血根堿對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)及小腸黏膜免疫功能的影響

陳家順 康寶聚 曾建國 胡海波 趙玉蓉 陳 柳 姚 康* 符晨星,*

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長(zhǎng)沙 410128；2.中國科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所，亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)過程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖南省畜禽健康養(yǎng)殖工程技術(shù)中心，長(zhǎng)沙 410125；3.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，湖南省植物功能成分利用協(xié)同創(chuàng)新中心，長(zhǎng)沙 410128；4.湖南美可達(dá)生物資源有限公司,長(zhǎng)沙 410128；5.瀏陽市畜牧獸醫(yī)水產(chǎn)局，瀏陽 410300)

在現(xiàn)代生豬生產(chǎn)中，為了提高母豬繁殖效率，降低母子間疾病傳播幾率等，早期斷奶早已被采用。然而由于生理、營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境的突然改變，導(dǎo)致斷奶仔豬采食量下降、腸道疾病頻發(fā)、生長(zhǎng)阻滯、死亡率提高，通常稱之為斷奶應(yīng)激綜合征[1]。盡管在斷奶仔豬飼糧中添加抗生素能在一定程度上提高動(dòng)物的生長(zhǎng)性能和抗病能力，緩解斷奶應(yīng)激綜合征[2]，但是抗生素類飼料添加劑的大量使用，甚至濫用，導(dǎo)致畜禽胃腸道內(nèi)的細(xì)菌耐藥性大幅提高，動(dòng)物體內(nèi)殘留和環(huán)境污染等問題日漸加劇，從而影響動(dòng)物源性的食品安全，并直接影響人類健康和環(huán)境安全[3-4]。因此，迫切需要開發(fā)新的無藥物殘留、無污染、無抗藥性的綠色抗生素用于畜牧養(yǎng)殖業(yè)。血根堿是從博落回中分離出來的苯菲啶異喹啉類生物堿，具有使用后易降解，對(duì)環(huán)境污染小的優(yōu)勢(shì)，其成分特殊，作用機(jī)理獨(dú)特[5-6]。血根堿及其衍生物具有較強(qiáng)的細(xì)胞滲透性，對(duì)一些病原菌，如沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和大腸桿菌等具有較強(qiáng)抑制作用[7]。血根堿還具有抗腫瘤[8-10]、增強(qiáng)免疫力[11]、抗炎[12]、抗氧化[13]等多種藥理作用，由此可見，血根堿以其特有的藥理學(xué)特性，具有開發(fā)成新型綠色飼料添加劑的潛力。隨著血根堿在人類臨床中的廣泛應(yīng)用，其在畜禽養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用也備受關(guān)注。Kosina等[13]研究表明，在28日齡斷奶仔豬飼料中添加含3.75 mg/kg血根堿的博落回生物堿，能夠刺激仔豬食欲來增加采食量，保護(hù)腸道內(nèi)必需氨基酸的降解，進(jìn)而促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)。Lee等[14]和劉靖[15]研究表明，肉雞飼糧中血根堿與有機(jī)酸聯(lián)用能夠改善腸道結(jié)構(gòu)及腸道菌群平衡而達(dá)到促生長(zhǎng)效果。云龍[16]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加血根堿能顯著提高黃羽肉雞血清免疫球蛋白M(IgM)含量，并改善腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)，促進(jìn)雞的生長(zhǎng)性能。目前，有關(guān)血根堿在畜禽中促生長(zhǎng)效果的原因還不是很明確，但都提到可能與改善腸道健康有關(guān)，而其對(duì)斷奶仔豬腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)及免疫功能的影響研究尚未見報(bào)道?；诖耍驹囼?yàn)在斷奶仔豬飼糧中添加血根堿，探討其對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)及小腸黏膜免疫功能的影響，旨在為開發(fā)安全、高效、環(huán)保的無抗仔豬飼糧提供理論依據(jù)和參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

血根堿制劑：血根堿有效濃度為1.5%，由湖南美可達(dá)生物資源有限公司提供；所用抗生素為金霉素，有效成分含量為15%，市售產(chǎn)品。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選取23日齡平均體重為(6.55±0.18) kg的健康“杜×長(zhǎng)×白”三元雜交斷奶仔豬36頭，按體重相近、性別比例相同原則隨機(jī)分為3組，分別飼喂基礎(chǔ)飼糧(對(duì)照組)、基礎(chǔ)飼糧+75 mg/kg 金霉素(抗生素組)、基礎(chǔ)飼糧+50 mg/kg血根堿(血根堿組)，每組12個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭豬，試驗(yàn)期21 d。

