徐開(kāi)達(dá),王好學(xué),姜亞洲,胡翠林,王忠明,盧占暉,朱文斌,柴學(xué)軍,周永東*
(1.浙江省海洋水產(chǎn)研究所,農(nóng)業(yè)部重點(diǎn)漁場(chǎng)漁業(yè)資源科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站,浙江省海洋漁業(yè)資源可持續(xù)利用技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,浙江 舟山 316021;2.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所,上海 200090)
近年來(lái),海洋漁業(yè)資源的過(guò)度利用及環(huán)境污染等問(wèn)題致使我國(guó)近海海洋生物資源不斷衰退.開(kāi)展人工增殖放流是修復(fù)漁業(yè)資源的有效方式,放流種類(lèi)的標(biāo)志方法是對(duì)放流生物進(jìn)行效果評(píng)價(jià)的重要手段[1-2].與此同時(shí),魚(yú)類(lèi)標(biāo)志方法也隨之發(fā)展起來(lái)[3].目前,應(yīng)用較多的標(biāo)志方法有掛牌標(biāo)志法、切腹鰭法、熒光標(biāo)志法、烙印法、金屬線碼標(biāo)志法、分子標(biāo)志法等[4],不同標(biāo)志方法有各自優(yōu)缺點(diǎn)及適用種類(lèi)[5].國(guó)內(nèi)外關(guān)于海水魚(yú)類(lèi)體外標(biāo)志放流方法研究的報(bào)道較多,如金頭鯛(Sparusaurata)[6]、鮭魚(yú)(Salmosalar)[7]、牙鲆(Paralichthysolivaceus)[8]、鮸魚(yú)(Miichthysmiiuy)[9]、黑鯛(S.smacrocephalus)[10]、青石斑魚(yú)(Epinephelusawoara)[11]、大黃魚(yú)(Larimichthyscrocea)[12]、半滑舌鰨(Cynoglossussemilaevis)[13]等,為這些魚(yú)類(lèi)大規(guī)模增殖放流奠定了良好基礎(chǔ).
日本黃姑魚(yú)(Nibeajaponica)屬鱸形目(Perciformes)石首魚(yú)科(Sciaenidae)黃姑魚(yú)屬(Nibea),為黃姑魚(yú)種中的大型魚(yú)類(lèi),主要分布于我國(guó)東海、南海和日本南部海域[14].它具有抗病力強(qiáng)、生長(zhǎng)速度快、養(yǎng)殖周期短和經(jīng)濟(jì)價(jià)值高的特點(diǎn),目前已開(kāi)展規(guī)?;庇宛B(yǎng)殖[15-17].隨著自然海域野生群體資源量逐漸減少,為逐步恢復(fù)其自然資源,自2005年開(kāi)始在浙江海域持續(xù)放流了日本黃姑魚(yú)苗種,年均放流量在百萬(wàn)尾以上,然而目前還未見(jiàn)日本黃姑魚(yú)標(biāo)志方法的相關(guān)報(bào)道.本研究采用3種常用標(biāo)志方法,對(duì)2種不同規(guī)格的日本黃姑魚(yú)幼魚(yú)進(jìn)行標(biāo)志實(shí)驗(yàn),比較各標(biāo)志方法對(duì)幼魚(yú)的存活和生長(zhǎng)等指標(biāo)影響的差異,以期為下一步增殖放流跟蹤監(jiān)測(cè)與效果評(píng)估提供參考依據(jù).
實(shí)驗(yàn)于2014年7—8月在浙江省海洋水產(chǎn)研究所西閃試驗(yàn)場(chǎng)進(jìn)行.實(shí)驗(yàn)魚(yú)為生長(zhǎng)良好、攝食正常的人工繁育日本黃姑魚(yú)幼魚(yú),分2種規(guī)格,大規(guī)格(L)平均體長(zhǎng)(10.3±0.6) cm(范圍9.1~12.4 cm),小規(guī)格(S)平均體長(zhǎng)(6.8±0.5) cm(范圍5.1~7.9 cm).
