dǎo)致女性患兒的總感染陽性率也顯著高于男性，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），與上述文獻報道結(jié)果一致。本結(jié)果顯示，學(xué)齡前期患兒和幼兒期MP和INFB病原體IgM抗體陽性率最高，可能是該年齡段患兒免疫力較低，又大多集中于人口密集的幼兒園和學(xué)校，一旦出現(xiàn)以上病毒感染，容易造成爆發(fā)流行。研究結(jié)果與劉潔[11－14]等的研究結(jié)果一致。

腺病毒（ADV）和呼吸道合胞病毒（RSV）是引起兒童重癥肺炎和支氣管炎的主要病原體，在本結(jié)果中，陽性率分別為 5.95%和 4.92%，常以混合狀態(tài)出現(xiàn)，一經(jīng)感染，病情嚴重；流感病毒（INFA、INFB）常造成局部爆發(fā)流行，病原學(xué)地位十分重要，應(yīng)重點監(jiān)測；Q熱立克次體（COX）可引起非典型性肺炎，發(fā)病后病情急驟，但COX是人畜共患疾病，有明顯的地域流行特點，臨床感染率較低，本結(jié)果中COX病原體IgM抗體陽性率0.24%，與國內(nèi)相關(guān)研究結(jié)果一致[15，16]。

總之，呼吸道九項病原體檢測操作簡便，可快速確定兒童呼吸道感染致病因子，發(fā)現(xiàn)混合感染病原體種類，為臨床避免因治療無效而造成的病情延誤、濫用抗生素形成的病原體耐藥性，以及醫(yī)源性交叉感染具有重要意義。

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