1.3 試驗(yàn)飼糧與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)基礎(chǔ)飼糧按照NRC(2012)[17]飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。本試驗(yàn)在中國科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所動(dòng)物樓飼養(yǎng)室進(jìn)行，仔豬采用不銹鋼單籠飼養(yǎng)。每天對(duì)仔豬進(jìn)行喂食3次，時(shí)間分別為07:30、12:00和18:30，自由采食和飲水，粉料飼喂，以食槽無剩料為原則。試驗(yàn)期間每日準(zhǔn)確記錄每頭豬的實(shí)際采食量，觀察豬群的健康情況。室內(nèi)消毒、清掃按常規(guī)程序進(jìn)行，并保持豬舍通風(fēng)、清潔。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(飼喂基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供 The premix provided the following per kg of the diet：VA 10 800 IU，VD34 000 IU，VE 40 IU，VK33.4 mg，VB11.6 mg，VB212 mg，VB66 mg，VB120.05 mg，生物素 biotin 0.2 mg，葉酸 folic acid 2 mg，煙酸 niacin 50 mg，D-泛酸鈣D-calcium pantothenate 25 mg,Fe 80 mg，Cu 100 mg，Mn 50 mg，Zn 90 mg，Co 1 mg,Se 0.17 mg，I 0.15 mg。

2)營(yíng)養(yǎng)水平為計(jì)算值。Nutrient levels were calculated values.

1.4 樣品采集

于試驗(yàn)結(jié)束后，禁食12 h，所有試驗(yàn)豬靜脈注射150.00 mg/kg BW戊巴比妥鈉，待其麻醉后，按常規(guī)程序進(jìn)行屠宰，并采集小腸各段[包括十二指腸(距幽門約10 cm處)、空腸(小腸中段)及回腸(距回盲腸結(jié)遠(yuǎn)端約5 cm處)]各2.5 cm，固定于10%中性甲醛溶液中，用于制作石蠟切片，蘇木精-伊紅(HE)染色以檢測(cè)腸道形態(tài)。各腸段剩余部分用剪刀輕輕剖開10 cm左右的十二指腸、空腸和回腸腸段，用無菌磷酸鹽緩沖液(PBS)輕輕沖洗腸壁內(nèi)容物，并用濾紙吸干腸段表面的水分，而后用玻璃載玻片刮取腸黏膜，使用錫箔紙將樣品進(jìn)行包裹，立即放入液氮中速凍，然后轉(zhuǎn)移至-80 ℃冰箱中保存待測(cè)。

1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.5.1 生長(zhǎng)性能

飼養(yǎng)試驗(yàn)開始第1天早晨對(duì)每頭仔豬進(jìn)行空腹稱重，為初始體重，飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后再次稱重，記錄仔豬的體重，并計(jì)算出每組仔豬的平均日增重(ADG)；記錄每頭仔豬每天的給料量和剩料量，計(jì)算每組仔豬的平均日采食量(ADFI)以及料重比(F/G)。計(jì)算公式如下：

ADG=(初始體重-終末體重)/試驗(yàn)天數(shù)；ADFI=總采食量/試驗(yàn)天數(shù)；F/G=ADFI/ADG。

每天08:00觀察斷奶仔豬糞便情況，記錄每組仔豬日腹瀉頭數(shù)及腹瀉天數(shù)，計(jì)算腹瀉率：

腹瀉率(%)=100×(每天腹瀉頭數(shù)×
腹瀉天數(shù))/(試驗(yàn)豬頭數(shù)×試驗(yàn)天數(shù))。

1.5.2 腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)

取出10%甲醛溶液中固定的腸道組織，經(jīng)常規(guī)脫水、石蠟包埋、切片、HE染色后，利用Motic Images Advanced 3.2軟件，測(cè)量十二指腸、空腸、回腸隱窩深度和絨毛高度，每張切片觀察10個(gè)視野，并計(jì)算絨毛高度/隱窩深度(V/C)值[18]。

