應(yīng)用FSH、PMSG+人工授精誘導(dǎo)肉牛產(chǎn)雙胎的初步試驗(yàn)

劉瑞鑫，許春榮，覃孝杰，許 鵬，何復(fù)明，李美珍，李 銘，劉德玉，李芳芳

（廣西壯族自治區(qū)畜禽品種改良站，南寧 530001）

近年來，廣西的肉牛產(chǎn)業(yè)發(fā)展呈現(xiàn)了良好的態(tài)勢(shì)，規(guī)模肉牛場(chǎng)不斷增加。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2013年底全區(qū)共有規(guī)模肉牛場(chǎng)749個(gè)，其中存欄超過1 000頭的肉牛場(chǎng)3個(gè)；而2014年3月調(diào)查表明，全區(qū)規(guī)模肉牛場(chǎng)已經(jīng)超過800個(gè)，1 000頭以上的大型規(guī)模場(chǎng)有6個(gè)。牛是單胎動(dòng)物，繁殖周期長(zhǎng)，好的母牛一年可以產(chǎn)一胎。隨著規(guī)模場(chǎng)的不斷增加，牛源問題就成了產(chǎn)業(yè)發(fā)展亟需解決的難題，如何提高母牛的繁殖率，尤其讓母牛產(chǎn)雙胎擺在了產(chǎn)業(yè)發(fā)展的前臺(tái)。通過應(yīng)用激素或采取其他繁殖新技術(shù)讓母牛產(chǎn)雙胎，業(yè)內(nèi)畜牧工作者進(jìn)行了很多深入的嘗試，且取得了不錯(cuò)的效果。桑潤(rùn)滋［1］應(yīng)用“雙胎靈”誘導(dǎo)雙胎，雙胎率達(dá) 31.4%（109/347）。張傳師等［2］用人工授精+胚胎移植（AI+ET）法誘發(fā)肉牛雙胎，雙胎率達(dá)60.8%（79/130）。吳乃科等［3］應(yīng)用孕馬血清、人絨毛膜促性腺素、三合激素、抗血促性素血清等促性腺激素藥物處理母牛，人工誘導(dǎo)產(chǎn)雙胎，雙胎率28.6%（16/56）。本文旨在探討應(yīng)用FSH、PMSG等生殖激素誘導(dǎo)肉牛排雙卵，再結(jié)合人工授精技術(shù)，以達(dá)到肉牛產(chǎn)雙犢的目的，從而提高優(yōu)良肉牛的繁殖效率。

1 材料與方法

1.1 材料

促卵泡素（FSH）：由加拿大Vetrephaim Canada Inc生產(chǎn)，規(guī)格每瓶400 mg，配有稀釋液；孕馬血清（PMSG）：每瓶1 000 IU，配有稀釋液，軍需醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所生產(chǎn)；孕酮陰道栓（CIDR）：新西蘭Inter Greaulane公司進(jìn)口；獸用前列腺素（PG）：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所研制生產(chǎn)，規(guī)格每支0.3 mg；促卵泡素（LHRH-A3）：寧波市三生藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，規(guī)格每支25 μg。

1.2 試驗(yàn)牛群

在廣西區(qū)內(nèi)選擇2個(gè)飼養(yǎng)管理?xiàng)l件相對(duì)較好、堅(jiān)持自繁自養(yǎng)、以雜交母牛為主的規(guī)模肉牛養(yǎng)殖場(chǎng)作為試驗(yàn)基地，共選取了120頭發(fā)情周期正常、無生殖系統(tǒng)疾病的經(jīng)產(chǎn)母牛作為試驗(yàn)供體牛。

