阿爾茨海默病患者同型半胱氨酸的表達(dá)水平及認(rèn)知功能減退的危險因素

朱 燁 吳雅利 李寶香

(江西省人民醫(yī)院住院部一部，江西 南昌 330006)

阿爾茨海默病(AD)近年來發(fā)病率呈逐年增高的趨勢〔1〕，具體發(fā)病機(jī)制尚不明確，有研究認(rèn)為可能與同型半胱氨酸(Hcy)水平異常增高導(dǎo)致的氧化損傷有關(guān)〔2〕。Hcy是氨基酸半胱氨酸的異種，既往研究證實Hcy水平升高會對神經(jīng)系統(tǒng)造成損傷，與神經(jīng)系統(tǒng)疾病有密切關(guān)系〔3〕。本文探討AD患者血漿Hcy表達(dá)水平，試圖探明Hcy在AD發(fā)生與發(fā)展中的作用，分析AD患者認(rèn)知功能減退的危險因素。

1 資料和方法

1.1臨床資料 選擇江西省人民醫(yī)院于2016年1月至2017年7月收治的60例AD患者作為AD組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)根據(jù)AD的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)〔4〕確診；(2)缺血指數(shù)量表(HIS)評分≤4分；(3)腦部影像學(xué)檢查證實無局灶性病變；(4)臨床資料完整，均為初診病例，入組前未接受過針對AD的任何治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并帕金森病等可導(dǎo)致認(rèn)知功能障礙的疾病者；(2)入組前3個月內(nèi)服用過可能影響Hcy代謝的藥物(如維生素B)者；(3)合并血液系統(tǒng)疾病、自身免疫性疾病、感染性疾病、肝腎衰竭及惡性腫瘤者；(4)誤診病例及未完成本研究中所有調(diào)查項目者。AD組男36例，女24例；年齡57～86歲，平均(70.36±4.78)歲；病程8個月至10年，平均(3.67±1.24)年；文化程度：本科及以上13例，初中至大專31例，小學(xué)及以下16例；根據(jù)AD的診斷標(biāo)準(zhǔn)，AD前無癥狀階段21例，AD前臨床有癥狀階段24例，AD期15例。另選擇同期在本院體檢的健康者47人作為對照組，男28人，女19人；年齡55～84歲，平均(68.97±6.17)歲；文化程度：本科及以上10人，初中至大專24人，小學(xué)及以下13人。AD組與對照組性別、年齡、文化程度等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)同意。

1.2方法 對象均于清晨抽取空腹靜脈血7 ml，分三管(3 ml、2 ml、2 ml)。3 ml管血樣本在室溫(37℃)環(huán)境下靜置30 min，3 000 r/min離心5 min后常規(guī)分離留取血清。采用已糖激酶法測定血清空腹血糖(FPG)水平，儀器為美國伯樂Bio-Rad公司生產(chǎn)的D10型糖化血紅蛋白分析儀及配套試劑盒檢測FPG，正常參考值3.89～6.10 mmol/L；采用三酰甘油(TG)檢測試劑盒(GPO-PAP法)檢測血清TG水平，試劑盒購于深圳市庫貝爾生物科技有限公司，正常值<1.7 mmol/L；采用總膽固醇測定試劑盒(COD-PAP法)檢測總膽固醇(TC)，試劑盒購于上海豐匯醫(yī)學(xué)科技有限公司，正常參考值3.0～5.2 mmol/L，嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行操作。2 ml管中的1管血樣品采用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-2K)抗凝，3 000 r/min離心5 min后常規(guī)分離留取血清，采用循環(huán)酶法檢測Hcy水平，采用日立7600全自動生化分析儀進(jìn)行分析，試劑盒購于北京九強(qiáng)公司，嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行操作，正常參考值<15 μmol/L。另一管2 ml血樣品采用EDTA-2K抗凝，混勻后取全血測定糖化血紅蛋白(HbA1c)，試劑盒(上海晶抗生物工程有限公司)，實驗操作嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行，正常參考值≤6.5%。

1.3觀察指標(biāo) (1)各項指標(biāo)檢測結(jié)果：比較兩組血漿Hcy水平及簡易精神狀態(tài)量表(MMSE)〔5〕、蒙特利爾認(rèn)知評估(MoCA)量表〔6〕、日常生活能力(ADL)〔7〕評分、神經(jīng)精神癥狀問卷中文版(CNPI)〔8〕評分；(2)分析Hcy水平與MMSE、MoCA、ADL和CNPI評分的相關(guān)性；(3)AD患者認(rèn)知功能減退危險因素單因素分析：根據(jù)MMSE評分和MoCA評分進(jìn)行分組，MMSE評分(大專及以上<23分、初中高中<22分、小學(xué)<20分、文盲<17分)和MoCA評分<26分的為認(rèn)知功能減退組(28例)，其余為無認(rèn)知功能減退(32例)，比較兩組年齡、性別、教育年限、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、病情進(jìn)展(AD前無癥狀階段、AD前有臨床癥狀階段、AD期三個階段)、FPG、TG、TC、Hcy和HbA1c水平差異；(4)認(rèn)知功能減退危險因素多因素分析：以患者年齡、性別、教育年限、SBP、DBP、病情進(jìn)展、FPG、TG、TC、Hcy和HbA1c為自變量，以認(rèn)知功能減退與否為因變量，采用多因素Logistic回歸分析法分析危險因素。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS21.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行t、χ2檢驗；采用Spearman相關(guān)系數(shù)分析和多因素Logistic回歸分析。