1.5.3 小腸黏膜免疫球蛋白含量

參考王斌星等[2]的方法，將十二指腸、空腸和回腸黏膜溶于2 mL PBS(pH=7.4)中，于3 500 ×g離心5 min，收集上清液。小腸黏膜免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)和IgM含量均采用豬酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)試劑盒測(cè)定，具體測(cè)定方法見ELISA Kit(南京森貝伽生物科技有限公司)說明書。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2013進(jìn)行初步處理，用軟件SPSS 20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較和差異顯著性檢驗(yàn)，腹瀉率采用非參數(shù)Kruskal-Wallis檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。以P<0.01作為差異極顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)，P<0.05作為差異顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)，0.05≤P<0.10作為呈升高或降低趨勢(shì)的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 血根堿對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，血根堿組和抗生素組的ADG和ADFI顯著提高(P<0.05)，F(xiàn)/G和腹瀉率顯著降低(P<0.05)；但血根堿組與抗生素組間以上生長(zhǎng)性能指標(biāo)均無顯著性差異(P>0.05)。由此推斷，飼糧中添加血根堿可以提高斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，且效果與添加抗生素相當(dāng)。

2.2 血根堿對(duì)斷奶仔豬小腸形態(tài)的影響

由圖1和表3可知，與對(duì)照組相比，血根堿組和抗生素組的十二指腸絨毛高度、V/C值顯著升高(P<0.05)，空腸絨毛高度、V/C值極顯著升高(P<0.01)，但血根堿組和抗生素組間以上指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)；而血根堿組回腸絨毛高度、V/C值顯著高于其他2組(P<0.05)。由此推斷，飼糧中添加血根堿可以增加斷奶仔豬腸道黏膜表面積，從而提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收效率。

2.3 血根堿對(duì)斷奶仔豬小腸黏膜免疫球蛋白含量的影響

由表4可知，與對(duì)照組相比，血根堿組和抗生素組十二指腸黏膜IgA含量顯著升高(P<0.05)，IgM含量極顯著升高(P< 0.01)；空腸黏膜IgA和IgG含量顯著升高(P<0.05)；回腸黏膜IgG和IgM含量顯著升高(P<0.05)，IgA含量極顯著升高(P<0.01)。但血根堿組和抗生素組間以上指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)。由此推斷，飼糧中添加血根堿可以提高斷奶仔豬的腸道免疫功能。

表2 血根堿對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)無字母或相同小寫字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same small letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), and with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as below.

圖1 斷奶仔豬小腸形態(tài)學(xué)檢測(cè)

項(xiàng)目Items對(duì)照組Controlgroup抗生素組Antibioticgroup血根堿組SanguinarinegroupP值P-value絨毛高度Villusheight/μm十二指腸Duodenum509.31±13.49b554.27±31.21a589.56±19.68a0.015空腸Jejunum500.83±18.78Bb539.94±24.45Aa562.48±30.20Aa0.007回腸Ileum499.16±16.85b515.39±33.74b543.87±11.94a0.023隱窩深度Cryptdepth/μm十二指腸Duodenum307.55±16.33305.87±18.68300.21±25.570.421空腸Jejunum296.37±18.41287.49±17.56270.33±10.260.095回腸Ileum280.43±13.99271.58±19.27257.59±28.120.147絨毛高度/隱窩深度V/C十二指腸Duodenum1.66±0.09b1.81±0.11a1.96±0.12a0.038空腸Jejunum1.69±0.04Bb1.88±0.05Aa2.08±0.11Aa0.006回腸Ileum1.78±0.07b1.89±0.18b2.11±0.11a0.014