1.3 方法

誘導(dǎo)試驗(yàn)牛群排雙卵的方法有兩種：FSH法和PMSG法，兩個(gè)規(guī)模場(chǎng)各采用一種。具體操作如下：

（1）FSH法誘導(dǎo)肉牛排雙卵處理程序：在試驗(yàn)牛性周期的任意一天放置CIDR（當(dāng)天記為第0天），第5天和第6天以遞減劑量臀部肌肉深部注射FSH 5 mL（20 mL稀釋液稀釋一瓶FSH），第7天和第8天每頭牛各肌肉注射PG 0.6 mg，第8天在注射PG后撤出CIDR，第9天觀察試驗(yàn)牛發(fā)情情況，第10天上午進(jìn)行直腸檢查，記錄卵泡發(fā)育情況（單卵、雙卵還是多卵泡發(fā)育），適時(shí)進(jìn)行人工授精，授精后每頭牛臀部肌肉注射促排卵素 3號(hào)（LHRH-A3）50 μg，60 d后妊娠檢查。本方法共處理供體牛87頭，具體操作程序見表1。

（2）PMSG法誘導(dǎo)肉牛排雙卵處理程序：在試驗(yàn)牛性周期的任意一天放置CIDR（當(dāng)天記為第0天），第9天上午每頭牛肌注PMSG 2 000 IU，第10天上午每頭肌注PG 0.6 mg，第11天上午撤出CIDR，觀察發(fā)情情況，第12天上午進(jìn)行直腸檢查，記錄卵泡發(fā)育情況（單卵、雙卵還是多卵泡發(fā)育），適時(shí)進(jìn)行人工授精，授精后每頭牛臀部肌肉注射促排卵素 3 號(hào)（LHRH-A3）50 μg，第 13天上午直腸檢查一次，未排卵的再人工授精一次，60 d后進(jìn)行妊娠檢查，本方法共處理供體牛33頭，具體操作程序見表2。

表1 FSH法誘導(dǎo)肉牛排雙卵處理程序

表2 PMSG法誘導(dǎo)肉牛排雙卵處理程序

2 結(jié)果與分析

從表3可知，用FSH法誘導(dǎo)肉牛排雙卵，處理87頭，人工授精87頭，直腸檢查排雙卵的有10頭，60 d后妊檢，懷孕27頭，其中8頭產(chǎn)下雙犢，妊娠率31%，雙胎率29.6%；用PMSG處理33頭，人工授精33頭，排雙卵10頭，妊娠3頭，其中1頭產(chǎn)下雙犢，妊娠率9.1%，雙胎率33.3%。

兩種激素處理誘導(dǎo)肉牛排雙卵的效果及妊娠率都偏低，都不是很理想。

表3 FSH、PMSG誘導(dǎo)肉牛排雙卵結(jié)果

3 討論與結(jié)論

牛屬于單胎動(dòng)物，自然發(fā)情情況下，一個(gè)發(fā)情周期一般僅有一個(gè)卵泡發(fā)育成熟并排卵，相應(yīng)地形成一個(gè)黃體，這是維持正常懷孕所必需的條件。自然情況下，母牛排雙卵并懷上雙胎的機(jī)率1%～4%。利用促性腺激素誘發(fā)單胎動(dòng)物產(chǎn)雙胎的技術(shù)，在單胎品種的綿羊已經(jīng)取得成功，但成功率僅50%左右；在牛上，該技術(shù)的應(yīng)用卻困難極大，原因是激素處理誘發(fā)的排卵數(shù)不易控制，排卵過多會(huì)嚴(yán)重干擾懷孕過程。當(dāng)牛的卵巢上黃體數(shù)超過3個(gè)時(shí)會(huì)造成懷孕困難，往往引起胚胎死亡或胚胎發(fā)育不良、牛犢不易成活等。在采用促性腺激素對(duì)母牛進(jìn)行處理的情況下，激素劑量小時(shí)只能起到一般的催情作用（只排1個(gè)卵子），劑量大時(shí)常導(dǎo)致排卵數(shù)過多（超數(shù)排卵）。所以如何才能恰到好處地讓母牛一次只排2個(gè)卵子，這個(gè)問題至今還未能得到圓滿解決［4］。從筆者等對(duì)試驗(yàn)牛的直腸檢查情況看，F(xiàn)SH法處理87頭牛，直檢排雙卵的僅有10頭；PMSG法處理33頭，排雙卵的10頭，可見在用外源激素處理誘發(fā)母牛排雙卵時(shí)，激素劑量的大小并不好掌握。