將2種規(guī)格的實(shí)驗(yàn)魚(yú)分對(duì)照(control,CTR)組、掛牌標(biāo)志(H-bar tagging,HBT)組、金屬線碼標(biāo)志(coded wire tagging,CWT)組和切腹鰭標(biāo)志(ventral sundering tagging,VST)組共4組進(jìn)行實(shí)驗(yàn).標(biāo)志方法如下:HBT組利用標(biāo)志槍于待標(biāo)記魚(yú)體背鰭下方肌肉處刺穿,隨之將一枚帶有標(biāo)志牌的“H-bar”型卡扣固著(圖1(a));CWT組通過(guò)線碼標(biāo)志儀將印有數(shù)字金屬絲(長(zhǎng)度1.1 mm,直徑0.5 mm)注入日本黃姑魚(yú)眼后頭部的表層組織(圖1(b)),回捕時(shí)通過(guò)線碼檢測(cè)儀檢測(cè);VST組切除魚(yú)體左側(cè)3/4的腹鰭(圖1(c)).
圖1 3種標(biāo)志方法示意圖Fig.1 Demonstration of three tagging methods
在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí),先將標(biāo)志魚(yú)放入含有20 mg/L丁香酚的麻醉液中麻醉,20 s后取出進(jìn)行標(biāo)志;隨后用高錳酸鉀溶液對(duì)標(biāo)志魚(yú)浸泡消毒,按分組分別放入體積為200 L的圓形塑料桶內(nèi),每桶20尾,每種標(biāo)志方法設(shè)置3個(gè)平行組,共暫養(yǎng)14 d;待實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),對(duì)標(biāo)志魚(yú)進(jìn)行常規(guī)生物學(xué)指標(biāo)測(cè)定,并取肝臟和內(nèi)臟團(tuán)稱量.
實(shí)驗(yàn)用水為經(jīng)沙濾的天然海水,水溫為26.8~28.3 ℃,鹽度為27~28,pH為8.11~8.18.實(shí)驗(yàn)期間每個(gè)塑料桶內(nèi)注水200 L,并放入1個(gè)充氣石連續(xù)充氣.實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前實(shí)驗(yàn)魚(yú)禁食24 h,實(shí)驗(yàn)期間每天分別在 07:00 和 16:00 各投喂飼料 1 次,投喂量為實(shí)驗(yàn)魚(yú)體質(zhì)量的3%~5%,投喂0.5 h后換水;每天觀察記錄魚(yú)體攝食、活動(dòng)、脫標(biāo)和死亡等情況,并進(jìn)行生物學(xué)指標(biāo)測(cè)定[9].
標(biāo)志魚(yú)的各項(xiàng)生長(zhǎng)指標(biāo)計(jì)算公式如下:
增長(zhǎng)率(LGR,%)=(Lt2-Lt1)/Lt1×100%,
增重率(WGR,%)=(Wt2-Wt1)/Wt1×100%,
餌料轉(zhuǎn)換效率(FCE,%)=(Wt2-Wt1)/I×100%,
肝體比(HSI,%)=(肝臟質(zhì)量/體質(zhì)量)×100%,
臟體比(VSI,%)=(內(nèi)臟團(tuán)質(zhì)量/體質(zhì)量)×100%,
豐滿度(CF,g/cm3)=體質(zhì)量/(體長(zhǎng))3.
其中,Lt1和Lt2分別為實(shí)驗(yàn)魚(yú)平均初始體長(zhǎng)和平均終末體長(zhǎng),Wt1和Wt2分別為實(shí)驗(yàn)魚(yú)平均初始體質(zhì)量和平均終末體質(zhì)量,I為實(shí)驗(yàn)期間總投餌量.用SPSS 13.0軟件對(duì)標(biāo)志方法和魚(yú)體規(guī)格與不同生長(zhǎng)指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析(p<0.05表示顯著相關(guān),p<0.01表示極顯著相關(guān)),并對(duì)不同組數(shù)據(jù)進(jìn)行Duncan多重比較(p<0.05表示差異顯著).
