顯微鑒別法區(qū)分六神曲及三種偽品

張紅玲，覃藝，孫佳彬，范潤(rùn)勇，黃勤挽，孫繼林，姚仁川

六神曲收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑》第十九冊(cè)，制法是苦杏仁、赤小豆粉碎成粗粉，與面粉、麥麩混勻，另取辣蓼、青蒿、蒼耳草加水煎煮1小時(shí)，濾過、濾液濃縮成清膏，趁熱與上述藥粉拌勻，保持適當(dāng)溫度和濕度，自然發(fā)酵至表面遍生黃白色或灰色霉衣[1]。六神曲用于脾胃虛弱，飲食停滯，胸痞腹脹，小兒食積，臨床應(yīng)用廣泛。由于其較大的市場(chǎng)需求，且目前并沒有統(tǒng)一的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，不少不法商販見其有利可圖，生產(chǎn)銷售各種偽品，造成市場(chǎng)上六神曲質(zhì)量混亂。

目前在市場(chǎng)上六神曲偽品較多，其中一種為篡改制法，將辣蓼、青蒿、蒼耳草不經(jīng)過煎煮，直接粉碎后投料，這樣避免了大型煎煮帶來的不便，能夠顯著降低生產(chǎn)成本。從生產(chǎn)的原材料來看，青蒿、蒼耳草、辣蓼的價(jià)格一般為2～2.5元/kg，赤小豆為10元/kg，而苦杏仁為18～20元/kg，一些不法商對(duì)最貴的原料苦杏仁不投料，能夠顯著降低生產(chǎn)成本。從生產(chǎn)的實(shí)際來看，在特定的溫度、濕度下，六神曲自然發(fā)酵至表面遍生黃白色或灰色霉衣，一般需要3～4天，這樣耗時(shí)長(zhǎng)且發(fā)酵條件難控制，所以一些不法商不進(jìn)行自然發(fā)酵，能夠顯著降低生產(chǎn)和時(shí)間成本。這樣生產(chǎn)的六神曲偽品并無藥效，對(duì)患者而言，輕者貽誤病情，重者會(huì)導(dǎo)致其他安全問題，六神曲質(zhì)量監(jiān)控問題亟待解決。此外尚有一些添加土塊、只用麥麩制作等低劣偽品，由于肉眼較易區(qū)分，這里不做贅述。由于前三種偽品從外觀、氣味上較難區(qū)分，本實(shí)驗(yàn)針對(duì)這些偽品與六神曲正品進(jìn)行顯微鑒別比較，為六神曲安全、準(zhǔn)確用藥提供參考依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

六神曲正品：按照《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑》第十九冊(cè)六神曲標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)，統(tǒng)一發(fā)酵四天，由四川輔正藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)提供；偽品一：青蒿、辣廖、蒼耳草不煎煮，直接打粉加入，其他步驟同正品，實(shí)驗(yàn)室自制；偽品二：不添加苦杏仁，其他步驟同正品，實(shí)驗(yàn)室自制；偽品三：不進(jìn)行發(fā)酵，其他步驟同正品，實(shí)驗(yàn)室自制。

所用化學(xué)試劑均為分析純，購于成都市科龍化工試劑廠。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

XD-30細(xì)胞培養(yǎng)用顯微成像系統(tǒng)（寧波舜宇儀器有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)方法

六神曲偽品和正品均進(jìn)行粉碎，分別過4號(hào)篩。取少量粉末于載玻片上，滴加兩三滴水合氯醛溶液混勻，用酒精燈微火加熱，使之微沸，反復(fù)透化，至溶液均勻透明無流動(dòng)性，再滴加一滴稀甘油溶液，用蓋玻片壓片，微敲壓片趕氣泡并用濾紙吸走蓋玻片周圍多余液體即可備用。用顯微成像系統(tǒng)觀察顯微特征。

2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

六神曲與三種偽品顯微鑒別特征要點(diǎn)比較如表1所示。

表1 六神曲與三種偽品顯微特征比較

辣廖花粉粒、表皮細(xì)胞、導(dǎo)管、纖維薄壁細(xì)胞、腺毛、表皮細(xì)胞、導(dǎo)管發(fā)酵品 菌絲 菌絲 菌絲 無蒼耳草

2.3 六神曲顯微鑒別特征圖

圖1 六神曲正品顯微鑒別特征圖

圖2 六神曲偽品一顯微鑒別特征圖

圖3 六神曲偽品二顯微鑒別特征圖

圖4 六神曲偽品三顯微鑒別特征圖

3 結(jié)論與討論

六神曲作為一種傳統(tǒng)發(fā)酵曲劑，在各個(gè)地方六神曲質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、炮制規(guī)范以及處方均有差異[2]，這也為六神曲質(zhì)量監(jiān)控帶來了較大的阻礙。六神曲的功效與每一味原料藥及其處理方式都有較大的關(guān)系[3]，不規(guī)范的制法會(huì)使其失去療效，將成為臨床用藥安全的隱患。有效鑒別真?zhèn)瘟袂?，增加補(bǔ)充檢驗(yàn)是我們正面臨的重大問題。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)六神曲偽品進(jìn)行調(diào)查分析，并選擇了幾種直觀難辨別的偽品，采用顯微鑒別的方法，簡(jiǎn)單有效的區(qū)分出了正品與偽品。這些特征可以作為六神曲的鑒定依據(jù)，也為六神曲的質(zhì)量規(guī)范化提供了參考。

[1]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會(huì).衛(wèi)生部頒藥品標(biāo)準(zhǔn)(中藥成方制劑第19冊(cè))[S].北京:人民衛(wèi)生出版社,1991:87.

[2]任巧玲,宋瀟瀟.六神曲的質(zhì)量情況分析[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2010,4(10):113-114.

[3]劉振啟,劉杰.道地“六神曲”的工藝與混亂品的鑒別[J].首都醫(yī)藥,2009(01):40-41.