表4 血根堿對(duì)斷奶仔豬小腸黏膜免疫球蛋白含量的影響

3 討 論

血根堿是一種新型待開發(fā)的植物性生物堿，其作為一種飼料添加劑在動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)和飼料中的應(yīng)用，主要是基于作為抗生素的替代物來進(jìn)行的[19]。長(zhǎng)期大量使用抗生素會(huì)引起病原菌耐藥性增強(qiáng)、腸道正常菌群結(jié)構(gòu)被破壞以及藥物殘留等一系列的問題，給人類健康造成潛在的威脅。大鼠的安全評(píng)估研究表明，高劑量的血根堿及其衍生物長(zhǎng)期飼喂大鼠90 d，不引起機(jī)體損傷，且其原形物或代謝產(chǎn)物不在體內(nèi)殘留[20]。同時(shí)國內(nèi)外一些研究表明，血根堿在畜禽應(yīng)用中有顯著的促生長(zhǎng)和降低腹瀉效果。饒華等[21]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加血根堿能顯著提高斷奶仔豬ADG和ADFI，降低腹瀉率和緩解仔豬斷奶應(yīng)激，同時(shí)與添加金霉素相比，ADG和ADFI差異不顯著。戴波[22]研究也發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加血根堿能夠降低斷奶仔豬腹瀉率。Kantas等[23]研究表明，飼糧中添加50 mg/kg血根堿能夠增加斷奶仔豬的體重和ADG。Vieira等[24]研究報(bào)道，在火雞飼糧中添加50 mg/kg血根堿，提高了火雞的生長(zhǎng)性能。本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加50 mg/kg血根堿顯著提高了斷奶仔豬的ADG和ADFI，顯著降低了腹瀉率，并達(dá)到與抗生素相當(dāng)?shù)男Ч?，這與上述研究結(jié)果基本一致，其促生長(zhǎng)作用機(jī)理可能是：1)血根堿與色氨酸結(jié)構(gòu)相似，具有類似的含氮環(huán)狀結(jié)構(gòu)，可以抑制腸道內(nèi)芳香族氨基酸脫羧酶活性，減少芳香族氨基酸降解，提高仔豬對(duì)色氨酸、苯丙氨酸在小腸中的利用效率，增加蛋白質(zhì)的沉積[25]；2)也可能是由于血根堿具有抗氧化功能，降低了肌肉的抗氧化反應(yīng)，減少氧化應(yīng)激[13]；3)還可能是因?yàn)轱暭Z中添加血根堿增加了空腸和回腸相對(duì)長(zhǎng)度[14]，改變了腸道形態(tài)，進(jìn)而促進(jìn)了有效的營(yíng)養(yǎng)吸收，提高了飼糧消化率，從而促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)。

小腸作為動(dòng)物消化、吸收的主要場(chǎng)所，常作為衡量動(dòng)物消化吸收功能的重要指標(biāo)。小腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的完整性與否是保證動(dòng)物消化吸收功能的關(guān)鍵。而小腸絨毛高度、絨毛寬度、隱窩深度及V/C值是反映小腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)及功能完整性最直接的指標(biāo)[26]。小腸絨毛高度越大，小腸吸收面積就越大；腸絨毛寬度越大、隱窩越深，消化吸收功能就越低；V/C值越大，消化吸收能力就越強(qiáng)[27]。Lee等[14]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加血根堿增加了肉雞空腸和回腸相對(duì)長(zhǎng)度。賀喜等[28]研究表明，飼糧中添加博落回生物堿可以顯著提高黃羽肉雞V/C值。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加血根堿顯著提高了絨毛高度和V/C值，且有降低空腸隱窩深度的趨勢(shì)，這與血根堿促進(jìn)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的結(jié)果相一致[29]。上述結(jié)果說明血根堿可以改善斷奶仔豬腸道黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的發(fā)育，從而提高對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力，進(jìn)而提高動(dòng)物的生長(zhǎng)性能。李杰等[30]利用體外培養(yǎng)豬腸道上皮細(xì)胞(intestinal porcine epithelial cells，IPEC-1)研究表明，血根堿濃度在0.006 25～0.1 μg/mL對(duì)IPEC-1的增殖有顯著的促進(jìn)作用。這說明血根堿可能通過促進(jìn)小腸細(xì)胞增殖分化更新，從而增強(qiáng)小腸消化、吸收、免疫屏障和應(yīng)激反應(yīng)等。此外，血根堿改善小腸黏膜組織結(jié)構(gòu)還可能與血根堿作為抗菌物質(zhì)，能夠抑制大腸桿菌等病原菌在腸道上定植，增加腸道乳酸桿菌的數(shù)量[31]，從而對(duì)腸道黏膜起到保護(hù)作用有關(guān)。本試驗(yàn)中，血根堿與抗生素對(duì)斷奶仔豬小腸生長(zhǎng)發(fā)育的影響無顯著差異?？股乜捎行б种撇≡脑鲋?，但會(huì)破壞胃腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)，血根堿能夠通過競(jìng)爭(zhēng)性抑制有害病原菌的繁殖[32-34]，從而對(duì)腸道菌群結(jié)構(gòu)起到保護(hù)作用[14]。同時(shí)，這也在一定程度解釋了血根堿降低斷奶仔豬腹瀉的原因。對(duì)于血根堿對(duì)斷奶仔豬腸道菌群結(jié)構(gòu)和腸道發(fā)育的影響，還需進(jìn)一步深入研究。