母牛超數(shù)排卵的效果受母牛本身遺傳特性、體況、營(yíng)養(yǎng)、年齡、季節(jié)以及激素制品的質(zhì)量和用量等影響。PMSG處理可與同期發(fā)情處理相結(jié)合，達(dá)到提高雙胎率的目的。在使用PMSG時(shí)，一般在發(fā)情周期的第12～13天注射PMSG。使用FSH，一般采用遞減法，連續(xù)注射3～4 d，上、下午各一次皮下或肌肉注射。如使用前列腺素做同期發(fā)情處理，在注射前列腺素藥物的同時(shí)開始注射FSH，總量和方法不變。但由于母牛個(gè)體對(duì)激素的耐受性不同，誘導(dǎo)后只產(chǎn)單胎，或誘導(dǎo)后產(chǎn)多胎，從而導(dǎo)致犢牛出生重過低或成活率低，在生產(chǎn)中不易推廣［5］。筆者等在用PMSG處理的試驗(yàn)中就出現(xiàn)過1例懷3胞胎流產(chǎn)的情況；用FSH法處理，出現(xiàn)過妊娠檢查確診懷雙胎12頭，但最終僅有1頭產(chǎn)下雙胎，期間有11頭母牛出現(xiàn)了胚胎吸收或流產(chǎn)的情況。

本試驗(yàn)用FSH和PMSG誘導(dǎo)肉牛排雙卵的雙胎率與盧維等［6］報(bào)道的用 CIDR+E2+P4+FSH+PG+LHRH-A3法誘導(dǎo)肉牛產(chǎn)雙胎的雙胎率還存在一定的差距，這可能與所用的激素種類、質(zhì)量、劑量等有很大關(guān)系，也可能與母牛的營(yíng)養(yǎng)水平、飼養(yǎng)管理、技術(shù)員的技術(shù)水平等有關(guān)。

從本次試驗(yàn)及盧維等［6］的報(bào)道來看，用FSH或PMSG處理，結(jié)合人工授精技術(shù)是可以誘導(dǎo)肉牛產(chǎn)雙胎的，排雙卵或產(chǎn)雙胎的關(guān)鍵在于如何選擇外源激素并掌握它的用量。在用外源激素誘導(dǎo)肉牛排雙卵時(shí)，多次肌肉注射激素對(duì)母牛本身造成了一定的應(yīng)激反應(yīng)，在一定程度上也影響了最終的效果，今后在誘發(fā)肉牛排雙卵時(shí)應(yīng)加強(qiáng)對(duì)簡(jiǎn)化處理程序或降低注射應(yīng)激等方面的研究。

［1］桑潤(rùn)滋.動(dòng)物繁殖生物技術(shù)［M］.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2002：149-150.

［2］張傳師，劉長(zhǎng)松，馬建山，等.人工授精+胚胎移植（AI+ET）法誘發(fā)肉牛雙胎的試驗(yàn)研究［J］.中國(guó)草食動(dòng)物，2006，26（3）：23-24.

［3］吳乃科，萬發(fā)春，孫希山.人工誘導(dǎo)母牛生產(chǎn)雙胎肉牛的研究［J］.山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2001（1）：35-36.

［4］李德遠(yuǎn).淺談肉牛誘導(dǎo)雙胎技術(shù)［J］.農(nóng)家參謀，2000（7）：20.

［5］郭憲，閻萍，梁春年.雙胎技術(shù)的研究與應(yīng)用［J］.中國(guó)畜牧雜志，2009（增刊）：240-243.

［6］盧維，韋蘭鋒，蒙善朝，等.同期發(fā)情+超數(shù)排卵+人工授精誘導(dǎo)肉牛產(chǎn)雙犢的初步試驗(yàn)［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2017（12上）：122-124.