經(jīng)14 d暫養(yǎng),各標(biāo)志組日本黃姑魚(yú)的成活率和標(biāo)志成功率如表1所示.結(jié)果顯示:3種標(biāo)志組的實(shí)驗(yàn)魚(yú)平均成活率均高于98%,其中CWT組和VST組達(dá)100%,可見(jiàn)3種標(biāo)志方法對(duì)實(shí)驗(yàn)魚(yú)的成活影響不大.HBT組標(biāo)志成功率顯著低于CWT組和VST組(p<0.05),且HBT組標(biāo)志成功率受不同規(guī)格影響較大,S組平均標(biāo)志成功率為(85.00±5.00)%,而L組為(93.33±2.89)%,S組標(biāo)志成功率顯著低于L組(p<0.05),即規(guī)格較小的實(shí)驗(yàn)魚(yú)脫標(biāo)率較高.
經(jīng)14 d暫養(yǎng),各標(biāo)志組日本黃姑魚(yú)的終末體長(zhǎng)與初始體長(zhǎng)呈正線性相關(guān),回歸曲線及方程見(jiàn)圖2.分別估算初始體長(zhǎng)范圍5.0~14.0 cm的各標(biāo)志組實(shí)驗(yàn)魚(yú)14 d后的理論終末體長(zhǎng),結(jié)果如表2所示:HBT組的理論終末體長(zhǎng)在初始體長(zhǎng)為5.0~11.0 cm范圍內(nèi)均最小,而在初始體長(zhǎng)為12.0~14.0 cm時(shí)大于CWT組和VST組.
表1 不同標(biāo)志組日本黃姑魚(yú)的成活率和標(biāo)志成功率
注:上標(biāo)字母不同表示差異顯著(p<0.05),下同.
圖2 不同標(biāo)志組日本黃姑魚(yú)終末體長(zhǎng)與初始體長(zhǎng)的相關(guān)性Fig.2 Correlation of final and initial body lengths of N. japonica in different tagging groups
當(dāng)初始體長(zhǎng)達(dá)到10.0 cm及以上時(shí),HBT組相對(duì)于CTR組理論終末體長(zhǎng)的減小幅度在3%以內(nèi);而CWT組和VST組理論終末體長(zhǎng)由接近逐漸轉(zhuǎn)為小于CTR組,且VST組比CWT組的減小幅度大.
各標(biāo)志組日本黃姑魚(yú)的生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定結(jié)果如表3所示:HBT組的LGR最小,為(21.26±2.89)%,顯著低于其他各組(p<0.05),而CWT組和VST組的LGR略高于CTR組但無(wú)顯著差異;HBT組的WGR也最小,為(84.32±24.62)%,且與CWT組和VST組差異顯著(p<0.05),而與CTR組無(wú)顯著差異;3種標(biāo)志方法均使標(biāo)志魚(yú)的FCE較CTR組有不同程度的降低,其中HBT組和CWT組顯著低于CTR組(p<0.05);3種標(biāo)志方法對(duì)標(biāo)志魚(yú)的HSI均無(wú)顯著影響,而VST組的VSI減小且顯著低于其他各組(p<0.05);此外,3種標(biāo)志方法中僅HBT組的CF較CTR組顯著增大(p<0.05),而CWT組和VST組的CF與CTR組無(wú)顯著差異.
表2 不同標(biāo)志組日本黃姑魚(yú)的理論終末體長(zhǎng)
表3 不同標(biāo)志組日本黃姑魚(yú)的生長(zhǎng)指標(biāo)差異
將各標(biāo)志組2種規(guī)格的實(shí)驗(yàn)魚(yú)綜合統(tǒng)計(jì),結(jié)果顯示(表4):除HSI外,標(biāo)志魚(yú)的LGR、WGR、FCE、VSI和CF受標(biāo)志方法影響均極顯著(p<0.01);而FCE和VSI受標(biāo)志魚(yú)體規(guī)格影響極顯著(p<0.01);標(biāo)志方法和魚(yú)體規(guī)格的交互作用對(duì)VSI影響顯著(p<0.05),對(duì)FCE和HSI影響極顯著(p<0.01).由此說(shuō)明標(biāo)志魚(yú)的生長(zhǎng)指標(biāo)受標(biāo)志方法影響顯著,而魚(yú)體規(guī)格對(duì)LGR、WGR和CF影響不顯著,可以將其作為衡量標(biāo)志方法效果的重要指標(biāo).
表4 不同生長(zhǎng)指標(biāo)與標(biāo)志方法、魚(yú)體規(guī)格的相關(guān)性分析
注:*p<0.05,**p<0.01.