動(dòng)物試驗(yàn)證明博落回具有較好的免疫增強(qiáng)作用，可提高血清白蛋白/球蛋白值，對(duì)T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞功能均有刺激作用[35-36]。血根堿作為博落回中主要有效成分，近幾年，中國一些獸藥公司把血根堿作為免疫增強(qiáng)劑添加到飼料中，用于提高動(dòng)物的免疫力。滿意等[37]研究表明，飼糧中添加博落回提取物能夠提高斷奶仔豬血清IgG含量，顯著改善免疫功能，明顯增強(qiáng)斷奶仔豬抗病能力，從而改善生長(zhǎng)性能，且其效果優(yōu)于土霉素。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧中添加血根堿可顯著提高斷奶仔豬小腸黏膜IgA、IgG和IgM含量，達(dá)到與抗生素相當(dāng)?shù)男Ч?，這與云龍[16]和何夏陽[29]的研究結(jié)果相一致。

4 結(jié) 論

飼糧中添加血根堿可以改善腸黏膜形態(tài)，提高小腸黏膜免疫功能，從而提高斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，達(dá)到與添加抗生素相當(dāng)?shù)男Ч?。結(jié)果提示，血根堿可有效緩解斷奶應(yīng)激，用于減少或替代抗生素在斷奶仔豬飼糧中的使用。

參考文獻(xiàn)：

[1] 李維,馮培剛,王恬.仔豬斷奶應(yīng)激及其營(yíng)養(yǎng)調(diào)控[J].家畜生態(tài)學(xué)報(bào),2007,28(6):1-4.

[2] 王斌星,王蜀金,郭春華,等.釀酒酵母發(fā)酵液對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、小腸發(fā)育及小腸黏膜免疫功能的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2016,28(12):4014-4022.

[3] 王彪,張慧林,劉小林.天然植物提取物在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用研究[J].畜牧獸醫(yī)雜志,2010,29(1):37-39.

[4] 楚維斌,史彬林,紅雷,等.抗生素在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用·危害及科學(xué)使用[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2015(19):128-130.

[5] BLANKR,MüLLER-SIEGWARDT B,WOLFFRAMS,et al.Sanguinarine does not influence availability or metabolism of tryptophan in pigs[J].Livestock Science,2010,134(1/2/3):24-26.

[6] 王靜慧,韓劍眾,曲道峰.血根堿體外抑菌作用及其對(duì)細(xì)菌生物被膜的影響[J].中國畜牧雜志,2012,48(19):67-70.

[7] WEERASINGHE P,HALLOCK S,TANG S C,et al.Role of Bcl-2 family proteins and caspase-3 in sanguinarine-induced bimodal cell death[J].Cell Biology and Toxicology,2001,17(6):371-381.

[8] HUSSAIN A R,AL-JOHAH N A,SIRAJ A K,et al.Sanguinarine-dependent induction of apoptosis in primary effusion lymphoma cells[J].Cancer Research,2007,67(8):3888-3897.

[9] MATKAR S S,WRISCHNIK L A,HELLMANN-BLUMBERG U.Sanguinarine causes DNA damage and p53-independent cell death in human colon cancer cell lines[J].Chemico-Biological Interactions,2008,172(1):63-71.

[10] ZHANG C,LING F,CHI C,et al.Effects of praziquantel and sanguinarine on expression of immune genes and susceptibility toAeromonashydrophilain goldfish (Carassiusauratus) infected withDactylogyrusintermedius[J].Fish & Shellfish Immunology,2013,35(4):1301-1308.

[11] BOJJIREDDY N,SINHA R K,PANDA D,et al.Sanguinarine suppresses IgE induced inflammatory responses through inhibition of type Ⅱ PtdIns 4-kinase(s)[J].Archives of Biochemistry and Biophysics,2013,537(2):192-197.

[12] YUAN L,RONG J,MA Z G,et al.Sanguinarine inhibits angiotensin Ⅱ-induced apoptosis in H9c2 cardiac cells via restoring reactive oxygen species-mediated decreases in the mitochondrial membrane potential[J].Molecular Medicine Reports,2015,12(3):3400-3408.

[13] KOSINA P,WALTEROVD,ULRICHOVA J,et al.Sanguinarine and chelerythrine:assessment of safety on pigs in ninety days feeding experiment[J].Food and Chemical Toxicology,2004,42(1):85-91.