2 結(jié) 果

2.1Hcy水平及各量表評分結(jié)果 AD組Hcy水平、CNPI評分顯著高于對照組，MoCA評分、MMSE評分、ADL評分顯著低于對照組，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.2AD組患者Hcy水平與各量表評分的相關(guān)性 相關(guān)性分析顯示，AD組患者血漿Hcy水平與MMSE評分呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.798，P=0.007)，與MoCA得分呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.784，P=0.007)，與ADL評分呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.815，P=0.006)，與CNPI評分呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.884，P=0.005)。

2.3AD組患者認(rèn)知功能減退危險因素單因素分析 單因素分析結(jié)果顯示，AD組患者認(rèn)知功能減退與年齡、血漿Hcy水平、病情進(jìn)展及SBP、 DBP有關(guān)，有認(rèn)知功能減退者的年齡大于無認(rèn)知功能減退者，病情進(jìn)展為AD期所占比例、血漿Hcy水平高于無認(rèn)知功能減退者，SBP、DBP水平小于無認(rèn)知功能減退者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；與患者的性別、教育年限、FPG、TG、TC和HbA1c無關(guān)(P>0.05)。見表2。

2.4AD組患者認(rèn)知功能減退危險因素多因素Logistic回歸分析 多因素分析結(jié)果顯示，高齡、病情進(jìn)展為AD期、高水平Hcy是AD患者認(rèn)知功能減退的獨(dú)立危險因素(P<0.05)，性別、教育年限、SBP、DBP、FPG、TG、TC和HbA1c不是AD患者認(rèn)知功能減退的獨(dú)立危險因素(P>0.05)。見表3。

表1 兩組Hcy水平及各量表評分結(jié)果比較

表2 AD組認(rèn)知功能減退的危險因素單因素分析

1)：依次為AD前無癥狀階段、AD前臨床有癥狀階段、AD期

表3 AD組認(rèn)知功能減退危險因素多因素Logistic回歸分析

3 討 論

AD是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變，具體發(fā)病機(jī)制尚不十分明確。近年來關(guān)于AD的研究，多集中于常用腦脊液tau蛋白、β淀粉樣蛋白等生物標(biāo)志物檢測，但腦脊液獲取較困難，不便于臨床推廣。Hcy是一種結(jié)構(gòu)為HSCH2(NH2)CO2H的含硫氨基酸，參與體內(nèi)多種能量代謝及甲基化反應(yīng)，是蛋氨酸循環(huán)脫甲基后的衍生物，通過甲基化途徑、轉(zhuǎn)硫化途徑和在高濃度蛋氨酸情況下直接釋放到細(xì)胞液中三條途徑參與細(xì)胞內(nèi)代謝〔9〕。既往研究〔10〕證實血漿Hcy水平升高與冠心病、深靜脈血栓形成及腦卒中等多種血管性疾病有密切的關(guān)系，是這些疾病發(fā)生與發(fā)展的獨(dú)立危險因素。Hcy的致病機(jī)制為：機(jī)體血液中的Hcy容易被氧化形成Hcy化合物、超氧化離子自由基和過氧化氫，進(jìn)而造成血管平滑肌細(xì)胞增殖和損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，因此推斷Hcy與AD的發(fā)生與發(fā)展有密切關(guān)系〔11〕。

本研究顯示，AD組患者血漿Hcy呈高水平表達(dá)的狀態(tài)。Hcy由細(xì)胞內(nèi)的蛋氨酸脫甲基形成，當(dāng)其進(jìn)入體循環(huán)后大部分以血漿白蛋白的氧化形式存在，少量以還原型Hcy的形式存在于血液中，在正常生理狀態(tài)下，Hcy的合成與代謝是一個動態(tài)平衡的狀態(tài)，此情況下血液中的Hcy水平較低〔12〕。如果Hcy的動態(tài)平衡被破壞，其代謝關(guān)鍵酶基因突變或活性受損，導(dǎo)致血液Hcy水平升高(即發(fā)生Hcy血癥)。本文結(jié)果說明AD患者精神障礙、認(rèn)知功能障礙程度越嚴(yán)重。Hcy與MMSE、MoCA、ADL和CNPI等量表評分存在顯著的相關(guān)性關(guān)系，而以上各量表是評估AD患者病情及預(yù)后的重要工具，說明血漿Hcy水平與AD患者的認(rèn)知功能有明顯的相關(guān)性。檢測血漿Hcy水平可作為AD患者早期診斷、病情及預(yù)后評估的重要指標(biāo)。

在AD的臨床治療中，應(yīng)早期針對性進(jìn)行降低血漿Hcy水平的治療，同時應(yīng)注意控制患者的血壓。Hcy在AD患者認(rèn)知功能減退中的作用機(jī)制可能為：首先，Hcy水平增高可引起腦血管病變，增加了腦卒中的危險性，更易引發(fā)AD〔13〕；其次，Hcy水平增高使內(nèi)皮素功能異常，降低了一氧化氮活性，氧應(yīng)激增加，使得腦老化加劇，加速了認(rèn)知功能減退〔14〕；第三，血液中Hcy水平增高能誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元凋亡，強(qiáng)化了β淀粉樣蛋白變性，增強(qiáng)了谷氨酸的神經(jīng)細(xì)胞毒性作用加速了患者認(rèn)知功能減退〔15〕。

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