Davis等[18]發(fā)現(xiàn)“H-bar”型標(biāo)志時(shí)標(biāo)志針頭過(guò)短會(huì)引起標(biāo)志牌脫落,標(biāo)志成功率較低;而與較長(zhǎng)的標(biāo)志針配套的錨定端直徑相應(yīng)較大,意味著對(duì)標(biāo)志魚(yú)損傷也較大[13].本研究選用的標(biāo)志針頭長(zhǎng)度為8 mm,同時(shí)將人為操作對(duì)標(biāo)志魚(yú)損傷降至最低.Nielsen等[19]認(rèn)為標(biāo)志對(duì)魚(yú)體成活的影響與標(biāo)志方法及被標(biāo)志魚(yú)個(gè)體大小有關(guān),因小個(gè)體魚(yú)類(lèi)可能難以承受掛牌標(biāo)志操作的壓力和額外的代謝負(fù)擔(dān),故掛牌標(biāo)志一般用于個(gè)體較大的魚(yú),如體長(zhǎng)在15 cm以上[20-21].
掛牌、金屬線碼和切腹鰭標(biāo)志是國(guó)內(nèi)外常用的3種物理標(biāo)志方法,其中掛牌標(biāo)志法由于具有標(biāo)志魚(yú)易被鑒別的特點(diǎn)而受到更多關(guān)注[10].本研究中VST組經(jīng)14 d暫養(yǎng),發(fā)現(xiàn)一側(cè)鰭條出現(xiàn)明顯再生現(xiàn)象,鰭條呈淡黃色,約為正常鰭條大小的3/4,故僅適用于短期標(biāo)志;HBT組由于個(gè)別魚(yú)體肌肉感染或魚(yú)體間刮擦出現(xiàn)脫標(biāo)現(xiàn)象,脫標(biāo)個(gè)體僅出現(xiàn)于暫養(yǎng)前5 d之內(nèi),而未脫標(biāo)個(gè)體標(biāo)記清晰,適用于長(zhǎng)期標(biāo)志;CWT組對(duì)魚(yú)體影響非常小,也可適用于較長(zhǎng)時(shí)間標(biāo)志[22].本研究中VST組和CWT組標(biāo)志成功率均達(dá)(98.33±2.89)%;而HBT組標(biāo)志成功率略低,且受標(biāo)志魚(yú)體規(guī)格影響顯著,大規(guī)格標(biāo)志魚(yú)的標(biāo)志成功率高于小規(guī)格.由此可見(jiàn)日本黃姑魚(yú)的標(biāo)志成功率與標(biāo)志方法和標(biāo)志魚(yú)體規(guī)格有密切關(guān)系.
本研究發(fā)現(xiàn)HBT組日本黃姑魚(yú)的LGR和WGR均低于其他各組,而CF卻高于其他各組.分析其可能原因?yàn)閽炫茦?biāo)志對(duì)實(shí)驗(yàn)魚(yú)肌肉有一定損傷,使生長(zhǎng)所需的部分同化能被用于肌肉修復(fù)[13];而肌肉受損可能引起相應(yīng)的生理和代謝脅迫,使活動(dòng)頻率下降,能量消耗減少,導(dǎo)致CF反而增加[23-24].此外,當(dāng)初始體長(zhǎng)小于10.0 cm時(shí),HBT組的日本黃姑魚(yú)生長(zhǎng)較慢;而當(dāng)初始體長(zhǎng)達(dá)到10.0 cm及以上時(shí),理論終末體長(zhǎng)相對(duì)于CTR組的減少幅度才降至3%以內(nèi).因此,建議使用掛牌標(biāo)志法時(shí)選取平均體長(zhǎng)在10.0 cm以上的魚(yú).
本研究中與HBT組相比,CWT組和VST組的實(shí)驗(yàn)魚(yú)生長(zhǎng)情況更接近于CTR組,但VST組的VSI和CWT組的FCE均顯著小于CTR組,而這兩組的LGR和WGR卻均略有上升.其原因可能為切腹鰭標(biāo)志破壞了原有的神經(jīng)和骨骼組織,進(jìn)而影響了內(nèi)臟器官發(fā)育[9,25],而魚(yú)體本身存在著補(bǔ)償生長(zhǎng)作用,通過(guò)增加攝食量來(lái)保證增長(zhǎng)和增重[26],但是由于部分生長(zhǎng)量被轉(zhuǎn)移至機(jī)體修復(fù)使用,從而造成FCE有所降低[27].本研究觀測(cè)時(shí)間僅為14 d,相對(duì)較短,不同標(biāo)志對(duì)魚(yú)體的長(zhǎng)期影響及其機(jī)制有待進(jìn)一步研究.