[14] LEE K W,KIM J S,OH S T,et al.Effects of dietary sanguinarine on growth performance,relative organ weight,cecal microflora,serum cholesterol level and meat quality in broiler chickens[J].The Journal of Poultry Science,2015,52(1):15-22.

[15] 劉靖.博落回生物堿對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)的影響[D].碩士學(xué)位論文.長(zhǎng)沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué),2010.

[16] 云龍.血根堿制劑對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)性能及抗氧化功能的影響[D].碩士學(xué)位論文.長(zhǎng)沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué),2016.

[17] NRC.Nutrient requirements of swine[S].11th ed.Washington,D.C.:National Academy Press,2012.

[18] 賀琴,王自蕊,游金明,等.酵母壁多糖對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和小腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2016,28(11):3536-3541.

[19] 張衛(wèi)兵,張蓉,屠焰,等.血根堿的作用機(jī)制及其在動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)上的應(yīng)用效果[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2017,29(1):27-33.

[21] 饒華,蔡鵬,周錫紅,等.博落回提取物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響[J].中國獸藥雜志,2009,43(11):42-45.

[22] 戴波.血根堿對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響及腹瀉防治效果的研究[D].碩士學(xué)位論文.長(zhǎng)沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué),2015.

[23] KANTAS D,PAPATSIROS V G,TASSIS P D,et al.The effect of a natural feed additive (Macleayacordata),containing sanguinarine,on the performance and health status of weaning pigs[J].Animal Science Journal,2015,86(1):92-98.

[24] VIEIRA S L,BERRES J,REIS R N,et al.Studies with sanguinarine like alkaloids as feed additive in broiler diets[J].Brazilian Journal of Poultry Science,2008,10(1):67-71.

[25] DRSATA J,ULRICHOVJ,WALTEROVD.Sanguinarine and chelerythrine as inhibitors of aromatic amino acid decarboxylase[J].Journal of Enzyme Inhibition,1996,10(4):231-237.

[26] 荀文娟,周漢林,侯冠彧,等.姜黃素對(duì)早期斷奶仔豬回腸黏膜形態(tài)、緊密連接蛋白和炎性因子基因表達(dá)以及血清免疫球蛋白水平的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2016,28(3):826-833.

[27] 蘇家宜,孔祥峰,李華偉,等.芪楂口服液藥渣對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和腸道健康的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2017,29(5):1730-1738.

[28] 賀喜,劉靖,張石蕊,等.博落回生物堿對(duì)黃羽肉雞生產(chǎn)性能、內(nèi)臟器官及腸道健康的影響[C]//第六次全國飼料營(yíng)養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集.楊凌:中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì),2010.

[29] 何夏陽.血根堿對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分消化率和血液生化指標(biāo)的影響[D].碩士學(xué)位論文.長(zhǎng)沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué),2010.

[30] 李杰,伍樹松,熊興耀,等.博落回生物堿對(duì)豬腸上皮細(xì)胞增殖的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2014,26(6):1632-1637.

[31] YAKHKESHI S,RAHIMI S,NASERI K G.The effects of comparison of herbal extracts,antibiotic,probiotic and organic acid on serum lipids,immune response,GIT microbial population,intestinal morphology and performance of broilers[J].Lunión Médicale Du Canada,2011,113(10):826-828.

[32] WINK M,SCHMELLER T,LATZ-BRüNING B.Modes of action of allelochemical alkaloids:interaction with neuroreceptors,DNA,and other molecular targets[J].Journal of Chemical Ecology,1998,24(11):1881-1937.

[33] 孫文霞,袁仕善,黃瓊瑤,等.血水草生物堿及其血根堿抑菌作用的研究[J].實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué),2010,17(9):1864-1866.

[34] HERRERA-MATA H,ROSAS-ROMERO A,OSCAR C V.Biological activity of “sanguinaria” (Justiciasecunda) extracts[J].Pharmaceutical Biology,2008,40(3):206-212.

[35] 郭小清,唐莉蘋,聶建超,等.博落回的藥理作用及其在動(dòng)物保健中的應(yīng)用[J].中國動(dòng)物保健,2005(5):34-35.

[36] 楊軍,王靜,劉信順,等.博落回的藥效研究[J].中藥材,1999(2):82-85.

[37] 滿意,張春勇,李美荃,等.博落回提取物對(duì)早期斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和血清免疫參數(shù)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2013,25(1):126-132.