標(biāo)志魚(yú)放流后的跟蹤監(jiān)測(cè)主要依靠漁民回捕,因此需要醒目的標(biāo)志使其容易辨識(shí),以保證標(biāo)志魚(yú)的回捕率,從而進(jìn)一步確保對(duì)放流效果的評(píng)估[28].從標(biāo)志的顯現(xiàn)性來(lái)看,掛牌標(biāo)志最為醒目,很容易被捕獲者發(fā)現(xiàn),便于標(biāo)志魚(yú)的回捕[10].切腹鰭標(biāo)志,如采用本研究的方法,再生的鰭條沒(méi)有明顯彎曲或扭曲,且再生速度快,即使再生的鰭條與正常鰭條有明顯差異,也相對(duì)較難被發(fā)現(xiàn).孫忠等[9]對(duì)鮸魚(yú)進(jìn)行標(biāo)志研究試驗(yàn)時(shí),認(rèn)為鮸魚(yú)切鰭后,兩側(cè)腹鰭對(duì)比差異明顯.從短期看該標(biāo)志方法基本可行,如切腹鰭標(biāo)志可用于苗種繁育中對(duì)部分親體進(jìn)行鑒別[5],但在海區(qū)回捕標(biāo)志魚(yú)時(shí),漁民不經(jīng)細(xì)致辨認(rèn)較難發(fā)現(xiàn).金屬線碼標(biāo)志魚(yú)的成活率和標(biāo)志成功率較高[29-30],但回捕時(shí)需要借助金屬掃描儀辨識(shí),在目前漁獲未能集中在指定地點(diǎn)交易的條件下,從諸多零散分布的碼頭或漁獲交易市場(chǎng)回捕金屬線碼標(biāo)志魚(yú)相對(duì)困難.徐開(kāi)達(dá)等[10]在浙江省舟山海域的黑鯛標(biāo)志放流回捕試驗(yàn)也顯示金屬線碼標(biāo)志魚(yú)回捕較困難,因此建議在回捕相對(duì)集中或相對(duì)封閉的水域采用金屬線碼標(biāo)志法[31].
本研究結(jié)果表明:掛牌、金屬線碼和切腹鰭標(biāo)志對(duì)日本黃姑魚(yú)的標(biāo)志成功率均較高,其中金屬線碼標(biāo)志和切腹鰭標(biāo)志對(duì)魚(yú)體生長(zhǎng)影響不大,而掛牌標(biāo)志會(huì)導(dǎo)致標(biāo)志魚(yú)的LGR和WGR減小;除HSI外,不同標(biāo)志方法對(duì)標(biāo)志魚(yú)的FCE、VSI和CF等生長(zhǎng)指標(biāo)均有一定程度的影響.綜合分析認(rèn)為,切腹鰭僅適用于短期標(biāo)志,而金屬線碼和掛牌標(biāo)志法可用于長(zhǎng)期標(biāo)志,其中掛牌標(biāo)志法標(biāo)志效果受標(biāo)志魚(yú)體規(guī)格影響明顯,標(biāo)志時(shí)宜根據(jù)標(biāo)志要求進(jìn)行合理選擇:當(dāng)日本黃姑魚(yú)體長(zhǎng)小于10.0 cm時(shí),可選擇切腹鰭和金屬線碼2種標(biāo)志方法;掛牌標(biāo)志法對(duì)日本黃姑魚(yú)的規(guī)格要求較高,最適標(biāo)志魚(yú)體長(zhǎng)需達(dá)10.0 cm及以上.
致謝:感謝在暫養(yǎng)過(guò)程和標(biāo)志實(shí)驗(yàn)中得到舟山錦島水產(chǎn)科技公司許源劍、賀舟挺的支持和幫助.
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廈門(mén)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)2018年3期